PU.1, a tissue-specific transcription activator, binds to a purine-rich sequence(5'-GAGGAA-3') called PU box. The PU.1 cDNA consists of an open reading frame of 816 nucleotides coding for 272 amino acids. The amino terminal end is highly acidic, while the carboxyl terminal end is highly basic. Transcriptional activation domain is located at the amino terminal end, while DNA binding domain is located at the carboxyl terminal end. Activation of PU.1 transcription factor is supposed to be accomplished by the phosphorylation of serine residue(s). There exist 22 serines in the PU.1. Five(the 41, 45, 132$.$133, and 148th) of the serines(plausible phosphorylation site by casein kinase II), are the primary targets of interest in elucidating the molecular mechanism(s) of the action of the PU.1 gene. In this study, PU.1 cDNA coding for the five serine residues(41th AGC, 45th AGC, 132$.$133th AGC$.$TCA, and 148th TCT), was mutated to alanine codon(41th GCC, 45th GCC, 132$.$133th GCC$.$GCA, and 1481h GCT), respectively, by Splicing-Overlapping-Extension(SOE) using Polymerase Chain Reaction(PCR). And each mutated cDNA fragments was ligated into pBluescript KS+ digested with HindIII and Xba I, to generate mutant clones named pKKS41A, pRKS45A, pMKS132$.$133A, and pMKS148A. The clones will be informative to study the "Structure and Function" of the immu-nologically important gene, PU.1.
Capsule endoscopy is one of the most remarkable inventions in last ten years. Causing less pain for patients, diagnosis for entire digestive system has been considered as a most convenience method over a normal endoscope. However, it is known that the diagnosis process typically requires very long inspection time for clinical experts because of considerably many duplicate images of same areas in human digestive system due to uncontrollable movement of a capsule endoscope. In this paper, we propose a method for clinical diagnosticians to get highly valuable information from capsule-endoscopy video. Our software system consists of three global maps, such as movement map, characteristic map, and brightness map, in temporal domain for entire sequence of the input video. The movement map can be used for effectively removing duplicated adjacent images. The characteristic and brightness maps provide frame content analyses that can be quickly used for segmenting regions or locating some features(such as blood) in the stream. Our experiments show the results of four patients having different health conditions. The result maps clearly capture the movements and characteristics from the image frames. Our method may help the diagnosticians quickly search the locations of lesion, bleeding, or some other interesting areas.
The purpose of the present study was to evaluate the bioequivalence of two risperidone tablets, Risperdal (Janssen Korea Co., Ltd.) and Rispen (Myung In Pharm. Co., Ltd), according to the guidelines of Korea Food and Drug Administration (KFDA). The risperidone release from the two risperidone formulations in vitro was tested using KP VIII Apparatus II method with various of dissolution media (pH 1.2, 4.0, 6.8 buffer solution and water). Twenty four healthy male subjects, $23.33\;{\pm}2.10$ years in age and $69.24{\pm}8.05\;kg$ kg in body weight, were divided into two groups and a randomized $2\;{\times}\;2$ cross over study was employed. After one tablet containing 2 mg as risperidone was orally administered, blood was taken at predetermined time intervals and the concentrations of risperidone in serum were determined using HPLC method with UV detector. The dissolution profiles of two formulations were similar at all dissolution media. Besides, the pharmacokinetic parameters such as $AUC_t$,$C_{max},\;and\;T_{max}$ were calculated and ANOVA test was utilized for the analysis of the parameters using logarithmically transformed $AUC_t$,$C_{max}$ and untransformed $T_{max}$. The results showed that the differences between two formulations based on the Risperdal were 0.20, -1.29 and -11-09% for $AUC_t$,$C_{max},\;and\;T_{max}$, respectively There were no sequence effects two formulations in parameters. The 90% confidence intervals using logarithmically transformed data were within the acceptance range of log(0.8) to log(1.25) (e.g.,$log(0.90){\sim}log(1.30)$ and $log(0.84){\sim}log(1.09)$ for$AUC_t$ and $C_{max}$, respectively). Thus, the criteria of the KFDA guideline for the bioequivalence were satisfied, indicating Rispen tablet and Risperdal tablet were bioequivalent.
The purpose of the present study was to evaluate the bioequivalence of two glimepiride tablets, $Amaryl^{\circledR}$ (Handok/Aventis Pharm. Co., Ltd.) and Glimed (Kuhn II Pharm. Co., Ltd.), according to the guidelines of Korea Food and Drug Administration (KFDA). The glimepiride release from the two glimepiride formulations in vitro was tested using KP VIII Apparatus II method with a variety of dissolution media (pH 1.2, 4.0, 6.8 buffer solution, water and blend of PSB 80 into each dissolution medium). Twenty six healthy male subjects, $22.65{\pm}2.19$ years in age and $66.55{\pm}8.85$ kg in body weight, were divided into two groups and a randomized $2\;{\times}\;2$ cross-over study was employed. After one tablet containing 2 mg as glimepiride was orally administered, blood was taken at predetermined time intervals and the concentrations of glimepiride in serum were determined using HPLC method with UV detector. The dissolution profiles of two formulations were similar at all dissolution media. Besides, the pharmacokinetic parameters such as $AUC_t$, $C_{max}$ and $T_{max}$ were calculated and ANOVA test was utilized for the statistical analysis of the parameters using logarithmically transformed $AUC_t$, $C_{max}$ and untransformed $T_{max}$. The results showed that the differences between two formulations based on the Amaryl were -3.70, -8.28 and 0.61% for $AUC_t$, $C_{max}$ and $T_{max}$, respectively. There were no sequence effects between two formulations in these parameters. The 90% confidence intervals using logarithmically transformed data were within the acceptance range of log(0.8) to log(1.25) (e.g., $log(0.84){\sim}log(1.04)$ for $log(0.82){\sim}log(1.03)$ for $AUC_t$ and $C_{max}$, respectively). Thus, the criteria of the KFDA guideline for the bioequivalence were satisfied, indicating Glimed tablet and Amaryl tablet were bioequivalent.
Enzymatic pre-bleaching by modification of pulp fibers with xylanases is an attractive approach to reduce the consumption of toxic bleaching chemicals in the paper industry. In this study, an alkaliphilic endoxylanase gene was isolated from metagenomic DNA of a structurally stable thermophilic lignocellulose-degrading microbial consortium using amplification with conserved glycosyl hydrolase family 10 primers and subsequent genome walking. The full-length xylanase showed 78% sequence identity to an endo-${\beta}$-1,4-xylanase of Clostridium phytofermentans and was expressed in a mature form with an N-terminal His6 tag fusion in Escherichia coli. The recombinant xylanase Xyn3F was thermotolerant and alkaliphilic, working optimally at $65-70^{\circ}C$ with an optimal pH at 9-10 and retaining >80% activity at pH 9, $60^{\circ}C$ for 1 h. Xyn3F showed a $V_{max}$ of 2,327 IU/mg and $K_m$ of 3.5 mg/ml on birchwood xylan. Pre-bleaching of industrial eucalyptus pulp with no prior pH adjustment (pH 9) using Xyn3F at 50 IU/g dried pulp led to 4.5-5.1% increase in final pulp brightness and 90.4-102.4% increase in whiteness after a single-step hypochlorite bleaching over the untreated pulp, which allowed at least 20% decrease in hypochlorite consumption to achieve the same final bleaching indices. The alkaliphilic xylanase is promising for application in an environmentally friendly bleaching step of kraft and soda pulps with no requirement for pH adjustment, leading to improved economic feasibility of the process.
This study was conducted to investigate optimum conditions for the production of cellulose-degrading crude enzymes by an isolated marine bacterium. A marine microorganism producing an extracellular cellulose-degrading enzyme was isolated from the red seaweed, Grateloupia elliptica Holmes. The isolated bacterium was identified as Cellulophaga lytica by 16S ribosomal RNA gene sequence analysis and physiological profiling and designated as Cellulophaga lytica PKA 1005. The optimum conditions for the growth of Cellulophaga lytica PKA 1005 were pH 7, 2% NaCl, and $30^{\circ}C$ with 36 h incubation time. To obtain the crude enzyme, the culture medium of the strain was centrifuged for 30 min at $12,000{\times}g$ and $4^{\circ}C$, and the supernatant was used as crude enzyme. The optimum conditions for the production of the cellulose-degrading crude enzyme were pH 8, $35^{\circ}C$, 8% carboxyl methyl cellulose, and 60 h reaction time.
Classical swine fever virus (CSFV) is the etiologic agent of classical swine fever, a highly contagious disease that causes significant economic losses to the swine industry. The lapinized C-strain, a widely used vaccine strain against CSFV, has low growth efficiency in cell culture, which limits the productivity in the vaccine industry. In this study, a recombinant virus derived from C-strain was constructed and subjected to continuous passaging in PK-15 cells with the goal of acquiring a high progeny virus yield. A cell-adapted virus variant, RecCpp80, had nearly 1,000-fold higher titer than its parent C-strain but lost the ability to induce fever in rabbits. Sequence analysis of cell-adapted RecC variants indicated that at least six nucleotide changes were fixed in RecCpp80. Further adaption of RecCpp80 variant in swine testicle cells led to a higher virus yield without additional mutations. Introduction of each of these residues into the wild-type RecC backbone showed that one mutation, M979R (T3310G), located in the C-terminal region of E2 might be closely related to the cell-adapted phenotype. Rabbit inoculation revealed that $RecCpp40_{+10}$ failed to induce fever in rabbits, whereas $RecCpp80_{+10}$ caused a fever response similar to the commercial C-strain vaccine. In conclusion, the C-strain can be adapted to cell culture by introducing specific mutations in its E2 protein. The mutations in RecCpp80 that led to the loss of fever response in rabbits require further investigation. Continuous passaging of the C-strain-based recombinant viruses in PK-15 cells could enhance its in vitro adaption. The non-synonymous mutations at 3310 and 3531 might play major roles in the enhanced capacity of general virus reproduction. Such findings may help design a modified C-strain for improved productivity of commercial vaccines at reduced production cost.
Morphological observation of roots and molecular technique were used to investigate the symbiotic relationships between arbuscular mycorrhizal (AM) fungi and ginseng roots. Korean ginseng, Panax ginseng, was collected from 8 sites in Korea. Colonization pattern of AM fungi in ginseng roots was determined as an Arum type under light microscopes. Nested PCR using AM fungal specific primers was employed to amplify a partial region on 18s rDNA of AM fungi from the root extracted mixed DNA. The amplified DNA was cloned and analyzed by random fragment length polymorphism (RFLP) with restriction enzymes, AluI, HinfI and AsuC21. One from each RFLP pattern was selected for sequencing. A total 16 clones were sequenced and identified as 2 species of AM fungi; Paraglomus brasilianum and Glomus spurcum. Paramglomus brasilianum was found from most of the ginseng roots, in this syudy suggesting that this species of AM fungi could have specific relationship with the ginseng root. Possible roles of AM fungal species in ginseng roots are discussed.
In this paper. we propose a novel performance monitoring scheme for heterogeneous SOAP nodes. The scheme is basically based on two-level (kernel-level and user-level) packet filtering of TCP flows. By TCP flow, we mean a sequence of raw packet streams on a TCP transaction. In this scheme, we detect and extract SOAP operations embedded in SOAP messages from TCP flows. Therefore, it becomes possible to monitor heterogeneous SOAP nodes deployed on diverse SOAP-based middlewares such as .Net and Apache AXIS. We present two implementation mechanisms for the proposed scheme. The first mechanism tries to identify SOAP operations by analyzing all fragmented SOAP messages on TCP flows. However, a naive policy would incur untolerable overhead since it needs to copy all packets from kernel to user space. The second mechanism overcomes this problem by selectively copying packets from kernel to user space. For selective copying, we use a kernel-level packet filtering method that makes use of some representative TCP flags.(e.g. SIN, FIN and PSH). In this mechanism, we can detect SOAP operations only from the last fragment of SOAP messages in most cases. Finally, we implement a SOAP monitoring system using a component ca]led SOAP Sniffer that realizes our proposed scheme, and show experimental results. We strongly believe that our system will play a vital role as a tool for various services such as transaction monitoring and load balancing among heterogeneous SOAP nodes.
It has been reported that Back-Tension played a significant role in archery (Lee & Bondit, 2005; Kim, 2007) but there are a few researches related Back-Tension in Korea recently. Therefore, the purpose of this study was to investigate archery back tension technique for the second ranked archer in the World and to find ways to improve performance. A subject(height: 185cm, mass: 82kg, years: 21yrs, careers: 12yrs) who is a number of national team and the second ranked archer in the World authorized by FITA (Federation Internationale de Trial Arc) was perticipated in this experiment. When shooting 60 shots($12{\times}5$), shooting motions were recorded with 7 infrared cameras and 2 ultrahigh-speed cameras. A QTM and an Auto Track were used to acquire raw data. The sampling rates of both cameras were 200 Hz. and 1000 Hz. respectively and data were filtered using a fourth order Butterworth low pass filtering with a cutoff-frequency of 30Hz. The parameters were calculated with Matlab6.5 and analyzed with SPSS11.0. After Pearson's correlations between 8 parameters were analyzed, 5 parameters from 13parameters that affected records were analyzed with multiple regression analysis (Enter order: x1, x2, x3, x4, x5). The results were as follows: 1. Comparing between parameters according to scores, the patterns of horizontal and vertical angular velocity(av.) of scapular relative angle was different between 8 score and 9 or 10 scores. 2. The correlations of parameters that affected records were a horizontal av.(x1, p=.032<.05) and a vertical av.(x3, p=.033<.05) of scapular from release to delivery in KB back-tension (anchoring-delivery). 3. The decision coefficients(R2) of above two parameters and three parameters selected by experts that may affect record, that is, an absolute trunk angle(x4) from in KKC back-tension (anchoring-release) and a horizontal relative scapular angle(x2) and an absolute trunk angle(x5) from release to delivery in KB back-tension were 7.7%(x1), 0.1%(x2), 8.5%(x3), 0.7%(x4) and 0.9%(x5) in sequence. 4. The multiple regression equation was a y= -1.16E-2 x1 + 0.109 x2 + 3.437E-2 x3 + 6.139E-2 x4 + 0.117 x5 + 3.420 In conclusion, a total contribution was low, that is, R2(17.9%) suggested that on the one hand, Lim's motion may not depend on a certain factor because his postural factors affected shooting motion are some stable on the other hand, unknown factors may exist(e.g. psychological, physiological factors etc.). Further study of EMG patterns of muscles and anatomic consideration related to shoulder girdle and scapular bones may help to identify mechanism of Back-Tension.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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