Ginsenosides of roots in Panax ginseng were analyzed by metabolic-targeting HPLC using the partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) and compared depending on sowing methods between direct seeding and transplanting method. Score plots derived from PLS-DA could identify the sowing method between the direct seeding and transplanting method in P. ginseng roots. The ginsenoside compounds were assigned as Rg1, Re, Rf, Rg2, Rb1, Rc, Rb2, Rb3, and Rd. Contents of Re, Rf, Rg2, Rb1, Rc, Rb3, and Rd of main roots produced from the transplanting method were relatively higher than those of samples produced from direct seeding method. Also, contents of Rg1, Re, Rf, Rg2, Rb1, Rc, Rb2, Rb3, and Rd of lateral roots from the transplanted samples were relatively higher than those of samples produced from direct seeding method. Therefore, HPLC with PLS-DA analysis can be a straightforward tool for identification of ginsenosides in main or lateral roots of P. ginseng obtained from two different seeding methods between direct and transplanting methods.
Panax ginseng C.A. Meyer(Araliaceae) has been traditionally used as an expensive and precious medicine in oriental countries for more than 5, 000 years. Ginseng saponin isolated from the root of Panax ginseng have been regarded as the main effective components responsible for the pharmacological and biological activities. Such as antiaging effects. antidiabetic effects anticancer effects. Protection against physical and chemical stress. Analgesic and antipyretic effects. Effects on the central nervous system, tranquilizing action and others. Thirty kinds of ginsenosides have been so far isolated from ginseng saponin and their chemical structures have been elucidated since 1960's. Among which protopanaxadiol type is 19 kinds. protopanaxatriol type. 10 kinds and oleanane type, one. Since ginsenosides are generally labile under acidic conditions ordinary acid hydrolysis is always accompanied by many side reactions, such as epimerization. hydroxylation and cyclization of side chain of the sapogenins Especially. it is well known that C-20 glycosyl linkage of ginsenoside was hydrolysed on heating with acetic acid to give an equilibrated mixture of 20(S) and 20(R) epimers. And also, the chemical transformations of the secondary metabolites have appeared during the steaming process to prepare red ginseng. Indicating demalonylation of malonyl ginsenosides, elimination of glycosyl residue at C-20 and isomerization of hydroxyl configuration at C-20. But these studies have not provided a comprehensive picture in explaning how these ginsenosides showed val'iotas pharmacological activities of ginseng. Though some of them have been involved in the mechanism of pharmacological actions. Recently, non-saponin components have received a great deal of attention for their antioxidant, anticancer antidiabetic, immunomodulating. anticomplementary activities and so on. To meet the demand for such wide applications, studies on the non-saponin components play an important role in providing a good evidence of pharmacological and biol ogical activities. Among the non-saponin constituents of Korean ginseng, polyacetylenes, phenols. Sesquiterpenes, alkaloids. polysaccharides oligosaccharides, oligopeptides and aminoglycosides together with ginsenosides of terrestrial part are mainly described.
Yang, Seung-Ok;Lee, Sang Won;Kim, Young Ock;Sohn, Sang-Hyun;Kim, Young Chang;Hyun, Dong Yoon;Hong, Yoon Pyo;Shin, Yu Su
Journal of Ginseng Research
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제37권2호
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pp.248-253
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2013
Leaves from Panax ginseng Meyer (Korean origin and Chinese origin of Korean ginseng) and P. quinquefolius (American ginseng) were harvested in Haenam province, Korea, and were analyzed to investigate patterns in major metabolites using HPLC-based metabolic profiling. Partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) was used to analyze the the HPLC chromatogram data. There was a clear separation between Panax species and/or origins from different countries in the PLS-DA score plots. The ginsenoside compounds of Rg1, Re, Rg2, Rb2, Rb3, and Rd in Korean leaves were higher than in Chinese and American ginseng leaves, and the Rb1 level in P. quinquefolius leaves was higher than in P. ginseng (Korean origin or Chinese origin). HPLC chromatogram data coupled with multivariate statistical analysis can be used to profile the metabolite content and undertake quality control of Panax products.
Kim, Ki-Taek;Kim, Min-Hwan;Park, Ju-Hwan;Lee, Jae-Young;Cho, Hyun-Jong;Yoon, In-Soo;Kim, Dae-Duk
Journal of Ginseng Research
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제42권4호
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pp.512-523
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2018
Background: 20(S)-Protopanaxadiol (20S-PPD) is a fully deglycosylated ginsenoside metabolite and has potent dermal antiaging activity. However, because of its low aqueous solubility and large molecular size, a suitable formulation strategy is required to improve its solubility and skin permeability, thereby enhancing its skin deposition. Thus, we optimized microemulsion (ME)-based hydrogel (MEH) formulations for the topical delivery of 20S-PPD. Methods: MEs and MEHs were formulated and evaluated for their particle size distribution, morphology, drug loading capacity, and stability. Then, the deposition profiles of the selected 20S-PPD-loaded MEH formulation were studied using a hairless mouse skin model and Strat-M membrane as an artificial skin model. Results: A Carbopol-based MEH system of 20S-PPD was successfully prepared with a mean droplet size of 110 nm and narrow size distribution. The formulation was stable for 56 d, and its viscosity was high enough for its topical application. It significantly enhanced the in vitro and in vivo skin deposition of 20S-PPD with no influence on its systemic absorption in hairless mice. Notably, it was found that the Strat-M membrane provided skin deposition data well correlated to those obtained from the in vitro and in vivo mouse skin studies on 20S-PPD (correlation coefficient $r^2=0.929-0.947$). Conclusion: The MEH formulation developed in this study could serve as an effective topical delivery system for poorly soluble ginsenosides and their deglycosylated metabolites, including 20S-PPD.
Hao, Mengzhen;Zhou, Yuhang;Zhou, Jinhui;Zhang, Min;Yan, Kangjiao;Jiang, Sheng;Wang, Wenshui;Peng, Xiaoping;Zhou, San
Journal of Ginseng Research
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제44권5호
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pp.747-755
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2020
Background: Ginsenosides accumulation responses to temperature are critical to quality formation in cold-dependent American ginseng. However, the studies on cold requirement mechanism relevant to ginsenosides have been limited in this species. Methods: Two experiments were carried out: one was a multivariate linear regression analysis between the ginsenosides accumulation and the environmental conditions of American ginseng from different sites of China and the other was a synchronous determination of ginsenosides accumulation, overall DNA methylation, and relative gene expression in different tissues during different developmental stages of American ginseng after experiencing different cold exposure duration treatments. Results: Results showed that the variation of the contents as well as the yields of total and individual ginsenosides Rg1, Re, and Rb1 in the roots were closely associated with environmental temperature conditions which implied that the cold environment plays a decisive role in the ginsenoside accumulation of American ginseng. Further results showed that there is a cyclically reversible dynamism between methylation and demethylation of DNA in the perennial American ginseng in response to temperature seasonality. And sufficient cold exposure duration in winter caused sufficient DNA demethylation in tender leaves in early spring and then accompanied the high expression of flowering gene PqFT in flowering stages and ginsenosides biosynthesis gene PqDDS in green berry stages successively, and finally, maximum ginsenosides accumulation occurred in the roots of American ginseng. Conclusion: We, therefore, hypothesized that cold-induced DNA methylation changes might regulate relative gene expression involving both plant development and plant secondary metabolites in such cold-dependent perennial plant species.
In this study, white ginseng was used as the raw material, which was fermented with Paecilomyces hepiali through solid culture medium, to produce ginsenosides with modified chemical composition. The characteristic chemical markers of the products thus produced were investigated using rapid resolution liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry (RRLC-QTOF-MS). Chemical profiling data were obtained, which were then subjected to multivariate statistical analysis for the systematic comparison of active ingredients in white ginseng and fermented ginseng to understand the beneficial properties of ginsenoside metabolites. In addition, the effects of these components on biological activity were investigated to understand the improvements in the phagocytic function of macrophages in zebrafish. According to the established RRLC-QTOF-MS chemical profiling, the contents in ginsenosides of high molecular weight, especially malonylated protopanaxadiol ginsenosides, were slightly reduced due to the fermentation, which were hydrolyzed into rare and minor ginsenosides. Moreover, the facilitation of macrophage phagocytic function in zebrafish following treatment with different ginseng extracts confirmed that the fermented ginseng is superior to white ginseng. Our results prove that there is a profound change in chemical constituents of ginsenosides during the fermentation process, which has a significant effect on the biological activity of these compounds.
Background: Glycosylation of natural compounds increases the diversity of secondary metabolites. Glycosylation steps are implicated not only in plant growth and development, but also in plant defense responses. Although the activities of uridine-dependent glycosyltransferases (UGTs) have long been recognized, and genes encoding them in several higher plants have been identified, the specific functions of UGTs in planta remain largely unknown. Methods: Spatial and temporal patterns of gene expression were analyzed by quantitative reverse transcription (qRT)-polymerase chain reaction (PCR) and GUS histochemical assay. In planta transformation in heterologous Arabidopsis was generated by floral dipping using Agrobacterium tumefaciens (C58C1). Protein localization was analyzed by confocal microscopy via fluorescent protein tagging. Results: PgUGT72AL1 was highly expressed in the rhizome, upper root, and youngest leaf compared with the other organs. GUS staining of the promoter: GUS fusion revealed high expression in different organs, including axillary leaf branch. Overexpression of PgUGT72AL1 resulted in a fused organ in the axillary leaf branch. Conclusion: PgUGT72AL1, which is phylogenetically close to PgUGT71A27, is involved in the production of ginsenoside compound K. Considering that compound K is not reported in raw ginseng material, further characterization of this gene may shed light on the biological function of ginsenosides in ginseng plant growth and development. The organ fusion phenotype could be caused by the defective growth of cells in the boundary region, commonly regulated by phytohormones such as auxins or brassinosteroids, and requires further analysis.
Background: Cytochrome P450 enzymes catalyze a wide range of reactions in plant metabolism. Besides their physiological functions on primary and secondary metabolites, P450s are also involved in herbicide detoxification via hydroxylation or dealkylation. Ginseng as a perennial plant offers more sustainable solutions to herbicide resistance. Methods: Tissue-specific gene expression and differentially modulated transcripts were monitored by quantitative real-time polymerase chain reaction. As a tool to evaluate the function of PgCYP736A12, the 35S promoter was used to overexpress the gene in Arabidopsis. Protein localization was visualized using confocal microscopy by tagging the fluorescent protein. Tolerance to herbicides was analyzed by growing seeds and seedlings on Murashige and Skoog medium containing chlorotoluron. Results: The expression of PgCYP736A12 was three-fold more in leaves compared with other tissues from two-year-old ginseng plants. Transcript levels were similarly upregulated by treatment with abscisic acid, hydrogen peroxide, and NaCl, the highest being with salicylic acid. Jasmonic acid treatment did not alter the mRNA levels of PgCYP736A12. Transgenic lines displayed slightly reduced plant height and were able to tolerate the herbicide chlorotoluron. Reduced stem elongation might be correlated with increased expression of genes involved in bioconversion of gibberellin to inactive forms. PgCYP736A12 protein localized to the cytoplasm and nucleus. Conclusion: PgCYP736A12 does not respond to the well-known secondary metabolite elicitor jasmonic acid, which suggests that it may not function in ginsenoside biosynthesis. Heterologous overexpression of PgCYP736A12 reveals that this gene is actually involved in herbicide metabolism.
Chen, Lin;Li, Ruimei;Chen, Feiyan;Zhang, Hantao;Zhu, Zhu;Xu, Shuyi;Cheng, Yao;Zhao, Yunan
Journal of Ginseng Research
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제46권5호
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pp.666-674
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2022
Background: Ginsenosides and their metabolites have antidepressant-like effects, but the underlying mechanisms remain unclear. We previously identified 14-3-3 ζ as one of the target proteins of 20 (S)-protopanaxadiol (PPD), a fully deglycosylated ginsenoside metabolite. Methods: Corticosterone (CORT) was administered repeatedly to induce the depression model, and PPD was given concurrently. The tail suspension test (TST) and the forced swimming test (FST) were used for behavioral evaluation. All mice were sacrificed. Golgi-cox staining, GSK 3β activity assay, and Western blot analysis were performed. In vitro, the kinetic binding analysis with the Biolayer Interferometry (BLI) was used to determine the molecular interactions. Results: TST and FST both revealed that PPD reversed CORT-induced behavioral deficits. PPD also ameliorated the CORT-induced expression alterations of hippocampal Ser9 phosphorylated glycogen synthase kinase 3β (p-Ser9 GSK 3β), Ser133 phosphorylated cAMP response element-binding protein (p-Ser133 CREB), and brain-derived neurotrophic factor (BDNF). Moreover, PPD attenuated the CORT-induced increase in GSK 3β activity and decrease in dendritic spine density in the hippocampus. In vitro, 14-3-3 ζ protein specifically bound to p-Ser9 GSK 3β polypeptide. PPD promoted the binding and subsequently decreased GSK 3β activity. Conclusion: These findings demonstrated the antidepressant-like effects of PPD on the CORT-induced mouse depression model and indicated a possible target-based mechanism. The combination of PPD with the 14-3-3 ζ protein may promote the binding of 14-3-3 ζ to p-GSK 3β (Ser9) and enhance the inhibition of Ser9 phosphorylation on GSK 3β kinase activity, thereby activating the plasticity-related CREBeBDNF signaling pathway.
본 연구에서는 사과, 배, 무 등 8종 과채류를 절단하고 열수추출물과 과채류 증숙열수추출물을 제조하고 실험기질로 사용하였다. 실험기질에 홍삼추출물 1%(W/V)와 유산균발효 추출물에 유산균 8종 혼합스타터를 첨가하여 발효한 결과, ginsenosides의 패턴과 함량은 과채류 추출물군과 증숙 처리군에서는 거의 변화가 없었다. 그러나 유산균 발효군에서는 발효과정과 처리에 따라 TLC 패턴이 변하여 Rg3(S) 및 Rg5으로 전환되는 진세노사이드 함량이 증가하였다. 4종의 과채류추출물 모두에서 유산균 수(cfu)의 변화는 관찰되지 않았다. 유산균 CFU의 수는 과채류 추출물의 4가지 발효군에서 약간 감소하였으나 유익균의 생장 억제 효과는 유의하게 나타나지 않았다. 3가지 유해균의 증식억제 효과는 4가지 과채추출물에서 대장균과 슈도모나스의 증식에 영향을 받지 않았다. 그러나 살모넬라균의 증식은 억제되었으며, 이는 과채류 증숙 열수추출물 및 홍삼추출물 첨가 여부에 관계없이 과채류 추출물의 생장억제효과로 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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