Little millet (Panicum sumatrense) is well known for its salt and drought stress tolerance and high nutritional value, but very limited knowledge of genetic variation and genomic information is available. This study was to develop highly polymorphic EST-SSR markers based on cross-species transferability of derived SSRs from switchgrass EST databases and characterize newly developed EST - SSRs to better understand the genetic diversity of collected 37 germplasm accessions of little millet. A total of 779 primer pairs were designed from the 22,961 EST sequences of switchgrass (Pancium virgatum), of which 48 EST - SSR markers were developed based on the trials of transferability of these primers in little millet. The EST - SSR amplicons showed reproducible single band polymorphism and produced a total of 160 alleles with an average of 3.3 alleles per locus in 37 accessions of little millet. T he average values of expected and observed heterozygosities were 0.266 and 0.123, respectively. T he polymorphic information content (PIC) values were observed in range of 0.026 to 0.549 with an average of 0.240. The genetic relatedness among the little millet accessions was evaluated by neighbor-joining dendrogram, which grouped all accessions into two distinct groups. The validation thus demonstrated the utility of the switchgrass EST - SSR markers in assessing genomic relationships in little millet. T he findings from this study could be useful for designing strategies for the identification of diverse germplasm for conservation and future molecular breeding programs for little millet.
Porphyromonas endodontalis and Prevotella intermedia are black-pigmented anaerobic gram negative rods which have been isolated from infected root canals and submucous abscesses of endodontic origin. And they are associated with clinical symptoms such as pain, percussion, and foul odor. It has been reported that there are 3 serotypes according to capsule membrane in P. endodontalis and 2 DNA homology groups and 3 serotypes in P. intermedia, but there is no data available regarding genetic diversity for the species P. endodontalis and P. intermedia. The purpose of this study is to investigate genetic diversities between individual strains of P. endodontalis and P. intermedia which are indistinguishable by serotyping and biotyping using bacterial DNA restriction endonuclease analysis. 45 teeth with at least one clinical symptoms, with single canal, and with pulp necrosis were sampled. For sampling bacteria, access cavity was prepared after disinfecting tooth and its surroundings. Then the paper point was inserted to the apex of the canal, leave there for 15 seconds, and finally it was placed into PRAS Ringer's solution and PBS solution. P. endodontalis and P. intermedia were identified by biochemical test and IIF after subculturing black and brown colonies which were produced after 7 days of incubation on BAP in anaerobic chamber. P. endodontalis and P. intermedia strains were grown in BHI broth and whole genomic DNA was extracted by phenol-chloroform extraction technique and digested by restriction endonuclease, Eco RI and Pst I. The resulting DNA fragments were separated by agarose gel electrophoresis, stained with EtBr and photographed under UV light. The results were as follows : 1. In both P. endodontalis and P. intermedia, different serotypes could be found within a root canal of same patient. 2. There were obvious genetic heterogeneity within a patient and within a serotype in both P. endodontalis and P. intermedia. 3. P. endodontalis serotype c, isolated from different patients, exhibited limited genotypic diversity.
전 세계에서 광범위하게 수집한 벼 유전자원 320개를 63개의 아종특이적마커로 분석하여 유전자원의 다양성, 유연관계 및 유전집단의 구조분석을 하여 아종특이적마커의 아종판별 효율을 검정하고 아종의 게놈 구성을 검토하고자 본 시험을 수행하였다. 1. 본 연구에서 사용한 63개의 아종특이적 마커는 벼 품종을 인디카와 자포니카 두 아종으로 구분하는데 효과적으로 이용할 수 있었다. 2. 실험에 사용한 320개의 벼 유전자원들은 자포니카군(128개)과 인디카군(178개)으로 나눌 수 있었고 Basmati370, Shennong27 등 14개 품종은 중간형 admixture형태의 품종으로 구분할 수 있었다.
Mutation breeding is useful for improving agronomic characteristics of various crops. In this study, we constructed soybean Mutant Diversity Pool (MDP) from 1,695 gamma-irradiated mutants through two selection phases over M1 to M12 generations; we selected 523 mutant lines exhibiting at least 30% superior agricultural characteristics, and, second, we eliminated redundant morphological phenotypes in the M12 generation. Finally, we constructed 208 MDP lines and investigated 11 agronomic traits. We then assessed the genetic diversity and inter-relationships of these MDP lines using target region amplification polymorphism (TRAP) markers. Among the different TRAP primer combinations, polymorphism levels and PIC values averaged 59.71% and 0.15, respectively. Dendrogram and population structure analyses divided the MDP lines into four major groups. According to an analysis of AMOVA, the percentage of inter-population variation among mutants was 11.320 (20.6%), whereas mutant inter-population variation ranged from 0.231 (0.4%) to 14.324 (26.1%). Overall, the genetic similarity of each cultivar and its mutants were higher than within other mutant populations. In an analysis of the genome-wide association study (GWAS) using based on the genotyping-by-sequencing (GBS), we detected 66 SNPs located on 13 different chromosomes were found to be highly associated with four agronomic traits: days of flowering (33 SNPs), flower color (16 SNPs), node number (6 SNPs), and seed coat color (11 SNPs). These results are consistent with those previously reported for other genetic resource populations, including natural accessions and recombinant inbred line. Our observations suggest that genomic changes in mutant individuals induced by gamma rays occurred at the same loci as those of natural soybean population. This study has demonstrated that the integration of GBS and GWAS can serve as a powerful complementary approach to gamma-ray mutation for the dissection of complex traits in soybean.
Linkage disequilibrium between markers or genetic variants underlying interesting traits affects many genomic methodologies. In many genomic methodologies, the effective population size ($N_e$) is important to assess the genetic diversity of animal populations. In this study, dairy cattle were genotyped using the Illumina BoviveHD Genotyping BeadChips for over 777,000 SNPs located across all autosomes, mitochondria and sex chromosomes, and 70,000 autosomal SNPs were selected randomly for the final analysis. We characterized more accurate linkage disequilibrium in a sample of 96 dairy cattle producing milk in Korea. Estimated linkage disequilibrium was relatively high between closely linked markers (>0.6 at 10 kb) and decreased with increasing distance. Using formulae that related the expected linkage disequilibrium to $N_e$, and assuming a constant actual population size, $N_e$ was estimated to be approximately 122 in this population. Historical $N_e$, calculated assuming linear population growth, was suggestive of a rapid increase $N_e$ over the past 10 generations, and increased slowly thereafter. Additionally, we corrected the genomic relationship structure per chromosome in calculating $r^2$ and estimated $N_e$. The observed $N_e$ based on $r^2$ corrected by genomics relationship structure can be rationalized using current knowledge of the history of the dairy cattle breeds producing milk in Korea.
The human reference genome, maintained by the Genome Reference Consortium, is conceivably the most complete genome assembly ever, since its first construction. It has continually been improved by incorporating corrections made to the previous assemblies, thanks to various technological advances. Many currently-ongoing population sequencing projects have been based on this reference genome, heightening hopes of the development of useful medical applications of genomic information, thanks to the recent maturation of high-throughput sequencing technologies. However, just one reference genome does not fit all the populations across the globe, because of the large diversity in genomic structures and technical limitations inherent to short read sequencing methods. The recent success in de novo construction of the highly contiguous Asian diploid genome AK1, by combining single molecule technologies with routine sequencing data without resorting to traditional clone-by-clone sequencing and physical mapping, reveals the nature of genomic structure variation by detecting thousands of novel structural variations and by finally filling in some of the prior gaps which had persistently remained in the current human reference genome. Now it is expected that the AK1 genome, soon to be paired with more upcoming de novo assembled genomes, will provide a chance to explore what it is really like to use ancestry-specific reference genomes instead of hg19/hg38 for population genomics. This is a major step towards the furthering of genetically-based precision medicine.
Kim, Ki-Yong;Yang, Ho-Chul;Tamplin, Mark-L.;Choi, Sang-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권1호
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pp.78-83
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1999
Thirty-six environmental isolates of Vibrio vulnificus obtained from seawater, sediments, and raw seafoods, and 18 clinical isolates from Vibrio septicemia patients were typed by restriction endonuclease digestion profiles (REDP) of genomic DNA with SfiI. The results revealed a high-level of variation in REDPs, indicating a vast genomic diversity among V. vulnificus strains. Genetic relatedness of the strains showed similarities ranging from 10% to 100%. Different REDPs for isolates from various raw seafoods were obtained, and clustering of strains according to type of seafoods was not observed. In contrast, clinical isolates of V. vulnificus showed higher similarity to one another, and could be subdivided into one separate group. The difference in REDPs of the V. vulnificus isolates from clinical origin and from raw seafoods substantiates the previous observation that only a single type of pathogenic strain was involved in each human infection, despite the numerous genetically polymorphic strains found from implicated oysters.
Goats (Capra hircus) were domesticated during the late Neolithic, approximately 10,500 years ago, and humans exerted minor selection pressure until fairly recently. Probably the largest genetic change occurring over the millennia happened via natural selection and random genetic drift, the latter causing genes to be fixed in small and isolated populations. Recent human-influenced genetic changes have occurred through biometrics and genomics. For the most part, biometrics has concentrated upon the refining of estimates of heritabilities and genetic correlations. Heritabilities are instrumental in the calculation of estimated breeding values and genetic correlations are necessary in the construction of selection indices that account for changes in multiple traits under selection at one time. Early genomic studies focused upon microsatellite markers, which are short tandem repeats of nucleic acids and which are detected using polymerase chain reaction primers flanking the microsatellite. Microsatellite markers have been very important in parentage verification, which can impact genetic progress. Additionally, microsatellite markers have been a useful tool in assessing genetic diversity between and among breeds, which is important in the conservation of minor breeds. Single nucleotide polymorphisms are a new genomic tool that have refined classical BLUP methodology (biometric) to provide more accurate genomic estimated breeding values, provided a large reference population is available.
Although sea slaters Ligia have a significant role in rocky shore habitats, their taxonomic entities have not been clearly understood. In this study, we investigated whether genetic variation inferred from a nuclear genetic marker, namely amplified fragment length polymorphism (AFLP), would conform to that of a mitochondrial DNA marker. Using both the mitochondrial DNA marker and the AFLP marker amplified by the six selective primer sets, we analyzed 95 Ligia individuals from eight locations from East Asia. The direct sequencing of mitochondrial 16S rRNA gene revealed three distinct genetic lineages, with 9.8-11.7 Kimura 2-parameter genetic distance. However, the results of AFLP genotyping analysis with 691 loci did not support those of mitochondrial DNA, and revealed an unexpectedly high proportion of shared polymorphisms among lineages. The inconsistency between the two different genetic markers may be explained by difference in DNA evolutionary history, for example inheritance patterns, effective population size, and mutation rate. The other factor is a possible genomic island of speciation, in that most of the genomic parts are shared among lineages, and only a few genomic regions have diverged.
We determined the optimal culture conditions for obtaining the maximum number of intestinal bacteria from the olive flounder Paralichthys olivaceus, and studied bacterial diversity using both culture-dependent and culture-independent methods. Using six culture conditions, mean bacterial numbers were greater than $10^6$ per gram of gut mucus, regardless of the medium. However, the bacterial diversity, based on colony morphology, appeared much higher on Marine agar (MA) and Zobell 2216 agar than on other media. We found eight and 17 cultured bacterial phylotypes with 99% minimum similarity in gut mucus grown on MA and tryptic soy agar, respectively. Furthermore, we used genomic DNA extracted from gut mucus to generate 78 random clones, which were grouped into 25 phylotypes. Of these, six were affiliated with Firmicutes, Actinobacteria, and Verrucomicrobia, and were not found using our culture-dependent methods. Consequently, we believe that Marine agar and Zobell 2216 agar are optimal media for culturing diverse intestinal microbes; we also discovered several novel sequences not previously recognized as part of the gut microbiota of olive flounder.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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