To determine contents of inorganic elements of Ganoderma lucidum, the horn-shaped carpophores and the pileus of Ganoderma lucidum were incinerated and analyzed by inductively coupled plasma atomic emission spectrophotometry. The ash contents of the pileus and the horn-shaped carpophore were 1.48% and 1.40%, respectively. The pileus contained calcium, magnesium, sodium, manganese, iron, zinc and germanium in that order. The horn-shaped carpophore contained magnesium, calcium, zinc, manganese, iron, copper and germanium in that order. To examine the protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum for immunopotentiating activity, its fruit bodies were extracted with hot water. Purification of the extract was carried out by acetone precipitation and dialysis. The fraction obtained during the purification procedure consisted of a polysaccharide moiety (51%) and a protein moiety (5%). When the compound was administered intraperitoneally to the mice at a dose of 50mg/kg, it enhanced the accumulation of the peritoneal exudate cells, macrophage and polymorphonuclear leucocytes, thereby indicating immunopotentiation.
식용버섯을 대상으로 항응고 활성을 검색한 결과 영지버섯 알칼리 추출물이 가장 높은 활성을 보였다. 영지버섯으로부터 추출한 조다당 획분인 GL-I은 1N NaOH로 8시간 추출물(GL-0)을 methanol 환류, 에탄올 침전을 거쳐 투석, 동결건조하여 조제하였다. 히-I 획분은 periodate 산화에 의해서는 활성이 크게 변하지만 pronase 소화시 활성의 변화가 거의 없는 것으로 보아 항응고 활성의 본체는 주로 당과 관계되는 것으로 추정된다. 히-I의 구성당은 glucose:galactose:xylose:mannose:arabinose가 19.3:3.0:2.3:1.3:1.0:0.3의 molar ratio로 구성되어 있다. GL-I 획분을 DEAE-Toyopearl 650C(GL-Ia$\longrightarrow$If)와 Sephadex G-100(GL-Ic-I$\longrightarrow$GL-Ic-II)을 이용하여 부분 정제하였다.
A neutral polysaccharide, GP, was isolated from a fermentation broth of Ganoderma lucidum Acid hydrolysis and a paper chromatography analysis indicated that the polysacchride was composed of glucose, xylose, and mannose. The molecular weight was estimated to be $2.9{\times}10^4$. The oral administration of GP to mice showed that it can inhibit liver damage induced by GalN and $CCl_4$.
In the previous study we described the antitumor effect of GLB, a protein-polysaccharide fraction separated from the growing tips of Ganoderma lucidum, against sarcoma 18 0 solid tumor in ICR mice. In this study, we separated an acidic protein-polysaccharide fraction, GLB-A, and a basic protein-polyaccharide fraction, GLB-B, from GLB by differential precipitation, and elucidated their antitumor and immunomodulatory activities. When ip injected at the dose of 50mg/kg/day into the ICR mice, GLB-A and GLB-B inhibited the growth of ip implantated sarcoma 180 cells by 32.4% and 21.0%, respectively. Of these, GLB-A increased the % lymphoblast in the spleen of the tumor-bearing and the normal mice by 20.9% and 123.0%, and the CD4/CD8 ratio by 73.3% and 22.4%, respectively. GLB-A also increased the expression of CD25 (IL-2 receptor alpha ch0ain) in normal mice by 82.0%. These results strongly suggest that GLB-A is a promising candidate for antitumor immunomodulatory medicine.
This study was carried out to Investigate the effects of Panax ginseng, Ganoderma lucidum extract and crude polysaccharide of G. lucidum on the growth of lactic acid bacteria. p. ginseng extract contained 60.7% carbohydrate and 27.5% protein, whereas G. lucidum contained 35.9% carbohydrate and 46.3% protein. The total sugar and protein content of crude polysaccharide of G. lucidum were 47.2% and 15.2%, respectively. Two amino acids(hg, Trp) were detected in p. ginseng extract and 11 amino acids (hg, Trp, Ua, Lys, Ser, etc.) in C. lucidum extract. By the addition of p. ginseng, 5. lucidum extract and crude polysaccharide, the cia. p. ginseng was more effective on the growth of 1. casei an: G. lucidum was more effective on that of S. thermophilus. The effect of free amino acids on the growth of tactic acid bacteria was also examined. Arginine and lysine stimulated the growth of L. casei, whereas Lysine, serine, arginine, and glutamic acid stimulated the growth of 5. thermophilus.
영지버섯(Ganoderma lucidum WK-003) 균사체의 액체 배양에 의하여 세포외 생물고분자 물질의 산업적 생산을 위한 최적 조건을 검토하였다. 세포외 고분자물질 생산을 위한 산업용배지의 최적 농도는 molasses 5%와 CSL 2.5%에서 균사체 생장(12.4 g/l)과 균체외 다당체 생산(3.6g/l)이 최대를 나타났으며, 5 l 발효조 배양시에는 균사체 생장이 합성배지(8.1g/l)일때가 산업용배지(7.3 g/l)보다 높게 나타났으나, 균체외 다당체 생산은 합성배지(7.2 g/l)보다 산업용 배지(11.2 g/l)일 때가 더 높게 나타났다. 간 보호 효과는 합성배지와 최적화된 산업용 배지에서 생산된 균체외 다당체를 $CCl_4$ 독성이 유발된 rat에 경구 투여하였을 때 주요 지표를 나타내는 GPT활성은 산업용배지에서 생산된 균체외 다당체 인 경우 704IU/L에서 356IU/L로 낮추었으며, 합성배지에서 생산된 균체외 다당체는 704IU/L에서 349IU/L로 낮춘 결과를 보였다. 따라서 합성배지와 산업용 배지에서 생산된 균체외 다당체의 간 보호 작용은 거의 차이가 없는 것으로 나타났다.
Submerged cultures of Ganoderma lucidum, a valuable mushroom in traditional Chinese medicine, were used for production of bioactive Banoderic acids and Ganoderma polysaccharides. The significant effects of oxygen supply were demonstrated in both shake flasks and bioreactors. By changing the medium loading volume in a shake flask, a different value of initial volumetric oxygen transfer coefficient ($K_L$a) was obtained, and a higher $K_L$a value led to a higher biomass density and a higher productivity of both intracellular polysaccharide and ganoderic acid. In a stirred bioreactor, at an initial $K_L$a of 78.2 $h^{-1}$, a maximal cell concentration of 15.6 g/L by dry weight was obtained, as well as a maximal intracellular polysarcharide (IPS) production of 2.2 g/L and its maximal productivity of 220 mg/(L.d). An increase of initial $K_L$a led to a higher production and productivity of GA, and the GA production and productivity at an initial $K_L$a of 96.0 $h^{-1}$ was 1.8-fold those at an initial $K_L$a of 16.4 $h^{-1}$. The fundamental information obtained in this study may be useful for efficient large-scale production of these valuable bioactive products by the submerged cultures.
In the previous study we described the antitumor activity of GLB, a protein-polysaccharide fraction of the growing tips of Ganoderma lucidum, against sarcoma 180 solid tu mor in ICR mice. In this study we investigated the stimulatory activity of GLB on macrophages. When analyzed using a flow cytometer, GLB ($100{\mu}g/ml$) was found to increase the phagocytic activity of the BALB/c mouse peritoneal macrophages as well as chicken macrophage BM2CL cells against FITC-labeled C.albicans by 55.2% and 21.2%, respectively. GLB also increased the spreading and the expression of MHC class II molecules of BM2CL cells as well as the mouse peritoneal macrophages. From these results, it is clear that GLB is a strong stimulator to the macrophages.
Two protein-polysaccharide fractions, GLA and GLB, respectively, were prepared from the pileus of the fully grown carpophores and the tips of the growing carpophores of Ganod erma lucidum. At a dose of 100mg/kg/day ip, GLA and GLB inhibited the growth of sarcoma 180 solid tumor in ICR mice by 56.3% and 81.8%, respectively. In a flow cytometric (FCM) analysis, GLA and GLB enhanced the formation of lymphoblasts of BALB/c, splenic leukocytes at a concentration of 100 ${\mu}$g/ml, by 38.3% and 61, 3%, respectively. When ip injected into ICR mice, GLB exerted anti-leukopenic effect against cyclophospamide (75mg/kg, ip) in that the leukocyte counts of the peripheral blood of the normal and the cyclophosphamide-treated mice. respectively. was (11.1 ${\pm}$ 3.8) ${\times}$ 10$^3$ and (4.0 ${\pm}$ 1.8) ${\times}$ 10$^3$, while the GLB-cyclophosphamide treated mice showed a leukocyte count of (10.8 ${\pm}$ 5.1) ${\times}$ 10$^3$ CELLS/${\mu}$l. These results suggest that GLB is a promising candidate for an effective, cancer immunotherapeutic agent.
영지버섯 Ganoderma lucidum과 잔나비걸상버섯 Ganoderna applanatum의 원형질체 융합균주 5개에 대하여 항암실험을 실시하여 그 중에서 다른 것에 비해 항암력이 높은 융합균주 F-2를 선발하였다. 그 항암성분을 조사하기 위하여 융합체의 균사를 액내 배양하고 열수추출물로부터 얻은 단백 다당체를 DEAE cellulose ion exchange column chromatography와 Sepharose CL-4B gel filtration을 이용하여 5가지 분획(Fr. I-V)으로 분리, 정제하여 모균주들과의 차이점을 비교, 분석하였다. 모균주와 분리한 각 성분들을 20mg/kg/day 용량으로 마우스의 복강에 투여하였을 때 sarcoma 180 고형암에 대하여 균주보다 융합체 성분(Fr. ll)의 종양억제율이 최고 1.5배로 증가되었다. 그리고 마우스의 면역에 영향을 미치는 항암성분을 연구한 결과, 대조군에 비해 활성화된 대식세포에서 분비되는 superoxide anion의 양을 1.2배, 비장세포중의 용혈반 형성 세포수를 4.3배로 증가시켰다. 화학분석에 의하면 이 성분은 glucose, galactose, mannose, fucose와 xylose로 구성된 다당류가 85.2%이며 15종의 아미노산으로 구성된 단백질이 0.39%이었고, hexosamine이 0.39%로 구성되었으며 분자량은 $5.6{\times}10^4$ dalton이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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