본 연구에서 는 P japonica와 c. mifitaris에서 혈당강하 기능성 성분을 분리하고 간세포내 glucokinase활성을 측정하여 항당뇨 작용 기전을 규명 하고자 하였다. 동충하초에서 분리 된 fraction A의 간세포내 glucokinase 활성은 대조군과 비교하여 C. militaris는 371.4%, P. japonica는 379%로 증가하였다. Fraction B의 활성은 C. miliraris 314.2%, P. japonim는 147.4% 증가하여 C. milifaris에서 추출된 fraction B는 P. japonin와 비교했을 때 2배 이상의 glucokinase의 활성 증가를 나타냈다. 이상의 결과를 근거로 C. militaris의 혈당 강하 작용을 in vivo에서 검증한 결과 C. militaris 첨가군의 glucokinase활성은 대조군에 비해 1300% 이상의 활성 증가를 나타냈다. 결론적으로 C. militaris추출물은 간세포 내 glucokinase활성을 현저히 증가시킴으로써 혈중 포도당의 급격한 상승을 억제할 수 있을 것으로 판단된다.
Glucokinase와 hexokinase는 간과 췌장에서 인슐린에 의해 혈당이용을 증대시키며 혈당농도를 감지하여 인슐린 분비를 조절하는 효소로서 인슐린비의존성당뇨병(NIDDM)의 병인과 밀접한 관계가 있는 효소이다. Cytokine의 일종인 interleukin-$1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$)는 췌장 도세포에서의 인슐린 분비와 ${\beta}-cell$에 대한 세포 독성을 효과적으로 조절하여 장기간 노출시키면 인슐린 분비와 생합성을 저해하며 ${\beta}-cell$을 파괴하여 ${\beta}-cell$의 기능적, 구조적 손상을 초래하여 IDDM을 유발한다. 본 연구에서는 당뇨병치료의 전통한방약제로서 사용되고 있는 오배자(五倍子)추출물의 효과를 해명하기 위하여 $IL-1{\beta}$유발 실험적 당뇨마우스의 glucokinase와 hexokinase의 활성을 검토한 결과, $IL-1{\beta}$주사에 의해 체중과 공복시의 glucose 및 insulin 분비가 증가되었으나, 오배자(五倍子)투여로 공복시의 insulin분비가 감소하였으며 체중과 공복시의 혈당은 유의성은 없었으나 대조군에 비하여 감소하였다. 그러나, 혈당수치가 정상군에 비하여 현저하게 증가되었으나 오배자(五倍子)투여로 현저히 감소하였으며 Insulin치의 상승과 분비지연도 오배자(五倍子)투여군에서는 정상군과 유사한 경향을 보였다. 한편, 혈중 glucokinase와 hexokinase의 활성은 $IL-1{\beta}$주사에 의해 현저히 감소되었으나, 오배자(五倍子) 투여로 유의성 있게 상승되었다. 이상의 결과로, 오배자(五倍子)는 $IL-1{\beta}$로 유발된 실험적 당뇨병에서 포도당인산화 효소인 glucokinase와 hexokinase의 활성을 증가시키는 것으로 나타났다.
다시마의 열수출물이 당뇨병의 치료에 효과가 있는지를 알아보기 위하여 alloxan으로 처리하여 실험적으로 당뇨병을 유발한 후 glucose의 초기 인산화에 관여하는 glu-cokinase와 hexokinase의 활성을 살펴본 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Alloxan 주사에 의해 체중과 공복시의 glucose 및 insulin 분비가 증가되었으나, 다시마 투여에 의해 공복시의 insulin 분비가 유의성있게 감소하였으며 체중과 공복시의 glucose의 유의성은 없었으나 대조군에 비하여 감소하였다. 2. Alloxan 주사에 의해 혈청중 glucosecl가 정상군에 비하여 현저하게 증가되었으나 다시마 투여에 의해 현저히 감소되었다. Insulin 치의 상승과 분비 지연도 다시마 투여군에서는 정상군과 유사한 경향을 보였다. 3. Glucokinase와 hexokinase의 활성은 alloxan 주사에 의해 현저히 감소되었으나, 다시마 투여에 의해 유의성있게 상승되었다. 이상의 결과로 다시마는 alloxan으로 유발된 당뇨병에서 glcuose 인산화 glucokinase와 hexokinase의 활성을 증가시키는 것으로 나타나 당뇨병의 치료에 효과가 있는 것으로 여겨진다.
바이러스성 출혈성 패혈증 바이러스(VHSV)는 넙치를 포함한 어류 양식의 막대한 피해를 일으키는 바이러스 병원체이며, VHSV가 생성하는 6개의 바이러스 단백질들 중에서 NV 단백질이 병원성에 관여하는 것으로 알려져 있다. VHSV-감염 넙치를 이용한 전사체 마이크로 어레이의 선행 분석 결과에 의하면 VHSV 감염이 해당과정 효소들의 mRNA 발현을 억제함으로써 넙치 세포에서 ATP 생성을 감소시켰음을 알 수 있었다. 이들 결과를 토대로, 본 연구에서는 VHSV NV 단백질이 해당과정 효소인 glucokinase의 발현에 미치는 영향을 검토하였다. 본 연구의 결과에 의하면, NV 단백질은 넙치 세포에서 glucokinase의 mRNA 발현을 감소시켰으며, 새롭게 동정한 glucokinase의 유전자 프로모터의 활성 실험결과, NV 단백질이 glucokinase의 프로모터 활성을 저해함을 알 수 있었다. 이와 같은 작용 결과들로 인하여 VHSV NV 단백질의 발현이 세포 내로의 포도당 흡수 또한 감소시켰다. 이러한 결과들은 VHSV NV 단백질이 유전자 발현의 전사 수준에서 음성적으로 해당과정의 효소 발현을 조절함을 의미하며, 결국 세포 내 에너지의 결핍으로 넙치의 폐사로 이어질 가능성을 보여주는 것이다.
We investigated the in vivo effect of an aqueous extract (referred to as EF) from Eriobotryae folium on glucokinase and hexokinase activities of diabetes mellitus induced by $interleukin-1{\beta}\;(IL-1{\beta})$. After 1 week of $IL-1{\beta}$ injection, the levels of serum glucose concentration and insulin secretion were dramatically increased. However, the insulin secretion was decreased with administration of EF. The level of glucose concentration was decreased by EF administration. Furthermore, it was observed that EF was effective in recovering the levels of insulin secretion. Enzyme activities of the glucokinase and hexokinase, which are key enzymes of glucose phosphorylastion, were decreased by $IL-1{\beta}$. EF administration to the mice allowed proportional increasing by stimulation of induction of enzyme activities as high as normal group. These results suggested that EF is highly effective in treatment of diabetes mellitus induce by $IL-1{\beta}$.
Alloxan은 glucokinase효소가 기질인 glucose결합부위인 -SH기를 경쟁적으로 저해함으로서 glucose의 초기 인산화를 억제하여 당뇨병을 유도시키는 화학물질이다. 본 연구에서는 이제까지의 조직학적이고 혈청학적인 연구에서 한 단계 나아가 효소학적인 측면에서 당대사와 인슐린 분비 조절인자로 알려진 glucokinase와 혈중 당을 조직내로 흡수하여 인산화시키는 효소인 hexokinase에 대한 다시마 열수추출물의 효과를 분석 검토하였다. (중략)
Effect of ginsenoside mixture, ginsenoside $Rb_1$,$Rb_2$,$Rg_1$ and the fat soluble fraction of the roots of Panax ginseng C.A. Meyer on the activity of glucokinase (GK) in vitro has been observed and found that GK activity was increased about 15c1c at the concentration of ginsenoside mixture and/or the fat soluble fraction being $10^{-7}$,$10^{-5}$%. It was also observed that glucose uptake by rat liver was increased in the presence of either ginsenoside mixture or the fat soluble fraction by perfusion technique. Ginsenoside mixture stimulated various enzymes related to glucose metabolism, however, both ginsenoside mixture and the fat soluble fraction did not stimulate GK activity as expected. Primary culture of liver cells showed that the ginsenoside mixture and the fat soluble fraction increased GK activity significantly and they stimulated the GK activity synergistically in the co-presence of insulin.
This study was undertaken to determine the effect of dietary fat to carbohydrate ratio on plasma glucose. free fatty acid level and hepatic glucokinase activity in normal or insulin treated diabetic rats. Sprague-Dawley male rats were fed with 3 different but isocaloric diets for 5 weeks. Diet 1 made to have low fat(4% corn oil and 65.8% corn starch wt/wt) : diet 2 medium fat (12% : 47.8%) : diet 3 high fat (20% : 29.8%) In the normal rats an apparent increase of GK activity was observed from the animal fed low fat diet when compared with other groups. GK activities were decreased in all the alloxan-diabetic rats than the normal rats. When insulin was injected the GK activities in all the livers of alloxan-diabetic rats restored to normal level and GK activity was highest in low fat group. In the entire group significant relationships were seen between the plasma glucose and GK activities(r=-0.6, p<0.001) FFA levels and GK activities(r=-0.63 p<0.001) Both in normal and insulin treated diabetic rats significantly depressed level of hepatic GK activity was observed in the livers of animals fed high fat diet for 5 weeks and depressed level of GK activity may be related to insulin resistance.
In silico analysis of genome of the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 identified two genes, slr0329 and sll0593, that might participate in glucose (Glc) phosphorylation (www.kazusa.or.jp/cyano). In order to determine the functions of these two genes, we generated deletion mutants, and analyzed their phenotypes and enzymatic activities. In the presence of 10 mM Glc, wild-type (WT) and slr0329 defective strain (M1) grew fast with increased respiratory activity and NADPH production, whereas the sll0593 deletion mutant (M2) failed to show any of the Glc responses. WT and M1 were not significantly different in their glucokinase activity, but M2 had 90% less activity. Therefore, we propose that Sll0593 plays a major role in the phosphorylation of glucose in Synechocystis cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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