다래순 묵나물을 찬물에 16시간 불리고, 30분 삶은 후 1시간 찬물에 불리는 재수화 과정을 거친 후 다래순의 라디칼 소거 활성과 알파글루코시데이스 억제활성은 유의하게 감소하였으며 재수화된 다래순을 $180^{\circ}C$에서 10분 또는 20분 동안 가열 조리한 경우 들기름 첨가와 관계없이 라디칼 소거활성은 증가하였으나 알파글루코시데이스 억제 활성은 들기름을 첨가하고 가열 조리한 경우에만 증가하였다. 다래순의 라디칼 소거 활성과 알파글루코시데이스 억제 활성 변화는 색소보다는 산화방지제, 플라보노이드 또는 토코페롤보다는 폴리페놀 화합물 함량 변화와 더 유사한 경향을 보였다. 따라서 본 결과는 다래순 묵나물의 재수화 또는 가열 조리 시 산화 방지, 항당뇨 등 건강기능성 개선을 위해 폴리페놀 화합물의 손실을 줄이는 것이 바람직함을 시사하였다.
Mazzei, R.;Giomo, L.;Spadafora, A.;Mazzuca, S.;Drioli, E.
Korean Membrane Journal
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제8권1호
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pp.58-66
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2006
The ${\beta}-glucosidase$ from olive fruit is of particular interest compared to the ones from other sources because it has shown to have high specifity to convert the oleuropein into dialdehydes, which have antibacterial activity and are of high interest for their application in the food and pharmaceutical fields. The enzyme is not yet commercially available and advanced clean and safe technologies for its purification able to maintain the functional stability are foreseen. The purification of this protein from fruit extracts has been already tempted by electrophoresis but either enzyme deactivation or high background with unclear profiles occurred. In this work, fruit extracts obtained from the ripening stage that showed the highest enzyme activity have been processed by diafiltration and ultrafiltration. Asymmetric membranes made of polyamide or polysulphone having 50 and 30 kDa molecular weight cut-off, respectively, were tested for the diafiltration process. Ultrafiltration membranes made of polyethersulfone with 4 kDa molecular weight cut-off were used to concentrate the dia-filtered permeate solutions. The efficiency of the separation processes was evaluated byenzyme activity tests using the hydrolysis of p-D-nitrophenyl-${\beta}$-D-glucopyranoside (pNPGlc) as reaction model. Qualitative and quantitative electrophoresis were applied to analyze the composition of protein solution before and after the membrane separation; in addition dot blot and western blot analyses were applied to verify the presence of ${\beta}-glucosidase$ in the processed fractions. The overall results showed that the ${\beta}-glucosidase$ functional stability was preserved during the membrane operations and the removal of 20 kDa proteins allowed to increase the specific activity of the enzyme of about 52% compared to the one present in the initial fruit extract.
As a rapid and quick bioactive compound evaluation technique, we utilized an automatic system of high throughput screening (HTS) to investigate ${\alpha}$-glucosidase inhibitory efficacy of seaweeds, collected from Jeju Island in Korea. In this study, different extracts with methanol at $20^{\circ}C$ and $70^{\circ}C$ from 23 species of brown seaweeds and 22 species of red seaweeds and 9 species of green seaweeds were subjected to HTS. Of the brown seaweeds tested, Myelophycus simplex (20B3), Ishige sinicola (20B5, 70B5), Colpomenia sinuosa, (20B14, 70B14), Hizikia fusiforme (20B21), Ishige okamurai (70B22) and Ecklonia cava (70B23) showed significantly high ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity with 96.52%, 98.34%, 98.37%, 80.49%, 96.16%, 76.32%, 98.32% and 98.12%. Schizymenia dubyi (20R15), Gelidium amansii (20R16) and Polysiphonia japonica (70R22) amomng the red seaweeds showed remarkable ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity more than 95%. On the other hand, the green seaweeds showed poor ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities (less the10%) at 1 mg/ml.
In this study, the biological activities of Glycyrrhiza uralensis were investigated, including antioxidative, fibrinolytic, thrombin inhibitory, and a-glucosidase inhibitory activity. The hot water extract of Glycyrrhiza uralensis was fractionated into hexane, $CHCl_3$, ethyl acetate, butanol, and water fractions, and each of these fractions were assayed individually. The water fraction showed the highest extraction yield of 19.45% (w/w). Using the DPPH method, the free radical scavenging activity was to be the strongest in the $CHCl_3$ fraction at 89.3%. Using the fibrin plate method, only the butanol fraction showed a substantial plasmin activity of 0.62 units/ml. In thrombin inhibitory activity tests, a 100-fold dilution of the ethyl acetate fraction showed the strongest activity of 46.9%. In the a-glucosidase inhibitory activity assay, a 100-fold dilution of the $CHCl_3$ fraction showed the strongest activity of 80.6%. In conclusion, the combined results of this study demonstrate that the extracts of Glycyrrhiza uralensis can be used as a material for the development of biofunctional foods for diabetics.
콩나물 메탄을 추출물의 yeast $\alpha$-glucosidase 저해활성을 in vitro에서 측정한 결과 5 mg/mL 농도에서 24.5%로 나타났다. 콩나물 용매분획 중 ethyl acetate층에서 $\alpha$-glucosidase 저해활성이 36.3%로 가장 높게 나타났다. STZ로 당뇨를 유발한 흰쥐에 있어서 콩나물 추출물의 탄수화물 소화효소 저해활성을 측정하였다. 공복상태의 동물에게 전분(1 g/kg)과 함께 콩나물 메탄올 추출물 (500 mg/kg)을 경구 투여한 경우, 전분(1 g/kg)만 투여 경우에 비해 투여 후 60, 90, 120, 180분에 혈당 증가가 유의적으로 낮았으며 (p<0.05), 식후 혈당 증가곡선의 면적(AUC)도 유의적으로 작게 나타났다(p<0.05). 이상의 결과에서 콩나물 메탄올 추출물은 $\alpha$-glucosidase 저해 활성에 의해 식후 혈당 조절 효과를 나타내어, 콩나물의 섭취는 당뇨병 치료 및 예방에 도움을 줄 수 있는 것으로 사료된다.
본 연구의 목적은 기존의 단일 균주보다 두 종의 서로 다른 균주를 복합시켰을 때 두 균주간의 상호 보완적인 면을 이용하여 효소생산을 극대화하기 위함이며, 다음과 같은 결론을 얻었다. 실험에서 사용된 T viride와 FB01는 최적 PH와 온도가 비슷하여 혼합배양이 가능하였으며, 이들의 복합균주를 개발하는데 성공하였다. 즉 두 균주는 회분배양 하였을 때, 서로의성장속도에 차이가 있었기 때문에 두 균주의 생장균형을 유지하기 위해 접종시기를 조절할 필요가 있었다. 접종시기를 변화시킴으로서 두 균주간의 상호작용으로 인해 단일 균주일때보다 CMCase, $\beta$-glucosidase 및 avicelase의 활성이 우수했으며 또한 계대배양을 통한 두 균주의 활성유지에 관한 실험에서는 pH 조절을 통해 $\beta$-glucosidase 활성이 최고 3.2배까지증가함을 알 수 있었다. 따라서 배양액내에서 초기 pH의 영향은 생산된 cellulase complex의 다양한 구성요소의 상대적인 농도를 결정하는 실질적인 요인으로 판명된다. pH 4.5에서의 enzyme activity는 12.5 U/mL CMCase, 2.46 U/mL If-glucosidase, 0.93 U/mL avicelase였으며 개발당시의 복합균주활성인, 2.04 U/ml CMCase, 0.78U/ml $\beta$-glucosidase, 0.2 U/mL avicelase과 비교할 때 각각 6, 3.2, 4.7배의 높은 활성을 보였다. 복합균주의 탄소원으로 볏짚을 이용했을 때 복합균주에 의한 효소생산이 단일 균주인 T. virile나 FB01보다 훨씬 높게 나타났으며, 이때의 볏짚의 최적 농도는 5%(w/v)였다. 이러한 배양조건에서 복합균주를 장기적으로 계대배양하면서 효소의 생산성 향상과 복합균주의 안정성을 관찰할 필요가 있다고 사료된다.
A cellobiose-utilizing recombinant yeast having $\beta$-glucosidase activity was developed for ethanol production from a mixture of glucose and cellobiose. Using $\delta$-sequences of Tyl transposon of yeast as target sites for homologous recombination, a heterologous gene of $\beta$-glucosidase was integrated into the chromosome of Saccharomyces cerevisiae. The $\delta$-integrated recombinant yeast, Saccharomyces cerevisiae L2612 (Pb-BGL), showed perfect mitotic stability even in nonselective media and showed ca. 1.5 fold higher $\beta$-glucosidase activity than the recombinant yeast harboring the $2\mu$-based plasmid vector system. A mathematical model was developed to describe the $\beta$-glucosidase formation and ethanol production from the Saccharomyces cerevisiae L2612 ($p\delta-BGL$). The model newly described that the heterologous $\beta$-glucosidase production mediated by ADH1 promoter is regulated by glucose and repressed by ethanol.
An extracellular ${\beta}$-glucosidase from Aspergillus niger Au0847 was purified to homogeneity by precipitation with ammonium sulfate, anion exchange, and gel filtration. The purified protein was composed of two subunits with molecular masses of 110 and 120 kDa. Au0847 ${\beta}$-glucosidase exhibited relatively high thermostability and pH stability, and its highest activity was obtained at $65^{\circ}C$ and pH 4.6, respectively. As a potential metalloprotein, its enzymatic activity was potently stimulated by manganese ion and DTT. The ${\beta}$-glucosidase displayed avid affinity and high catalytic efficiency for geniposide. Au0847 ${\beta}$-glucosidase has potential value as an industrial enzyme for the hydrolysis of geniposide to genipin.
제주 동백나무 겨우살이 추출물의 항산화 활성을 DPPH 라디컬 소거능, 철이온 킬레이팅과 환원력 시험을 통해 조사한 결과, 메탄올과 에탄올 추출물이 열수 추출물보다 뛰어난 항산화 효능을 보였다. ${\alpha}$-Glucosidase와 pancreatic lipase 저해능 또한 메탄올과 에탄올 추출물이 우수한 활성을 보였다. 따라서, 제주 동백 나무 겨우살이의 메탄올 및 에탄올 추출물을 건강기능 의약식품 소재로 개발하기 위한 추가 연구가 진행되어야 할 것이다.
본 연구는 당뇨처방을 근거로 구성된 생약재 복합물의 항당뇨 효능을 조사하기 위하여 복합물의 인슐린성 물질을 탐색하고 ${\alpha}$-amylase 및 ${\alpha}$-glucosidase 저해활성을 평가하였다. 3T3-L1 세포에 복합 생약재 추출물을 $10{\mu}g/mL$의 농도로 처리하였을 때 지방세포로의 분화능은 151.7%로 인슐린의 작용을 향상시키는 것으로 확인되었다. 혈당저하제로서 생약재 복합 추출물의 ${\alpha}$-amylase에 대한 저해활성은 생약재 복합 추출물 10.0, 1.0 및 0.1 mg/mL의 농도에서 각각 38.4, 31.5 및 16.6%이었으며, ${\alpha}$-glucosidase에 대한 생약재 복합 추출물의 저해활성은 같은 농도에서 각각 81.3, 35.8 및 26.7%였다. 열수 추출물과 80% ethanol 추출물의 각종 용매 분획물에 대한 ${\alpha}$-glucosidase 저해활성은 다양한 용매 분획물 가운데 ethyl acetate층에서 66.9%와 55.1%로 가장 높은 활성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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