본 연구에서는 어류병원바이러스 (infectious pancreatic necrosis virus (IPNV), viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV), hirame rhabdovirus (HIRRV), infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV), lymphocystis disease virus (LCDV))를 대상으로 바다 송사리 Oryzias dancena의 감수성을 조사하였다. 감염실험 결과, IPNV (실험조건: $15^{\circ}C$ 해수), VHSV ($15^{\circ}C$ 해수) 및 HIRRV ($15^{\circ}C$ 담수)에 침지된 송사리는 각각 30%, 40%, 60%의 누적폐사율이 관찰되었다. 이에 반해 IPNV ($15^{\circ}C$ 담수, $18^{\circ}C$ 해수 및 담수), VHSV ($15^{\circ}C$ 담수, $18^{\circ}C$ 해수 및 담수), HIRRV ($15^{\circ}C$ 해수), IHNV ($15^{\circ}C$ 해수 및 담수), LCDV ($15^{\circ}C$와 $18^{\circ}C$ 해수 및 담수) 침지 실험구 및 대조구에서는 10% 이하의 누적 폐사율이 확인되었다. 생존어와 폐사어를 대상으로 한 바이러스 분리 결과에서는 IPNV, VHSV 및 HIRRV에서 폐사된 개체로부터 바이러스가 분리되었으며, 또한 IPNV와 HIRRV에서 생존한 개체로부터도 바이러스가 분리되었다. 이상의 결과로 바다 송사리는 IPNV, VHSV 및 HIRRV에 감수성이 있음이 확인되었다.
In this study, we investigated the mechanism of cell death in rhabdovirus-infected cells, chinook salmon embryonic cell line (CHSE-2l4) infected with hirame rhabdovirus (HIRRV). Studies using light microscopy, fluorescence microscopy, TUNEL method, electron microscopy, and agarose gel electrophoresis revealed changes in the cell morphology and DNA fragmentation indicative of apoptosis in early infection. It was observed that HIRRV induced apoptosis as well as necrosis in infected cells.
Seo, Ji-Yeon;Kim, Ki-Hong;Kim, Sung-Koo;Kim, Young-Tae;Park, Tae-Jin
한국어업기술학회:학술대회논문집
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한국어업기술학회 2003년도 춘계 수산관련학회 공동학술대회발표요지집
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pp.313-314
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2003
Antiviral DNA vaccine carrying a gene for a major antigenic viral protein have received considerable attention as a new approach in vaccine development. For fish viruses effects of DNA vaccine encoding viral G gene of infectious hematopoietic necrosis virus(IHNV) and viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV)have been demonst.ated previously(Lapatra et al., 2001) Hirame rhabdovirus (HIRRV) causes hemorragic disease on flounder. (omitted)
본 연구에서는 무지개송어의 해수면 양식장으로의 이동에 따라 나타날 수 있는 어류 병원성 바이러스의 영향을 알아보기 위해, 담수 무지개송어 유래 병원체인 infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV)와 infectious pancreatic necrosis virus (IPNV)를 사용하여 주요 해산 양식 어종인 넙치, 조피볼락, 돌돔, 참돔 및 능성어에 주사한 후 병원성 및 감염 여부를 조사하였으며, 또한 해산 양식 어종 유래 병원체인 marine birnavirus (MABV), hirame rhabdovirus (HIRRV) 및 nervous necrosis virus (NNV)를 사용하여 무지개송어에 대한 병원성 및 감염 여부를 조사하였다. IHNV와 IPNV는 주요 해산 양식 어종에 감염되는 것으로 확인되었으며, 또한 무지개송어는 해산 유래 위해 병원체인 MABV와 NNV에 감염되거나 HIRRV에 의해 폐사되는 것으로 확인되었다. 이상의 연구 결과, 해수사육 무지개송어는 어류 병원성 바이러스들에 의해 영향 받을 수 있을 것으로 사료되었다.
감성돔 (Acanthopagrus schlegeli)의 비장에서 주화세포인 BSBS를 확립하고 세포의 특성을 검사하였다. BSBS세포는 60회 이상의 계대배양이 가능하였고 형태학적으로는 상피성 세포였다. 세포는 20℃, 10%의 FBS가 든 L-15배지에서 배양하는 조건에서 잘 자랐다. BSBS세포는 해양버나바이러스 (MABV Y-6), 잉어의 봄바이러스병바이러스 (SVCV), 넙치의 랍도바이스 (HIRRV)와 연어바이러스 (CSV)를 접종했을 때 세포변성효과가 나타났다. 새로 확립된 주화세포는 앞으로 많은 바이러스병의 연구에 유용하게 사용할 수 있을 것으로 생각된다.
Kim Young Ju;Kang Ji Hee;Kim Su Mi;Park Soo Il;Kim Sang Bong;Lee Myung Suk
Fisheries and Aquatic Sciences
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제8권3호
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pp.122-127
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2005
A DNA chip that rapidly and accurately detects the viral genes in rhabdovirus-infected fish was developed. The N, Ml, and G proteins of three rhabdovirus strains, infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV), viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV), and flounder rhabdovirus (HIRRV), were selected for use as probes. The sequences of the corresponding genes were obtained, and probes were prepared by PCR using specific primer sets. The specificity of the probes was confirmed by cross PCR. The prepared probes were spotted on poly-L-lysine- or aminosilane-coated glass slides and hybridized with target DNA under several different conditions in order to determine the optimal hybridization temperature, glass-slide coating, and target cDNA concentration.
Snakehead rhabdovirus (SHRV) is different from other fish novirhabdoviruses such as viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV), infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV), and hirame rhabdovirus (HIRRV) in that it replicates at high temperatures. Therefore, the delivery of foreign proteins to fish living at high water temperature would be possible by using recombinant SHRVs. In the present study, to evaluate the possible use of SHRV as a vehicle for foreign proteins delivery, we generated a recombinant SHRV that contains an enhanced-GFP (eGFP) gene between nucleoprotein (N) and phosphoprotein (P) genes (rSHRV-A-eGFP), and another recombinant SHRV expressing two heterologous genes by inserting an eGFP gene between N and P genes, and mCherry gene between P and M genes (rSHRV-AeGFP-BmCherry). Epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells infected with the recombinant SHRVs showed strong fluorescence(s), suggesting the possible availability of recombinant SHRVs for the development of combined vaccines by expressing multiple foreign antigens.
본 연구에서는 넙치(Paralichthys olivaceus)로부터 분리한 바이러스성출혈성패혈증바이러스(viral hemorrhagic septicemia virus, VHSV, genotype IVa)에 대한 단클론 항체(monoclonal antibody, MAb)를 개발하였다. VHSV에 대한 항체를 생산하는 총 5개의 hybridoma clone을 생산하였다. 4개의 MAbs (2C10, 18H4, 23H6, 30B7)는 glycoprotein을 인식하였고, MAb 15E10은 nucleocapsid protein을 인식하였다. 5개의 MAbs는 western blot 상에서 VHSV에 감염된 세포와 넙치시료에 반응하였으나, 정상 세포와 넙치시료에는 반응하지 않았다. 또한 ELISA상에서 VHSV에만 반응하였고 6종의 어류바이러스(IHNV, HIRRV, SVCV, IPNV, MABV, NNV)에는 반응하지 않았다. 이상의 결과, 본 연구에서 제작된 MAbs는 VHSV에만 특이적으로 반응하는 것이 확인되어 VHSV를 검사하는데 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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