The effect of low pH on physiological changes was studied with the acidophilic green alga, Clamydomonas acidophila, UTCC 122. The growthrates (${\mu}$) were identical, $0.5{\sim}0.7\;day^{-1}$, at pH 3.7${\sim}$6.7 and no significantly different (ANOVA, p =0.134), showing cell volume reduced gradually as they were growing, whereas that at pH 2.7 was falling to zero and cell volume increased dramatically. Chlorophyll a concentration of the cultures incubated for one day was $191{\sim}255\;pg\;cell^{-1}$, after then it declined from $60{\sim}103\;pg\;cell^{-1}$ at pH 3.7${\sim}$6.7 except $210\;pg\;cell^{-1}$ at pH 2.7, which was directly related with cell volume. External carbonic anhydrase (CA) activity was varied from1.1 to$3.7{\times}10^{-4}\;E.U.\;mm^{-2}$, showing the gradualincrease during culture, except at 2.7 and pH 5.7. However there was not found any relationship among the pH gradient cultures. CA molecular mass of C. acidophila was 29 kBa, and concentration of that was identical in all cultures. The proteins of 41 kDa and 63 were not or very faintly expressed in low pH cultures, in contrast that of 17 kDa more expressed. In this work, we found that C. acidophila could live optimally within a wide range of acidic pH, and 17 kDa of unidentified protein might be concerned with tolerating in low acid environment.
Periodate-oxidized soluble starch was reacted with papain at pH 4.0, pH 7.0, and pH 9.7, and an oxidized soluble starch-papain conjugate was produced. When compared with native papain, the specific activity decreased to 60%, in both the modified papain reacted with 0.4% $NaBH_4$ and in the modified papain not reacted with $NaBH_4$. The specific activity decreased to 70% in the modified papains reacted with 1.5% $NaBH_4$ and 4.0% $NaBH_4$, respectively. The reduction by $NaBH_4$ did not have an effect in the thermal stability of either the modified or nonmodified papain. An activity of 54.7% remained in the papain modified at pH 4.0, which was incubated at $80^{\circ}C$ for 40 min. The papains modified at pH 7.0 and pH 9.7 and incubated for 40 min at two different temperatures, respectively, were stable to $60^{\circ}C$, and at $80^{\circ}C$ their activities at 56.3% and 44.1 %, respectively. The modified papain's thermal stability pattern was similar to that of native papain, with no increase in its statbility. In the range of pH $2.0{\sim}13.0$, the stability of the papain modified at pH 4.0 decreased greatly between pH $3.0{\sim}5.0$, but it was similar to the native papain at other pH values. The stability of the papain modified at pH 7.0 showed a similar pattern to the native papain at pH $2.0{\sim}6.0$, while its stability increased when moving into the alkali pH range. The papain modified at pH 9.7 also had increased stability, when moving into the alkali range. The results of Hammerstein milk casein, which was reacted with the papains modified at pH 4.0, pH 7.0, and pH 9.7, respectively, and analyzed by FPLC, showed different peaks according to the different modification pHs, and the greatest peak differences were observed with the modification at pH 9.7.
Using Pseudomonas sp. CH-414, the optimum culture conditions were investigated for the cell growth and the phospholipid production in batch culture by varying pH and aeration rate. With starting the cultivation under the conditions of pH 7.0 and 1vvm, pH was controlled to 6 or 8 at 30 hours of culture time. In the case of changing into pH 6.0, the phospholipid production was increased by ca. 20% with comparison to the case of pH 7.0. However, the biomass and the phospholipld concentration were rapidly decreased after 30 hours of culture time when pH was controlled to 8.0. As the aeration rate was increased, the biomass was increased while the phospholipid concentration was considerably varied and unstable. Especially, the concentration of phospholipid was rapidly decreased with 3vvm of aeration rate. Finally, under the culture conditions of pH 7.0 and 3vvm until 30 hours for the cell growth, which were controlled to pH 6.0 and 1vvm for the stable production of phospholipid beyond that time, the dry cell weight was $18.5g/\ell$ and the phospholipid concentration was $\0.83g/ell$ (45mg/g cell).
To investigate the effects of sodium alginate, gum karaya and gum arabic on the foaming properties of sodium caseinate, surface tension, specific viscosity, turbidity, foaming ability and foam stability of the caseinate solution with added gums were examined. Surface tensions of the 5%(w/v) protein solutions containing gums at pH 7.0 and 8.0 were $43.7{\sim}44.7dyne/cm$ and $43.6{\sim}44.0 dyne/cm$, respectively. Specific viscosities of the solutions with 0.2 and 0.3% sodium alginates were 15.6 and 39.1 at pH 7.0 (control, 2.8), and 12.1 and 8.2 at pH 8.0 (control, 2.6), respectively. Turbidities were $69.5{\sim}74.0$ at pH 7.0 and $68.0{\sim}72.5$ at pH 8.0. The optimum conditions for foaming ability of the solutions were 0.1% conc. and 15 min whipping in addition of sodium alginates; 0.2% conc. and 20 min whipping in gum karaya; 0.1% conc. and 10 min whipping in gum arabic. For foam stability optimal concentrations were 0.3% in sodium alginate and gum karaya at pH 7.0 and 0.2% at pH 8.0. Addition of sodium alginates was most effective to increase foam stability of the solution, but was not effective to increase foaming ability. At same pH, surface tensions and turbidity of the solutions were related to foaming ability and specific viscosities were related to foam stability.
The distribution and characteristics of acidotolerant heterotrophic and naphthalene-degrading bacteria were investigated in two forest areas, one near Ulsan petrochemical industrial complex (Sunam) and the other in countryside (Daeam). Average values of soil pH at Sunam and Daeam were 3.8 and 4.6, respectively. When heterotrophic and naphthalene-degrading bacteria were enumerated by most probable number (MPN) procedures at Sunam, the median values of heterotrophs growing at pH 7.0 and pH 4.0 were $5.3{\times}10^7\;and\;3.3{times}10^7$ MPN/g, whereas those of naphthalene-degraders were $5.6{\times}10^4\;and\;4.0{times}10^5$ MPN/g, respectively. While the medians of heterotrophs at Daeam were larger than those at Sunam, the concentrations of naphthalene-degraders were higher at Sunam compared to those at Daeam. From the MPN tubes and enrichment cultures, we obtained 17 isolates of naphthalene-degraders which were identified as Sphingomonas paucimobilis, Brevundimonas vesicularis, Burkholderia cepacia, Ralstonia pickettii, Pseudomanas fluorescens, and Chryseomonas luteola. Among them, 6 isolates showed higher naphthalene-degrading activity on minimal media of pH 4 compared to pH 7, whereas the extent of growth was not greater at pH 4 than at pH 7 when they were inoculated on nutrient-rich media. It is plausible that the pH may affect naphthalene-degrading activity of the isolates by changing fatty acid composition of bacterial membrane.
The present study was evaluated the antibacterial effect of the combination of $Coptidis$$rhizoma$, $Glycyrrhiza$$uralensis$ Fischet, $Schizandra$$chinensis$ and $Corni$$Fructus$(1:1:1) extracts(CGSC10). Furthermore, the effectiveness of CGSC10, sodium chlorate, and the combination of CGSC10 and sodium chlorate(CGSCS10) against $E.$$coli$ O157:H7 infection was studied using ICR female mice. During the incubation period, the dose of 5, 10, and 20% CGSC10 was inhibited the growth of $E.$$coli$ O157:H7 by 34.7, 60.2, and 76.4%, respectively. For 7 days after single challenge with $E.$$coli$ O157:H7, forty female ICR mice were divided into four experimental groups which were administered in drinking water with saline, 10% CGSC10, 15 mM sodium chlorate, and CGSCS10, respectively. On the 3rd day, the number of $E.$$coli$ O157:H7 in mouse feces was significantly decreased by administration of CGSC10, 15 mM sodium chlorate, and CGSCS10 ($p$ < 0.001). On the 7th day-after administration, CGSC10, sodium chlorate, and CGSCS10 were decreased the number of $E.$$coli$ O157:H7 by 27.1, 67.7, and 83.3%, respectively. According to the results of the present study, administration of CGSCS10 to mice can reduce the severity of $E.$$coli$ O157:H7 infection. In addition, it is suggested that CGSCS10 represents a good candidate for the treatment of enteric infections in domestic animals.
The present study was evaluated the antibacterial effect of the combination of Coptidis rhizoma, Lonicerae Flos, and Paeonia japonica (1:1:1) extracts (CLP1000). Also, the effectiveness of CLP1000, dioctahedral smectite (DHS), and the combination of CLP1000 and DHS (CLPS1000) against E. coli O157:H7 infection was studied using ICR female mice. During the incubation period, the dose of 10% and 20% CLP1000 were inhibited the growth of E. coli O157:H7 by 30% and 47%, respectively. For 7 days after single challenge with E. coli O157:H7, forty female ICR mice were divided into four experimental groups which were orally administered with saline, 10% CLP1000, 10% DHS, and 10% CLPS1000, respectively. On the 3rd day, the number of E. coli O157:H7 in mouse feces was significantly decreased by administration of CLP1000 (p < 0.05), DHS (p < 0.05) and CLPS1000 (p < 0.001). On the 7th day, CLP1000 (p < 0.05) and CLPS1000 p < 0.001) administration significantly decreased the number of E. coli O157:H7. According to the results of the present study, administration of CLPS1000 to mice can reduce the severity of E. coli O157:H7 infection. Also, it is suggested that CLPS100 represents a good candidate for the treatment of enteric infections in domestic animals.
Type A influenza virus is circulating in wild birds and can infect wide ranges of hosts such as humans, pigs, domestic birds, and other mammals. Many subtypes of avian influenza viruses are circulating in aquatic birds. Most avian influenza viruses found in aquatic birds are low pathogenic avian influenza viruses. Highly pathogenic avian influenza viruses have been found in waterfowls since 2005. It is known that H5 and H7 subtypes of avian influenza viruses can be mutated into highly pathogenic avian influenza viruses in domestic poultry. In this study, we isolated novel reassortant H7N7 avian influenza virus from the fecal materials of migratory birds in the Western part of South Korea in 2016, and analyzed the sequences of all its eight genes. The genetic analysis of our isolate, A/waterfowl/Korea/S017/2016 (H7N7) indicates that it was reassortant avian influenza virus containing genes of both avian influenza viruses of wild birds and domestic ducks. Phylogenetic analysis showed that our isolate belongs to Eurasian lineage of avian influenza virus. Since avian influenza viruses continue to evolve, and H7-subtype avian influenza virus can mutate into the highly pathogenic avian influenza viruses, which cause the great threat to humans and animals, we closely survey the infections in both wild birds, and domestic poultry, and mammals.
Three and 2 strains of E coli O157 were isolated from fecal materials of cattle (390) and pigs (420) in Korea, respectively. One strain of O157:H7 isolated from cattle and 2 strains of O157:H7 isolated from pigs were identified as verotoxin-1 (VT-1) produing strains and 2 strains (O157:H7 and O157:H-) isolated from cattle were identified as verotoxin-2 (VT-2) producing strains by neutralization test on HeLa and Vero cells. Culture supernatants of the isolates were cytotoxic to HeLa and Vero cells. The levels of cytotoxin produced by isolates were $10^2{\sim}10^4$ cytotoxic dose($CD_{50}$)/ml. Also, VT-2-converting bacteriophage was isolated from KSC109 strain which had been isolated from cattle. Molecular weight of the phage DNA was determined as approximately 45 Kb in 0.8% agarose gel electrophoresis, and morphology of the phage stained with phosphotungstic acid was observed by transmissible electron microscopy.
For the rapid detection of various pathogenic microorganisms from food sample, various kinds of kits have been developed and commercially available in the markets. With the advantages of speed, accuracy and easiness, the market of these kits has gradually increased for the QC and QA field of food company as well as testing facilities or laboratories. In this study, the characteristics such as the detection limit and the sensitivity of immunochromatographic type of rapid detection kit (Donga Co, Korea, D-kit) for E. coli 0157:H7 developed by monoclonal antibody were examined and also the possibility of application of the kit to food samples was evaluated. The reference kits used for comparison study were Reveal E. coli 0157:H7 (Neogen Co., USA, R-kit) and VIP EHEC kit (Biocontrol Inc., USA, V-kit) occupying major market share. In the detection limit test with the E. coli 0157:H7 reference, both R-kit and D-kit showed a distinct positive reaction in $10^4$/ml and weak positive reaction in $10^3$/ml, whereas V-kit showed a same reaction in 105/ml. Also, it was identified that the culture treated with heat showed more sensitivity than no heat treated culture. The sensitivity test was conducted against 22 isolates of E. coli 0157:H7, 7 strains of non-O157:H7 verotoxin-producing E. coli, 40 strains of E. coli with different O and H antigen type, and 38 strains of non-E. coli Enterobacteriaceae, and all of the test strains except three were showed exactly three were showed exactly the same reaction against three kinds of the tested kits. All the three kinds of kits showed a positive reaction against E. coli O157:H19, E. coli O148:H18 and Salmonella galinarium. We suppose that there might be a similarity in serological property between these three strains and O157:H7. From the test results, it can be concluded that there is (was) no difference between the D-kit developed in this study and R-kit or V-kit based on the detection limit and sensitivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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