건강기능식품 중 알로에 베라 겔 제품의 기능성분(지표성분)은 총 다당체로 설정되어 있으며 식품공전 시험법은 페놀황산법에 의하여 총 다당체 함량을 측정하도록 되어 있다. 본 연구에서는 페놀황산 반응에 의한 총 다당체 분석의 분석편차 발생의 주요인으로 파악된 투석단계에 대하여 세부 분석조건(투석막의 너비, 투석외액의 부피와 교체시간, 투석 후 정용여부, 페놀황산 반응시간)에 대한 최적 조건을 설정하였고 이를 토대로 표준화된 시험법을 마련하여 실험자, 실험실의 주관적 설정에 의한 편차발생을 최소화하고자 하였다. 표준화 된 시험법의 검증을 위해 알로에 베라 겔 원료성 분말 및 제품에 대하여 일내(2.56% 이하), 일간(4.85% 이하) 정밀성과 실험실간(5.50% 이하), 실험자간(6.64% 이하) 정밀성을 확인한 결과, 비교적 높은 정밀성을 확보할 수 있었다. 알로에 겔 유통제품에 대한 정밀성에서도 비교적 신뢰할 수 있는 수준(7.08% 이하)의 결과를 확인하였다. 최적화한 표준 시험법에 따른 총 다당체 분석은 알로에 겔 제품 검사의 정밀성을 확보할 수 있을 것으로 평가되었다.
The rice protein profiles of Oryza sativa L (Koshihikari) grown under organic and conventional cultivation regimes were compared on 2-D gels to develop diagnostic marker proteins for organic rice. The selected proteins, differentially expressed between organic and conventional rice, were compared with the differentially expressed proteins of another organic and conventional rice pairing, produced at a different location. In the first comparison among conventional, no-chemical, and organic rice grown in the same region, Korea, 13 proteins exhibiting differential expression in organic and conventionally grown plants were selected. Eight of the 13 proteins were down-regulated, and the 5 remaining proteins were up-regulated from conventional to organic rice. The second comparison pairing from Kyungju, revealed 12 differentially expressed proteins, with 8 down-regulated and 4 up-regulated proteins. Ten of the differentially expressed proteins that overlapped between the two comparison sets could not be clustered into any functional group using a functional annotation clustering tool. Further comparisons using another set of conventional and organic rice, belonging to a different variety of Oryza sativa L and produced in Sanchung, revealed 8 differentially expressed proteins, 5 of which were down-regulated and 3 of which were upregulated in the organic rice. Overall, 3 differentially expressed proteins were commonly found in all three organic rice crops. These 3 proteins, along with other overlapping differentially expressed proteins, can provide a good starting point for the development of signature proteins that can be used for the authentication of organic rice with a follow-up studies with more comparison sets.
Caveolin-1 of the caveolin family of proteins regulates mammary gland development and has been shown to play a contradictory role in breast tumor progression. A specific anti-Caveolin-1 antibody will be useful for functional study of Caveolin-1 in different tissues. In this study, we generated a rabbit polyclonal antibody that specifically recognizes the N-terminal amino acids 50-65 of Caveolin-1. This polyclonal antibody specifically reacted with Caveolin-1 extracted from cells of different species, including human epithelial A431 cells, goat primary mammary epithelial cells and mice fibroblast NIH 3T3 cells, by Western blotting. Endogenous Caveolin-1 protein expressing in cells and normal human tissues was detected by this polyclonal antibody using immunocytofluorescent and immunohistochemical staining, respectively. Furthermore, an apparent decrease in Caveolin-1 expression in tumorous breast and colon tissues was detected by this polyclonal antibody. In conclusion, we have identified amino acids 50-65 of Caveolin-1, which contains an epitope that is specific to Caveolin-1 and is conserved in the human, goat and mouse. In future, this anti-Caveolin-1 antibody can be used to examine the progression of breast and colon cancers and to study functions of Caveolin-1 in human, goat and mouse cells.
A Sulfolobus-E. coli shuttle vector for an efficient expression of the target gene in S. acidocaldarius strain was constructed. The plasmid-based vector pSM21 and its derivative pSM21N were generated based on the pUC18 and Sulfolobus cryptic plasmid pRN1. They carried the S. solfataricus P2 pyrEF gene for the selection marker, a multiple cloning site (MCS) with C-terminal histidine tag, and a constitutive promoter of the S. acidocaldarius gdhA gene for strong expression of the target gene, as well as the pBR322 origin and ampicillin-resistant gene for E. coli propagation. The advantage of pSM21 over other Sulfolobus shuttle vectors is that it contains a MCS and a histidine tag for the simple and easy cloning of a target gene as well as one-step purification by histidine affinity chromatography. For successful expression of the foreign genes, two genes from archaeal origins (PH0193 and Ta0298) were cloned into pSM21N and the functional expression was examined by enzyme activity assay. The recombinant PH0193 was successfully expressed under the control of the gdhA promoter and purified from the cultures by His-tag affinity chromatography. The yield was approximately 1 mg of protein per liter of cultures. The enzyme activity measurements of PH0913 and Ta0298 revealed that both proteins were expressed as an active form in S. acidocaldarius. These results indicate that the pSM21N shuttle vector can be used for the functional expression of foreign archaeal genes that form insoluble aggregates in the E. coli system.
Apolipoprotein (apo) C-III is a marker protein of triacylglycerol (TG)-rich lipoproteins and high-density lipoproteins (HDL), and has been proposed as a risk factor of coronary heart disease. To compare the physiologic role of reconstituted HDL (rHDL) with or without apoC-III, we synthesized rHDL with molar ratios of apoA-I:apoC-III of 1:0, 1:0.5, 1:1, and 1:2. Increasing the apoC-III content in rHDL produced smaller rHDL particles with a lower number of apoA-I molecules. Furthermore, increasing the molar ratio of apoC-III in rHDL enhanced the surfactant-like properties and the ability to lyse dimyristoyl phosphatidylcholine. Furthermore, rHDL containing apoC-III was found to be more resistant to particle rearrangement in the presence of low-density lipoprotein (LDL) than rHDL that contained apoA-I alone. In addition, the lecithin:cholesterol acyltransferase (LCAT) activation ability was reduced as the apoC-III content of the rHDL increased; however, the CE transfer ability was not decreased by the increase of apoC-III. Finally, rHDL containing apoC-III aggravated the production of MDA in cell culture media, which led to increased cellular uptake of LDL. Thus, the addition of apoC-III to rHDL induced changes in the structural and functional properties of the rHDL, especially in particle size and rearrangement and LCAT activation. These alterations may lead to beneficial functions of HDL, which is involved in anti-atherogenic properties in the circulation.
Objectives : Cerebral laterality is thought to be an important marker for neurodevelopment. Prenatal testosterone could influence both cerebral laterality and 2nd to 4th finger length ratio(2D : 4D). EEG coherence and 2D : 4D were examined to investigate the relationship between prenatal testosterone level and cerebral laterality. Methods : EEG was recorded in 24 healthy subjects in the eyes closed resting state. Differences in 2D : 4D finger ratio were used to discriminate "masculine finger type" and "feminine finger type" groups. The 2D : 4D ratio was lower and greater than one for the "masculine finger type" group and "feminine finger type" group, respectively. We used coherence analysis to estimate the cortical functional connectivity. Results : There were statistically meaningful relationships among cerebral functional connectivity, sex and finger ratio. Man and masculine finger type group showed higher intra-hemispheric coherence than those of woman and feminine finger type group. Woman and feminine finger type group showed higher inter-hemispheric coherence than those of man and masculine finger type group. Conclusions : These results imply that prenatal testosterone might act as important determinants of cerebral laterality. Further examination of the relationship between 2D : 4D and EEG coherence in schizophrenia could give some clues for the neurodevelopmental hypothesis of schizophrenia genesis.
Studies to detect genes responsible for economic traits in farm animals have been performed using parametric linear models. A non-parametric, model-free approach using the 'expanded multifactor-dimensionality reduction (MDR) method' considering high dimensionalities of interaction effects between multiple single nucleotide polymorphisms (SNPs), was applied to identify interaction effects of SNPs responsible for carcass traits in a Hanwoo beef cattle population. Data were obtained from the Hanwoo Improvement Center, National Agricultural Cooperation Federation, Korea, and comprised 299 steers from 16 paternal half-sib proven sires that were delivered in Namwon or Daegwanryong livestock testing stations between spring of 2002 and fall of 2003. For each steer at approximately 722 days of age, the Longssimus dorsi muscle area (LMA) was measured after slaughter. Three functional SNPs (19_1, 18_4, 28_2) near the microsatellite marker ILSTS035 on BTA6, around which the QTL for meat quality were previously detected, were assessed. Application of the expanded MDR method revealed the best model with an interaction effect between the SNPs 19_1 and 28_2, while only one main effect of SNP19_1 was statistically significant for LMA (p<0.01) under a general linear mixed model. Our results suggest that the expanded MDR method better identifies interaction effects between multiple genes that are related to polygenic traits, and that the method is an alternative to the current model choices to find associations of multiple functional SNPs and/or their interaction effects with economic traits in livestock populations.
Bang, Minji;Kim, Do Gyeong;Gonzales, Edson Luck;Kwon, Kyoung Ja;Shin, Chan Young
Biomolecules & Therapeutics
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제27권6호
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pp.530-539
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2019
Brain aging is an inevitable process characterized by structural and functional changes and is a major risk factor for neurodegenerative diseases. Most brain aging studies are focused on neurons and less on astrocytes which are the most abundant cells in the brain known to be in charge of various functions including the maintenance of brain physical formation, ion homeostasis, and secretion of various extracellular matrix proteins. Altered mitochondrial dynamics, defective mitophagy or mitochondrial damages are causative factors of mitochondrial dysfunction, which is linked to age-related disorders. Etoposide is an anti-cancer reagent which can induce DNA stress and cellular senescence of cancer cell lines. In this study, we investigated whether etoposide induces senescence and functional alterations in cultured rat astrocytes. Senescence-associated ${\beta}$-galactosidase (SA-${\beta}$-gal) activity was used as a cellular senescence marker. The results indicated that etoposide-treated astrocytes showed cellular senescence phenotypes including increased SA-${\beta}$-gal-positive cells number, increased nuclear size and increased senescence-associated secretory phenotypes (SASP) such as IL-6. We also observed a decreased expression of cell cycle markers, including PhosphoHistone H3/Histone H3 and CDK2, and dysregulation of cellular functions based on wound-healing, neuronal protection, and phagocytosis assays. Finally, mitochondrial dysfunction was noted through the determination of mitochondrial membrane potential using tetramethylrhodamine methyl ester (TMRM) and the measurement of mitochondrial oxygen consumption rate (OCR). These data suggest that etoposide can induce cellular senescence and mitochondrial dysfunction in astrocytes which may have implications in brain aging and neurodegenerative conditions.
본 연구의 목적은 인솔구두의 굽 높이에 따른 평발을 가진 20대 대학생의 보행 시 발목관절의 각도변화에 대해 융복합적 비교를 하는 것이다. 15명의 대학생을 대상으로 동작분석기(Qualisys Track Manager)를 이용하였다. 인솔이 장착된 기능성 구두를 제작하고, 구두의 굽 높이를 0cm, 3cm와 7cm로 셋팅하였다. 실험대상자들은 두 개의 굽 높이가 있는 구두를 신고 발목관절의 측면에 반사마커를 부착하여 보행을 실시하였다. 보행입각기에서 발목관절의 각도변화를 측정하였다. 평발을 가진 실험대상자가 인솔구두를 착용 시 구두 굽 높이가 높을수록 양측의 Heel strike, Foot flat, Midstance, Toe off에서 유의한 감소가 나타났다. 따라서 평발을 가진 대상자는 인솔구두를 착용 시 낮은 구두를 신어야만 발바닥의 피로를 감소시켜 편안한 보행을 할 것으로 사료된다.
Placenta specific 8 (PLAC8, also known as ONZIN) is a multi-functional protein that is highly expressed in the intestine, lung, spleen, and innate immune cells, and is involved in various diseases, including cancers, obesity, and innate immune deficiency. Here, we generated a Plac8 knockout mouse using the CRISPR/Cas9 system. The Cas9 mRNA and two single guide RNAs targeting a region near the translation start codon at Plac8 exon 2 were microinjected into mouse zygotes. This successfully eliminated the conventional translation start site, as confirmed by Sanger sequencing and PCR genotyping analysis. Unlike the previous Plac8 deficient models displaying increased adipose tissue and body weights, our male Plac8 knockout mice showed rather lower body weight than sex-matched littermate controls, though the only difference between these two mouse models is genetic context. Differently from the previously constructed embryonic stem cell-derived Plac8 knockout mouse that contains a neomycin resistance cassette, this knockout mouse model is free from a negative selection marker or other external insertions, which will be useful in future studies aimed at elucidating the multi-functional and physiological roles of PLAC8 in various diseases, without interference from exogenous foreign DNA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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