c-MYC (v-myelocytomatosis viral oncogene homologue) is a transcription factor that plays important role in many biological process including cell growth and differentiation, such as myogenesis and adipogenesis. In this study, we aimed to detect MYC gene polymorphisms, their genotype frequencies and to determine associations between these polymorphisms and meat quality traits in Berkshire pigs. We identified a single nucleotide polymorphism (SNP) in intron 2 of MYC gene by Sanger sequencing, i.e., g.3350G>C (rs321898326), that is only found in Berkshire pigs, but not in other breeds including Duroc, Landrace, and Yorkshire pigs that were used in this study. Genotypes of total 378 Berkshire pigs (138 sows and 240 boars) were determined using Hha I restriction enzyme digestion after polymerase chain reaction. Observed allele frequencies of GG, GC, and CC genotypes were 0.399, 0.508, and 0.093 respectively. Statistical analysis indicated that the g.3350G>C polymorphism was significantly associated with $pH_{45min}$ and cooking loss (p<0.05), suggesting that g.3350G>C SNP can be used for pre-selection of $pH_{45min}$ and cooking loss traits in Berkshire pigs.
Interferon regulatory factors (IRFs) are a family of transcription factors essential to the control of antiviral immune response, cell growth, differentiation and apoptosis. IRF10 of zebrafish (Danio rerio) was negative regulation of the interferonΦ1 and 3 response in vitro. In this study, we analyze the induction of in vivo immune response activation from the IRF10 gene of zebrafish and the protective effect against VHSV. As the results, the group inoculated with IRF10 expression vectors, there was no expression of IFNΦ1, suggestion that IRF10 may function as a negative regulator of IRF3, which binds to the IFNΦ1 promoter. And other types of interferon genes (IFNΦ2-4) are thought to have been activated, inducing to the expression of pro-inflammatory cytokine and Mx genes. As the results of challenge test performed at 14 days after inoculation of the expression vectors, the maximum survival rate [50% (1㎍ DNA) and 42.5% (10㎍ DNA)] for IRF10 group were recorded. Meanwhile, the survival rates of pcDNA3.1 and PBS as the control groups were 10% and 15%, respectively. This study suggests that the possibility that activation of IRF10 molecule could be exploited as a VHS control method.
두개봉합부의 조기융합으로 알려진 Craniosynostosis는 두개봉합부 주위 조직들 사이의 조화로운 상호작용이 파괴되었을 때 야기될 수 있다. 흥미롭게도 FGF receptor들, 특히 FGFR2의 point mutation은 여러 가지 형태의 craniosynostosis 증후군과 연관되어 있어, FGFR가 두개봉합부를 포함한 두개골 성장발달과정에 중요한 유전자임을 시사하고 있다. Mouse 두개봉합부의 초기형태발생시 FGFR 유전자들의 기능을 알아보기위해, in situ hybridization 방법을 이용하여 FGFR2(BEK) 및 골아세포분화의 초기표지자인 osteopontin이, 태생기(E15-18)에서 출생후(P1-P3)까지, 두개골의 시상봉합부에서의 발현양상을 조사하였다. FGFR2(BEK)은 osteogenic fronts에 강하게 발현되었으며, osteopontin은 parietal bone의 exo-, endocranial부위에서 발현되었으나, parietal bone의 성장가장자리인 osteogenic front에서는 관찰되지 않았다. 두개봉합부에서의 FGF-mediated FGFR signaling의 역할을 좀더 심도깊게 조사하기위해 E15.5 mouse의 두개골을 이용하여 in vitro 실험을 시행하였다. 흥미롭게도 osteogenic fronts 및 시상봉합부의 간엽조직 중앙에 FGF2-soaked beads를 점적하여 36시간 기관배양한 결과, bead주위 조직들의 두께 및 세포수가 증가되었으며, osteogenic fronts 상에 FGF4 beads를 올려놓은 경우, 시상두개봉합부 중앙에 점적된 FGF4 beads나 BSA control beads에 비해, 골성장이 촉진되어 시상두개봉합부의 부분적인 소멸을 관찰할 수 있었다. 이와 더불어 FGF2 beads는 osteopontin 및 Msx1 유전자의 발현을 유도하였다. 이 결과들을 종합해 볼 때, FGF-mediated FGFR signaling이 발육중인 두개골과 두개봉합부에서 세포의 증식과 분화의 균형을 조절하는데 중요한 역할을 담당하고 있음을 시사해주고 있으며, 이 과정중 FGF signaling이 osteopontin 및 Msx1 유전자의 발현을 조절하므로써 막내골성장 및 두개봉합부의 유지기전에 기여할 것으로 사료된다.
The purpose of this study is to evaluate the effect of IGF-I for DNA synthetic activity and the mRNA expression of bone matrix protein, type I collagen and osteopontin in prolifetation and differentiation of MC3T3-E1 cells. To evaluate DNA synthetic activity, cells were seeded at $2{\times}10^4cells/ml$ in 24 well plates and to evaluate mRNA of type I collagen and osteopontin cells were seeded at $5{\times}10^5cells/ml$ in 100mm culture dishes. These cells were cultured in alpha-minimum essential medium(${\alpha}-MEM$) containing 10% fetal bovine serum at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ incubator. For DNA synthetic activity test 1, 10, 100ng/ml IGF-I were added to the cells which had been cultured for 3 days before 24 hours. For type I collagen mRNA expression 1, 10ng/ml IGF-I were added to the cells which had been cultured for 5, 10 days and for osteopontin mRNA expression 0.1, 1, 10ng/ml IGF-I were added to the cells which had been cultured for 5, 15, 20 days. Cell proliferaton was measured by the incorporation of [$^3H$]-thymidine into DNA and expression for type I collagen and osteopontin were measured by northern blot analysis. The results were as follows : DNA synthetic activity were generally higher in experimental group than control group. Expressions of type I collagen mRNA were higher at 5 day group and much lower at 10 day group in the control groups. In the experimental groups, mRNA expressions were slightly increased when 1 ng/ml IGF-I were added to 5 day group and decreased in all experimental 10 day groups. Expressions of osteopontin mRNA were higher at 20 day groups and lower at 15 day groups than the control groups. In the experimental groups, mRNA expressions were incereased when 0.1, 1 ng/ml IGF-I were added to 5 day group and in all the 15 day groups, but decreased when 0.1, 1, 10 ng/ml IGF-I were added to 20 day groups. IGF-I stimulated DNA synthetic activity of MC3T3-E1 cells during proliferation stage significantly, did not greatly changed effects on type I collagen mRNA expression and stimulated osteopontin mRNA expression at 15 day especially. In conclusion, we suggests that IGF-I have a tendency of stimulation effect of DNA synthetic activity but do not stimulate type I collagen mRNA in proliferation stage of MC3T3-E1 cell cultures, and stimulate osteopontin mRNA in differentiation stage of MC3T3-E1 cell cultures.
The average twin lambing rate of Bayanbulak sheep is 2% to 3%. However, a flock of sheep with a close genetic relationship and an average of 2 to 3 lambs per birth has been found recently. To determine the major genes controlling the prolificacy of the flock in the present study, the flock was designated A while 100 normal Bayanbulak sheep were randomly selected to comprise the control flock B. Ligase detection reaction method was applied to detect and analyze the 10 mutational loci of the 3 candidate prolificacy genes including bone morphogenetic protein type I receptors, bone morphogenetic protein 15, and growth differentiation factor 9. The 10 mutational loci are as follows: FecB locus of the BMPR-IB gene; $FecX^I$, $FecX^B$, $FecX^L$, $FecX^H$, $FecX^G$, and $FecX^R$ of the BMP15 gene; and G1, G8, and FecTT of the GDF9 gene. Two mutations including BMPR-IB/FecB and GDF9/G1 were found in Bayanbulak sheep. Independence test results of the two flocks demonstrate that the FecB locus has a significant effect on the lambing number of Bayanbulak sheep. However, the mutation frequency of the G1 locus in GDF9 is very low. Independence test results demonstrate that the GDF9 locus does not have a significant impact on the lambing performance of Bayanbulak sheep. Among the 10 detected loci, BMPR-IB/FecB is the major gene that influences the high lambing rate of Bayanbulak sheep.
Liang, Fangfang;Jiang, Shouqun;Mo, Yi;Zhou, Guilian;Yang, Lin
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제28권8호
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pp.1194-1201
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2015
This study investigated the effect of oxidized soybean oil in the diet of young chickens on growth performance and intestinal oxidative stress, and indices of intestinal immune function. Corn-soybean-based diets containing 2% mixtures of fresh and oxidized soybean oil provided 6 levels (0.15, 1.01, 3.14, 4.95, 7.05, and $8.97meqO_2/kg$) of peroxide value (POV) in the diets. Each dietary treatment, fed for 22 d, had 6 replicates, each containing 30 birds (n = 1,080). Increasing POV levels reduced average daily feed intake (ADFI) of the broilers during d 1 to 10, body weight and average daily gain at d 22 but did not affect overall ADFI. Concentrations of malondialdehyde (MDA) increased in plasma and jejunum as POV increased but total antioxidative capacity (T-AOC) declined in plasma and jejunum. Catalase (CAT) activity declined in plasma and jejunum as did plasma glutathione S-transferase (GST). Effects were apparent at POV exceeding $3.14meqO_2/kg$ for early ADFI and MDA in jejunum, and POV exceeding $1.01meqO_2/kg$ for CAT in plasma and jejunum, GST in plasma and T-AOC in jejunum. Relative jejunal abundance of nuclear factor kappa B ($NF-{\kappa}B$) P50 and $NF-{\kappa}B$ P65 increased as dietary POV increased. Increasing POV levels reduced the jejunal concentrations of secretory immunoglobulin A and cluster of differentiation (CD) 4 and CD8 molecules with differences from controls apparent at dietary POV of 3.14 to $4.95meqO_2/kg$. These findings indicated that growth performance, feed intake, and the local immune system of the small intestine were compromised by oxidative stress when young broilers were fed moderately oxidized soybean oil.
Huang, Ai-Li;Liu, Shu-Guang;Qi, Wen-Juan;Zhao, Yun-Fei;Li, Yu-Mei;Lei, Bin;Sheng, Wen-Jie;Shen, Hong
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권19호
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pp.8143-8147
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2014
To investigate the expression intensity and prognostic significance of TGF-${\beta}1$ protein in non-small cell lung cancer (NSCLC), immunohistochemistry was carried out in 194 cases of NSCLC and 24 cases of normal lung tissues by SP methods. The PU (positive unit) value was used to assess the TGF-${\beta}1$ protein expression in systematically selected fields under the microscope with Leica Q500MC image analysis. We found that the TGF-${\beta}1$ PU value was nearly two-fold higher in NSCLC than in normal lung tissues (p=0.000), being associated with TNM stages (p=0.000) and lymph node metastases (p=0.000), but not to patient age, gender, smoking history, tumor differentiation, histological subtype and tumor location (P>0.05). Univariate analysis indicated that patients with high TGF-${\beta}1$ protein expression and lymph node metastases demonstrated a poor prognosis (both p=0.000,). Multivariate analysis showed that TGF-${\beta}1$ protein expression (RR = 2.565, p=0.002) and lymph node metastases (RR=1.874, p=0.030) were also independent prognostic factors. Thus, TGF-${\beta}1$ protein expression may be correlated to oncogenesis and serve as an independent prognostic biomarker for NSCLC.
Over-expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) has been identified as a common feature associated with clinical outcome in many types of cancer, including squamous cell carcinoma of the oesophagus (SCCO). However, the clinical importance of EGFR over-expression in SCCO remains unsettled as conflicting results exist. Therefore we carried out the present meta-analysis of published studies for clarification. A total of 13 studies including 1, 150 patients were enrolled. EGFR over-expression was positive in 722 of these cases. With EGFR over-expression, patients had higher depth of invasion, vascular invasion, and poor prognosis. However, expression had no relation with degree of differentiation, histological grade, lymph node metastasis, clinical stage or lymphatic invasion. EGFR over-expression is probably a valuable predictor for the T stage, vascular invasion and OS, and it could be used as a poor prognosis indicator for the esophageal SCC patients. Targeting therapy to EFGR should be considered to the combined treatment in SCCO.
Objectives: The hepatocyte growth factor(HGF)/c-Met pathway may play various roles in the carcinogenesis of various organs. Although HGF/c-Met signalling pathway has been shown to demonstrate various cellular responses including mitogenic, proliferative, morphogenic and angiogenic activities, the study on their expression related to clinicopathological parameters in thyroid tumor is relatively rare. So we want to find out the clinical significance of the c-Met in thyroid tumor. Materials and Methods: We assess the mRNA and protein expression of the c-Met genes by means of RT-PCR method and the immunohistochemical stain in 100 cases of thyroid tumors(50 papillary carcinomas, 10 follicular carcinomas, 20 follicular adenomas, 20 nodular hyperplasia). Results: By RT-PCR, c-Met mRNA was detected in 43(86%) in papillary carcinoma, 4(40%) in follicular carcinoma, 4(20%) in follicular adenoma and 2(10%) in nodular hyperplasia cases. By immunohistochemistry, c-Met protein expression was detected in 44(88%), 2(20%), 3(15%) and 1(5%). Expression of the c-Met mRNA and protein expression was significantly highly recognized in papillary carcinoma. The c-Met protein overexpression was significantly correlated with the grade of the differentiation. Conclusion: These results suggest that c-Met expression may be associated with thyroid papillary cancer progression. The differential expression of c-Met protein and mRNA suggests that these molecules may be a reliable diagnostic marker in thyroid papillary cancer.
두개봉합부의 조기융합으로 일컬어지는 craniosynostosis는 두개봉합부에서의 골아세포의 조기분화 및 석회화의 결과로 나타나는 선천성 발육이상이다. 최근 유전학적 연구에 의하면 homeobox gene인 Msx2의 변이에 의해 Boston-type craniosynostosis가 야기되며, 또한 Dlx5 homozygote mutant mouse의 표현형에서 두개골의 골화지연을 포함한 다양한 두개안면부위의 이상을 발견하였다는 보고가 있었다. 게다가 Msx2와 Dlx5 homeodomain protein의 상호작용에 의해 성숙골아세포의 표지자인 osteocalcin의 전사를 조절할 수 있다는 사실이 알려져 있다. 이러한 일련의 결과들은 Msx2 Dlx5 및 osteocalcin 유전자들이 두개골의 골화과정과 두개봉합부의 형태발생에 중요한 역할을 담당하고 있음을 제시해주고 있다. 두개골의 성장과 두개봉합부의 형태발생시 이러한 유전자들의 기능을 알아보기위해 mouse의 태생기 (E15-E18) 동안 osteocalcin, Msx2, 및 Dlx5 유전자들의 발현양상을 조사하였다. Osteocalcin은 E15부터 두정골의 골막에서 관찰되었으며, 발생시기가 후기일수록 강한 발현양상을 나타내었다. Msx2는 시상봉합부의 미분화간엽조직과 osteogenic front에서 강하게 발현되었으며 경막과 hair follicle에서도 관찰되었다. Dlx5는 osteogenic front를 포함한 두정골의 골막에서 강하게 발현되었으나 시상봉합부의 미분화간엽조직 에서는 발현되지 않아, Msx2와는 발현양상의 차이를 나타내었다. 두개골과 두개봉합부의 발육과정에서의 Msx2와 Dlx5의 기능을 좀더 심도깊게 분석하기위해, 여러 가지 signaling molecule들의 protein을 사용하여 in vitro 실험을 시행하였다. BMP-2, -4 protein의 overexpression은 bead 주위로 Msx2 유전자의 발현을 유도하였으나, 다른 $TGF{\beta}$ superfamily인 $TGF{\beta}1$, GDF-6, -7 bead들 주위로는 Msx2를 관찰할 수 없었다. 또한 FGF, Shh protein 역시 bead주위로 Msx2의 발현을 유도하지않았다. 흥미롭게도 BMP-2, -4 protein의 overexpression은 bead 주위로 Dlx5 유전자의 발현을 유도하였으나, 다른 $TGF{\beta}$ superfamily, FGF, Shh bead주위로는 Dlx5를 관찰할 수 없어, Msx2와 동일한 결과를 나타내었다 이 결과들을 종합해볼 때, Msx2와 Dlx5 유전자는 두개골과 두개봉합부의 성장발육과정에 중요한 역할을 담당하고 있으며, BMP signaling은 이 두 전사조절인자들을 조절하므로써 두개골의 골화과정과 두개봉합부의 형태발생 및 유지에 관여하고 있음을 제시해주고 있다. 특히 BMP signaling에 specific downstream gene인 Msx2 및 Dlx5의 발현양상의 차이는 골아세포의 분화시 이들 유전자가 각각의 독특한 기능을 가지고 있음을 시사해주고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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