• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제13권3호
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• pp.196-203
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• 2008

Hwangtae, dried Alaska pollack, is a major storage product in the fish processing industry. Hwangtae is prepared by removing the internal organs and drying outdoors during the cold witner months by allowing it to thaw during the daytime and re-freeze at night under sub-zero ($-10^{\circ}C$) conditions and gradually dry from December until the next April for around 5 months from Myungtae. In this study, ground Hwangtae was hydrolyzed using two proteolytic enzymes (pepsin and alcalase) which produced five soluble active peptides from Hwangtae (yellowish dried Pollack, Theragra chalcogramma) protein. Two different peptides with strong antioxidative activity were isolated from the hydrolysate using consecutive chromatographic methods of Sephadex G-25 gel, ion-exchange chromatography on a Sepharose-Sephadex C-25 gel, and high-performance liquid chromatography. The isolated peptides, APO1 and APO2, were composed of 16 and 13 amino acid residues, respectively. Both peptides contained a Gly residue at the C-terminus and the repeating motif Gly-Pro-Hyp. The peptide with a molecular weight less than 1,000 Daltons (APACE) obtained from enzymatic hydrolysates of Hwangtae exhibited the highest ACE inhibitory activity. The APACE peptides was composed of 4 amino acid residues (Gly-Leu-Leu-Pro). These results suggest that Hwangtae hydrolysates could be a good source of peptides with ACE inhibitory activity. Biochemical analysis indicated that two 70 kDa peptides (APG1 and APG2) isolated from the hydrolysate had gelatinoytic activity, which was shown to be a calcium dependent protease type as showed by gelatin SDS PAGE.

• Applied Biological Chemistry
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• 제37권2호
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• pp.130-141
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• 1994

연속식 2단계 막(MWCO 10,000, MWCO 5,000)반응기를 이용하여 어피젤라틴 가수분해물 제조를 위한 최적 가수분해조건과 막반응기 장치에서 효소활성, 효소안정성에 미치는 인자 및 가수분해물의 생성량에 대하여 검토하였다. pH-drop법으로 젤라틴 분해에 대한 효소활성은 pronase E가 가장 높았고, 다음이 trypsin이었다. 1단계 막반응기에서 trypsin으로 어피젤라틴의 최적 가수분해조건은 반응온도 $55^{\circ}C$, pH 9.0, 효소농도 0.1 mg/ml, 기질 대 효소비 100(w/w), 반응부피 600 ml, 유출속도 6.14 ml/min였으며, 이때 가수분해도는 79%였다. 2단계에서 1단계 젤라틴 가수분해물을 pronase E로 분해할 경우는 반응온도 $50^{\circ}C$, pH 8.0, 효소농도 0.3 mg/ml, 기질 대 효소비 33(w/w)였으며 그 이외의 조건은 1단계와 동일하였고, 이때의 가수분해도는 80% 이상이였다. 막을 통한 효소의 누출량은 1단계에서 전체 효소량 중 작동시간 5시간에서 11.5%였으나 5시간 이후에는 거의 누출되지 않았으며, 2단계에서는 작동시간 4시간에서 9.0%가 누출되었다. 막반응기의 기계적인 전단웅력에 의한 효소활성저해는 1단계 및 2단계에서는 작동시간 3시간까지 34% 및 18%가 각각 감소되었으며, 이때 막을 제거시킨 반응기에서 효소활성 감소는 23% 및 10%가 각각 저해되었다. 그러나 효소누출과 가수분해물의 생산량 사이에는 명백한 상호작용은 나타나지 않았다. 1단계 및 2단계 막반응기의 각 최적조건하에서 부피대체율 8배까지의 가수분해물의 생산량은 각각 334 mg 및 250 mg으로 2단계 보다 1단계의 효소 mg당 생산량이 약 1.3배 높았다.

• 한국식품영양학회지
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• 제11권5호
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• pp.565-569
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• 1998

The strain BY-445 which produces new inhihitors of ${\alpha}$-amylase was isolated from a soil sample and identified. The aerial hyphae of this strain develope in the from of open spirals. The spore chain of BY-445 strain appears in spiral shape with spiny surface. Melanoid and soulble pigments were not observed. Gelatin was liquefied, and skin milk and starch was also hydrolyzed. The isolate contained LL-diaminopimelic acid in its cell wall hydrolysate. The content of fatty acid 16:iso, 15:0 anteiso and 16:0 was 25:30, 16.19 and 13.16%, respectively. BY-445 strain was closely related to Streptomyces violaceusinger but it was different from this strain in some cultural and physiological characteristics. This strain was, therefore, designated as Streptomyces sp. BY 445.

• KSBB Journal
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• 제10권5호
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• pp.510-517
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• 1995

명태피 젤라틴을 원료로 하여 재순환 3단계 막반 응기 시스템에서 연속적으로 1단계 (FSEH), 2단계 (SSEH) 및 3단계 효소적 가수분해물(TSEH)을 제 조하여 쓴맛의 존재 유무를 평가한 바, 일반척으로 단백질의 효소적 가수분해울에셔 나타나는 쓴맛이 없으므로 식품 특히 조미료로서의 이용 가능성을 기 대할 수 있었다. 명태피 젤라틴의 각 단계별 가수분해물에 대한 분 자량 분포는 FSEH, SSEH 및 TSEH 이 각각 9,500~4,800Da, 6,600~3,400Da 및 2,300~900Da이었 으며 유리아미노산 내지는 저분자 웹티드로 분해하 지 못하였다. 각 단계별로 얻어진 가수분해물의 아 미노산 조성 중 전체 아미노산의 함량을 보면 gly­c cine(22%), glutamic acid(12%), proline + hy­d droxyproline( 15%), alanine(9%), arginine(8%) 순으로 많이 분포하고 있으며, 단맛과 관련된 아미 노산인 glycine, proline + hydroxyproline, alanine, s senne 등이 51 %, 감칠맛과 신맛을 내는 아미노산 인 glutamic acid와 aspartic acid가 19%으로서, 결국 바람직한 맛을 내는 아미노산이 약 70%를 차 지하고 있었다. 그러나 유리 아미노산의 함량은 전 체 아미노산의 함량에 비 해 상당히 적 였으며 따라서 각각의 단계별로 3종류의 효소를 달리 처리하여도 첼라틴은 유리형 아미노산까지의 분해가 제대로 이 루어지지 않았다. 각 단계별 가수분해물 자체에 대한 관능평가를 비 교한 결과, 3단계 가수분해물인 TSEH가 맛과 종합 평가에서 가장 높은 점수를 얻었으며, 가수분해물의 복합조미료에 대한 관능평가는 3단계 가수분해물로 제조한 TSEHCS가 종합점수에서 시판 BCS보다는 못하였지만 ACS보다는 우수하였고, SCS와는 5% 의 유의수준 내에서 유의차가 없었다. 또한 효소척 가수분해물을 이용한 효소분해 간장을 제조한 후 관 능평가를 실시한 결과, 효소분해 간장을 시판 양조 간장과 8:2(v/v)의 비로 혼합하여 제조한 혼합간장 ( (C)는 산분해 간장의 대용으로셔의 이용 가능성이 충분한 것으로 판단되었다.

• 한국환경과학회지
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• 제19권10호
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• pp.1307-1314
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• 2010

This study was conducted to isolate and characterize a novel feather-degrading bacterium producing keratinase activity. A strain K9 was isolated from soil at poultry farm and identified as Xanthomonas sp. K9 by phenotypic characters and 16S rRNA gene analysis. The cultural conditions for the keratinase production were 0.3% fructose, 0.1% gelatin, 0.04% $K_2HPO_4$, 0.06% $KH_2PO_4$, 0.05% NaCl and 0.01% $FeSO_4$ with an initial pH 8.0 at $30^{\circ}C$ and 200 rpm. In an optimized medium containing 0.1% chicken feather, production yield of keratinase was approximately 8-fold higher than the yield in basal medium. The strain K9 effectively degraded chicken feather meal (67%) and duck feather (54%), whereas human nail and human hair showed relatively low degradation rates (13-22%). Total free amino acid concentration in the cell-free supernatant was about 25.799 mg/l. Feather hydrolysate produced by the strain K9 stimulated growth of red pepper, indicating Xanthomonas sp. K9 could be not only used to increase the nutritional value of chicken feather but also a potential candidate for the development of natural fertilizer applicable to crop plant soil.

• 공업화학
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• 제5권4호
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• pp.681-697
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• 1994

어피로부터 추출한 젤라틴을 효소로 가수분해시킨 가수분해물을 분자량 크기에 따라 분획하여 이를 기능성 소재로서 이용할 목적으로 연속식 3단계 막(1st-SMR, MWCO 10,000; 2nd-SMR, MWCO 5,000; 3rd-SMR, MWCO 1,000) 반응기 장치를 이용하여 젤라틴 가수분해 최적조건이 구명되었고, 또한 막반응기 장치를 장시간 작동하였을 때, 기계적인 응력과 막에 의한 효소활성 및 안정성에 미치는 인자, 그리고 분자량이 서로 다른 가수분해물 획분의 생산량을 높이기 위한 최적화 공정에 대하여 검토하였다. 재순환 3단계 막반응기 장치에서 pH-drop법으로 선정하여 사용한 효소는 Alcalase(1단계), pronate E(2단계)였으며, 3단계에서는 collagenase(3단계)를 사용하였다. 최적 가수분해조건은 1단계의 경우, 효소농도 0.2mg/ml, 기질대 효소비 50(w/w), 온도 $50^{\circ}C$, pH 8.0, 반응부피 600ml 및 유출속도 6.14ml/min였으며, 2단계는 효소농도 0.3mg/ml, 기질대 효소비 33(w/w), 그외의 조건은 1단계와 동일하였다. 그리고 3단계의 경우는 효소농도 0.1mg/ml, 기질대 효소비 100(w/w) 및 유출속도는 10ml/min이였다. 1단계 막반응기를 1시간 작동하였을 때의 기계적인 전단응력 및 막에 의한 효소활성 저하는 30% 및 15%였으며, 2단계 및 3단계는 각각 14%, 5% 및 18%, 8%였다. 1단계, 2단계 및 3단계 막반응기의 최적 가수분해조건하에서 가수분해도는 각각 3.5%(Kjeldahl방법, 87%), 3.1%(77%) 및 2.7%(70%)였으며, 연속식 3단계 막반응기에서 가수분해물의 최종생산량은 부피대체율 10배에서 효소 mg당 430mg이었다.

• 한국수산과학회지
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• 제44권5호
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• pp.456-463
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• 2011

We attempted to isolate a collagenase-1 inhibitory peptide from skate Dipturus chilensis skin protein. The protein from skate skin was digested by various enzymes (alcalase, ${\alpha}$-chymotrypsin, neutrase, papain, pepsin, and trypsin) to produce a collagenase-1 inhibitory peptide. The collagenase-1 inhibitory activity of the peptides obtained was measured by gelatin digestion assay. Among the six hydrolysates, pepsin hydrolysate exhibited the highest collagenase-1 inhibitory activity. The peptide showing strong collagenase-1 inhibitory activity was purified by Sephadex G-25 gel chromatography and HPLC using an octadecylsilyls (ODS) column. The amino acid sequence of purified collagenase-1 inhibitory peptide was identified to be Asn-Leu-Asp-Val -Leu-Glu-Val-Phe (961 Da) by quadrupole time of flight (Q-TOF) and electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) mass spectroscopy. The $IC_{50}$ value of purified peptide was 87.0 ${\mu}M$. Moreover, the peptide did not exhibit cytotoxic effects on human dermal fibroblast cell lines.

• 한국수산과학회지
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• 제42권5호
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• pp.426-433
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• 2009

Fish scales have potential in functional food preparation due to their antioxidant and antihypertensive properties. We investigated the angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitory activity of Tilapia mossambica scale extracts. Hydrolysates of tilapia scales were prepared by enzymatic extraction using five proteases (${\alpha}$-chymotrypsin, Alcalase, Kojizyme, Protamex and trypsin) after scales were treated with hot water for 3 hr. Scale enzymatic hydrolysates prepared using both hot water and enzyme treatments exhibited elevated hydrolysis (about 25%-55%) compared to only enzyme treatment (about 15%-45%). Enzymatic hydrolysates (1 mg/mL) prepared by both hot water and enzyme treatments also showed significantly increased ACE inhibitory activities from about 20%-75%. The pattern of ACE inhibitory activities was similar to the degree of hydrolysis. Alcalase and ${\alpha}$-chymotrypsin hydrolysates displayed the highest ACE inhibitory activities ($IC_{50}$ = 0.83 mg/mL and 0.68 mg/mL, respectively). In addition, the ACE inhibitory effects of $IC_{50}$-chymotrypsin hydrolysates increased with decreasing molecular weight (5 kDa>, 10 kDa> and 30 kDa>), with the 5 kDa> fraction displaying the highest ACE inhibitory activity (about 89.9% and $IC_{50}$ = 0.1 mg/mL). We suggest that the peptide compounds of enzymatic hydrolysates prepared from tilapia scale enhances ACE inhibitory activity and might be useful as an antihypertensive material.