In the present study, we analyzed the defensin protein deduced from Korean radish (Raphanus sativus L.) seeds.To express the genes in E. coli, we constructed a recombinant expression vector with a defensin gene, named rKRs-AFP gene isolated from Korean radish seeds. Over expressed rKRs-AFP proteins was separated by SDS-PAGE to determine the purity, and protein concentration was determined by the Bradford method. Antifungal activity was assessed by disk assay method against the tested fungi. As a result, when 500 mL of cell culture were disrupted by sonicator, 32.5 mg total proteins were obtained. The purified protein showed a single band on SDS-PAGE with estimated molecular weight about 6 KDa, consistent with the molecular mass calculated from the deduced amino acid sequence. The purified rKRs-AFP protein showed remarkable antifungal activities against several fungi including Aspergillus niger, Botrytis cinerea causing the gray mold disease, and Candida albicans. In field tests using the purified rKRs-AFP protein, the protein showed the reducing activity of disease spot and the mitigating effect of spreading of disease like agrichemicals. The immuno-assay of rKRs-AFP protein showed that the purified protein entirely accumulated at B. cinerea cytoplasm through the hyphal septa shown by fluorescence imaging. There was no fluorescence inside the cell, when the hypha was incubated without the protein. These all results indicate that the recombinant rKRs-AFP proteins can be utilized as a potential antifungal drug to control harmful plant fungal pathogens.
Four hundred and sixty six isolates of B. cinerea were obtained from infected leaves, stems and fruits of paprika grown in greenhouses or plastic film houses in Gangwon province, Korea, between August and November in 2006 and 2007. These isolates were classified into five representative phenotypes of resistant (R) and sensitive (S) reactions as SSR, SRR, RSS, RRS and RSR according to the responses of isolates against benzimidazole, dicarboximide and N-phenyl-carbamate fungicide in order. The percentage of five phenotypes were 51.3, 2.4, 35.6, 8.1 and 2.6%, respectively. The SSR phenotype (51.3%) was the most common. Among the nineteen fungicide products evaluated to compare their efficacy against gray mold pathogen on the paprika fruit inoculated with fungal mycelia, the mixture of diethofencarb and carbendazim was the most effective followed by iprodione, boscalid, the mixture of iprodione and thiophanate-methyl, fludioxonil, polyoxin-B, fluazinam, the mixture of tebuconazole and tolyfluanid and procymidone; while in the assay methods inoculated with fungal spores, the mixture of tebuconazole and tolyfluanid was the most effective in controlling gray mold followed by boscalid, fludioxonil, the mixture of diethofencarb and carbendazim and the mixture of pyrimethanil and chlorothalonil.
Jeon, Chang-Wook;Kim, Da-Ran;Gang, Geun Hye;Kim, Byung-Bu;Kim, Nam Ho;Nam, Seong-Yeol;Kwak, Youn-Sig
Mycobiology
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v.48
no.5
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pp.423-426
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2020
Cypripedium japonicum is known to be the indigenous plant to Korea, Japan, and China. However, C. japonicum represents the most critically endangered plant species in South Korea. The plant is esthetically pleasing due to its flower, which is larger than any other orchidaceous species. Disease symptoms relating to gray mold were observed on C. japonicum in May 2019. The suspected pathogen was successfully isolated from the symptomatic leaf tissue and conducted a pure culture of the fungi. The conidia formed consisted of a colorless or light brown single cell, which was either egg or oval-shaped with a size of 7.1 to 13.4 × 5.2 to 8.6 ㎛. Molecular phylogenetic relationship analysis was also confirmed that the pathogen concerned belonging to the family of Botrytis cinerea. Therefore, the findings confirmed that the pathogen isolated from C. japonicum was consistent with the unique properties of B. cinerea.
Botrytis cinerea infects stems and leaves of greenhouse tomatoes and can cause serious economic losses. This study was conducted to develop environment-friendly control method against tomato gray mold. Antagonistic microorganisms (bacteria) were screened for control activity against Botrytis cinerea, both in vitro and in vivo, using stem sections. One hundred bacterial strains were isolated from the rhizospheric soil of various plants including tomato. These strains were screened for growth inhibition of Botrytis cinerea on agar plate by the dual culture and thirty strains showing strongly inhibitory effect against the pathogen were selected first. Among thirty strains, JB 5-12, JB 22-2, JB 22-3, U 4-8 and U46-6 reduced significantly disease incidence, when applied simultaneously with the pathogen. These results suggested that five antagonistic bacteria strains selected have the potential to control tomato gray mold in organic farming.
The green peach aphid (Myzus persicae), a plant pest, and gray mold disease, caused by Botrytis cinerea, affect vegetables and fruit crops all over the world. To control this aphid and mold, farmers typically rely on the use of chemical insecticides or fungicides. However, intensive use of these chemicals over many years has led to the development of resistance. To overcome this problem, there is a need to develop alternative control methods to suppress populations of this plant pest and pathogen. Recently, potential roles have been demonstrated for entomopathogenic fungi in endophytism, phytopathogen antagonism, plant growth promotion, and rhizosphere colonization. Here, the antifungal activities of selected fungi with high virulence against green peach aphids were tested to explore their potential for the dual control of B. cinerea and M. persicae. Antifungal activities against B. cinerea were evaluated by dual culture assays using both aerial conidia and cultural filtrates of entomopathogenic fungi. Two fungal isolates, Beauveria bassiana SD15 and Metarhizium anisopliae SD3, were identified as having both virulence against aphids and antifungal activity. The virulence of these isolates against aphids was further tested using cultural filtrates, blastospores, and aerial conidia. The most virulence was observed in the simultaneous treatment with blastospores and cultural filtrate. These results suggest that the two fungal isolates selected in this study could be used effectively for the dual control of green peach aphids and gray mold for crop protection.
A severe pink mold rot on matured melon fruits occurred under a glass tunnel cultivation in Chinju at Kyeongasngnam-do Agricultural Research and Extention Services on May of 1998. Basal portion of the fruits toward blossom end was preferably infected and colonized by the fungus. The causal fungus consistently isolated from the lesions was identified as Trichothecium roseum based on following mycological characteristics. Conidia were hyaline or brightly colored, 2-celled, ovoid or elipsoid, characteristically held together zi-zag chains. Conidiophore was long, slender, simple, septate, bearing conidia-meristem arthrospores-apically, singly when young and successively by slight growth of conidiphore apex. Optimum temperature for mycelial growth and conidial germination was recorded at 20~$25^{\circ}C$. However, over 48% of the fungal conidia were germinated at 15$^{\circ}C$ and mycelial growth was only slightly slower than $25^{\circ}C$. The temperature profiles and high humidity available during the cultivation were considered favorable for the pathogen as showing 22% infection rate on matured melon fruits cv. Saros. This is the first report of pink mold rot of melon caused by T. roseum in Korea.
CHOI, WON-CHANG;SEOK-YEON HWANG;TAE-KYU PARK;SI-KWAN KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.2
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pp.204-208
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2002
A Streptomyces sp. isolated from a soil sample collected in Taejeon, Korea has previously been found to produce two new polyene antibiotics. The two new antibiotics were named "16-methyloxazolomycin (antibacterial)" and "tetrin C (antifungal)", and their chemical structures are presented elsewhere [10, 11]. In the current study, chemotaxonomy, numerical taxonomy, and ISP methods were all employed for the taxonomic study. The spore chains were spirales and the spore surface was smooth. The spore mass was a gray series and no melanin pigment was produced. On the basis of the morphological and physiological properties, the microorganism was identified to be Streptomyces erumpens, belonging to the gray series of category IV, as defined by Bergey′s Manual. Tetrin C at the concentration of 20 ${\mu}g$/ml demonstrated a potent in vivo (pot test) preventive effect against rice blast, rice sheath blight, cucumber gray mold, wheat powdery mildew, and barley leaf rust.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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