Kim, Ji Soo;Kim, Yong Hwan;Anderson, Anne J.;Kim, Young Cheol
The Plant Pathology Journal
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제30권2호
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pp.215-219
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2014
The GacS/GacA two component system regulates various traits related to the biocontrol potential of plant-associated pseudomonads. The role of the sensor kinase, GacS, differs between strains in regulation of motility. In this study, we determined how a gacS mutation changed cell morphology and motility in Pseudomonas chlororaphis O6. The gacS mutant cells were elongated in stationary-phase compared to the wild type and the complemented gacS mutant, but cells did not differ in length in logarithmic phase. The gacS mutant had a two-fold increase in the number of flagella compared with the wild type strain; flagella number was restored to that of the wild type in the complemented gacS mutant. The more highly flagellated gacS mutant cells had greater swimming motilities than that of the wild type strain. Enhanced flagella formation in the gacS mutant correlated with increased expression of three genes, fleQ, fliQ and flhF, involved in flagellar formation. Expression of these genes in the complemented gacS mutant was similar to that of the wild type. These findings show that this root-colonizing pseudomonad adjusts flagella formation and cell morphology in stationary-phase using GacS as a major regulator.
GacS and GacA proteins form a two component signal transduction system in bacteria. Here, Tn5 transposon gacS and gacA (Gac) mutants of Pseudomonas sp. KL28, an alkylphenol degrader, were isolated by selecting for smooth colonies of strain KL28. The mutants exhibited reduced ability to migrate on a solid surface. This surface motility does not require the action of flagella unlike the well-studied swarming motility of other Pseudomonas sp. The Gac mutants also showed reduced levels of biofilm and pellicle formation in liquid culture. In addition, compared to the wild type KL28 strain, these mutants were more resistant to high concentrations of m-cresol but were more sensitive to $H_2O_2$, which are characteristics that they share with an rpoS mutant. These results indicate that the Gac regulatory cascade in strain KL28 positively controls wrinkling morphology, biofilm formation, surface translocation and $H_2O_2$ resistance, which are important traits for its capacity to survive in particular niches.
The GacS/GacA system in the root colonizer Pseudomonas chlororaphis O6 is a key regulatory system of many traits relevant to the plant probiotic nature of this bacterium. The work in this paper elucidates proteins using proteomics approach in P. chlororaphis O6 under the control of the cytoplasmic regulatory protein, GacA. A gacA mutant of P. chlororaphis O6 showed loss in production of phenazines, acyl homoserine lactones, hydrogen cyanide, and protease, changes that were associated with reduced in vitro antifungal activity against plant fungal pathogens. Production of iron-chelating siderophore was significantly enhanced in the gacA mutant, also paralleling changes in a gacS mutant. However, proteomic analysis revealed proteins (13 downregulated and 7 upregulated proteins in the mutant compared to parental strain) under GacA control that were not apparent by a proteomic study of a gacS mutant. The putative identity of the downregulated proteins suggested that a gacA mutant would have altered transport potentials. Notable would be a predicted loss of type-VI secretion and PEP-dependent transport. Study of mutants of these GacA-regulated proteins will indicate further the features required for probiotic potential in this rhizobacterium.
Jo, Wan-Kuen;Shin, Seung-Ho;Hwang, Eun-Song;Yang, Sung-Bong
Asian Journal of Atmospheric Environment
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제4권3호
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pp.177-188
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2010
The use of an activated carbon (AC) system alone has the limitation that the pollutants are not eliminated but only transferred to another phase with the consumed AC becoming hazardous waste itself. Therefore, the present study investigated the feasibility of using a combined system of granular AC (GAC) with S-doped visible-light-induced $TiO_2$ (GAC/S-doped $TiO_2$) to clean monocyclic aromatic hydrocarbons (MAHs) with concentrations at $\leq$ 3 mg $m^{-3}$, using a continuous air-flow reactor. This study conducted three different experiments: an adsorption test of pure GAC and GAC/S-doped $TiO_2$; a long-term adsorptional photocatalytic (AP) activity test of GAC/S-doped $TiO_2$; and an AP activity test of GAC/S-doped $TiO_2$ under different conditions. For the AP activity test, three parameters were evaluated: various weights of GAC/S-doped $TiO_2$ (0.9, 4.4, and 8.9 g); various flow rates (FRs) (0.5, 1 and 2 L $min^{-1}$); and various input concentrations (ICs) of the target MAHs (0.1, 1, 2 and 3 mg $m^{-3}$). The adsorption efficiencies were similar for the pure GAC and GAC/S-doped $TiO_2$ reactors, suggesting that S-doped $TiO_2$ particles on GAC surfaces do not significantly interfere with the adsorption capacity of GAC. Benzene exhibited a clear AP activity, whereas no other target MAHs did. In most cases, the AP efficiencies for the target MAHs did not significantly vary with an increase in weight, thereby suggesting that, under the weight range tested in this study, the weights or FRs are not important parameters for AP efficiency. However, ICs did influence the AP efficiencies.
본 연구의 목적은 입상활성탄에서 이온강도와 철첨착이 Enterococcus faecalis의 부착에 미치는 영향을 분석하는 것이다. 야자계 입상활성탄(c-GAC), 철첨착된 야자계 입상활성탄(fc-GAC), 산세척된 야자계 입상활성탄(a-GAC), 그리고 철첨착된 산세척 야자계 입상활성탄(fa-GAC)에서 박테리아 부착을 관찰하기 위하여 두 가지 용액조건(NaCl 1, 10 mM)에서 칼럼실험을 수행하였다. 실험결과, c-GAC에서 이온강도가 1에서 10 mM로 증가함에 따라 박테리아의 질량회수율은 77.3에서 61.6%로 감소하였고, a-GAC에서는 질량회수율이 71.6에서 32.3%로 감소하였다. 이는 이온강도가 증가함에 따라 입상활성탄에서 박테리아의 부착이 증진될 수 있음을 나타낸다. 한편, fc-GAC에서 질량회수율은 62.6% (1 mM)과 53.3% (10 mM)이었고, fa-GAC에서는 50.8% (1 mM)과 16.9% (10 mM)이었는데, 이들 질량회수율이 c-GAC와 a-GAC에서의 질량회수율보다 낮았다. 이는 철첨착에 의하여 입상활성탄에서 박테리아의 부착이 증진될 수 있음을 나타낸다. 본 연구는 입상활성탄에서 박테리아의 부착과 관련하여 이온강도와 철수산화물 첨착의 영향에 대한 정보를 제공하고, 나아가 표면이 변형된 입상여재를 이용한 미생물의 제거에 관한 지식을 증진시킬 것이다.
Kim, Chul Hong;Kim, Yong Hwan;Anderson, Anne J.;Kim, Young Cheol
The Plant Pathology Journal
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제30권2호
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pp.220-227
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2014
The GacS/GacA system in the root colonizer Pseudomonas chlororaphis O6 is a key regulator of many traits relevant to the biocontrol function of this bacterium. Proteomic analysis revealed 12 proteins were down-regulated in a gacS mutant of P. chlororaphis O6. These GacS-regulated proteins functioned in combating oxidative stress, cell signaling, biosynthesis of secondary metabolism, and secretion. The extent of regulation was shown by real-time RT-PCR to vary between the genes. Mutants of P. chlororaphis O6 were generated in two GacS-regulated genes, trpE, encoding a protein involved in tryptophan synthesis, and prnA, required for conversion of tryptophan to the antimicrobial compound, pyrrolitrin. Failure of the trpE mutant to induce systemic resistance in tobacco against a foliar pathogen causing soft rot, Pectobacterium carotovorum SCCI, correlated with reduced colonization of root surfaces implying an inadequate supply of tryptophan to support growth. Although colonization was not affected by mutation in the prnA gene, induction of systemic resistance was reduced, suggesting that pyrrolnitrin was an activator of plant resistance as well as an antifungal agent. Study of mutants in the other GacS-regulated proteins will indicate further the features required for biocontrol-activity in this rhizobacterium.
본 연구는 CSOs의 고도처리를 목적으로 다단 횡류식 여과와 GAC 흡착조의 융합공정의 운영에서 GAC 흡착조의 유기물 처리 특성을 조사하고 설계 파과점에 도달한 GAC를 전기화학적 방법을 통한 재생효율을 평가하는 것이다. 여과공정은 부유물질은 용이하게 제거되지만 용존 유기물이 제거되지 않아 CSOs의 고도처리를 위해서는 용존유기물질의 제거능이 추가로 필요하다. 일반적으로 GAC 흡착은 정수처리 공정이나 하수의 3차 처리공정과 같은 저농도 유기물 조건에서 적용되어왔고 하수나 CSOs와 같이 유기물 농도가 높은 조건에서는 거의 적용이 되지 않았기에 본 연구에서 GAC를 이용한 CSOs 처리는 흥미로운 경험을 제공할 것이다. 본 연구는 유입 유기물 강도에 따른 GAC의 연속 운전 및 파과 특성을 조사하고 사용된 GAC를 전기화학적 재생을 적용하였으며, 이때 전압강도 및 전해액이 종류에 따른 흡착 유기물의 탈착 특성을 조사하였고 재생 후 GAC의 재흡착실험을 통해서 재생효율을 평가하였다. GAC 연속 운전결과 파과기간은 고농도 조건에서 21일, 중농도에서 28일 그리고 저농도에서 32일을 나타내었다. 전기분해를 통한 흡착 유기물의 탈착은 전기 분해 조건에 따라 188~609 mgCOD/L까지 발생하였고 전해액 종류의 영향은 NaOH가 H2O2보다 조금 우수한 탈착 특성을 나타냈다.
The global regulator, GacS (global antibiotic and cyanide sensor kinase), was required for the increased resistance to hydrogen peroxide occurring as cultures of the rhizobacterium, P. chlororaphis O6, matured. Specific stationary-phase peroxidase and catalase isozymes were absent in the GacS mutant, whereas a manganese-superoxide dismutase isozyme was expressed earlier and to a great extent than wild type. In the wild type cell, transcript accumulation of rpoS was higher in late logarithmic-phase cells than cells from mid logarithmic- or stationary-phase. Transcripts from rpoS in the GacS mutant were reduced in each of these growth phases compared to the wild type expression. The down stream sequence from rpoS lacked sequences encoding a small RNA, rsmZ, found in other pseudomonads and implicated in control of genes activated by the GacS system. These findings suggest that GacS-mediated regulation of RpoS plays role in control of oxidative stress in P. chlororaphis O6 by as yet an unknown mechanism.
E. intermedium Blocontrol activity of a P. chlororaphis rhizobacteium O6, depends to the synthesis of extracellular secondary metabolites and exoenzymes, thought to antagonize the pathogenicity of a variety of phytopathogenic fungi. The production of secondary metabolites and exoenzymes in O6, depends essentially on the GacS-mediated signal transduction pathway, which activates largely unknown signal transduction pathway. To exploit the GacS-mediated signal transdcution pathway involved in activation of ph genes that are necessary for biosynthesis of phenazine from P. chlororaphis O6, we cloned and sequenced the phz operon, rpoS gene encoding stationary specific sigma factor, ppx gene encoding polyphosphatase, and lon gene encoding ion protease. Expression of each gene in wild type and GacS mutant were analyzed by RT-PCR. Transcripts from rpoS, phzI enconing acylhomoserine lactone (AHL) synthase, and ph structural genes in the GacS mutant were reduced in each of these growth phases compared to the wild type. The GacS or Lon mutant was found to be deficient in the production of phenzines, exoenzymes, and the acylhomoserine lactone. These mutants were not complemented by ph operon and addition of exogenous AHL. These results indicate that the GacS global regulatory systems controls phenazine production at multiple levels. Future research will focus to identifying the GacS-mediated regulatory cascade involving in production of phenazine in P. chlororaphis.
본 연구의 목적은 파일롯 규모의 입상활성탄지에서 흡착과 생물학적 제거 기작이 진행되는 장기간의 운전동안 전처리공정으로서 오존처리의 영향을 평가하는 것이다. 공정별로 용존 또는 생분해성 유기물질의 제거, DOM의 성상과 특성변화와 미생물의 증식의 변화를 평가하였다. 오존공정이 존재하는 입상활성탄 공정(전오존처리+활성탄 여과지; Pre O$_3$ + F/A, 후오존처리 + 활성탄 흡착지; Post O$_3$ + GAC)은 오존의 위치(전오존 후오존)에 상관없이 입상활성탄 단독공정(활성탄 여과지; F/A, 활성탄 흡착지; GAC)에 비해 생물학적 제거능이 활성화된 장기간 운영 후에 DOC, 친수성 용존유기물(HPI), BDOC와 AOC의 제거율이 10$\sim$20% 정도로 높았다. 오존공정은 전반적인 DOC 제거에는 큰 영향을 주지는 못했지만, AOC를 약 20% 정도로 감소시켜 관로내 미생물의 재증식을 저감하는데 기여할 것으로 생각된다. 활성탄 여재에 고정된 미생물의 생체량인 Biomass는 전처리로서 오존처리의 유.무에 상관없이 공정별로 큰 차이를 보이지 않은 반면에, 유출수에서의 HPC는 F/A나 GAC에 비해 Post O$_3$ + GAC에서 매우 낮았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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