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사람 핵DNA로부터 FosB 유전자 프로모터 클로닝 및 활성도 분석 (Cloning and Activity Analysis of the FosB Promoter Region from Human Genomic DNA)

  • 나한흠;강윤성;김근철
    • 생명과학회지
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    • 제27권8호
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    • pp.857-863
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    • 2017
  • FosB (FBJ murine osteosarcoma viral oncogene homolog B) 유전자는 사람의 19번 염색체에 위치하고 있으며 약 43 KD의 단백질을 코딩하며, 발생 및 분화과정, 개체 유지, 발병 진행 등을 조절한다고 알려져 왔다. 본 연구에서는 바이오 마커 등의 가능성이 있다고 보고된 FosB 유전자의 프로모터를 클로닝하여 활성도를 분석하고자 하였다. FosB genomic DNA 서열을 확인한 결과, TSS upstream 방향의 약 1 Kb 안쪽 부위에 FosB 유전자 발현을 위한 중요한 요소들이 있을 것으로 추정하였고, 따라서 FosB genomic DNA의 upstream -1,555 부위부터 exon 1의 +73까지 부위에 대한 PCR 증폭을 수행하였다. 또한 클로닝 성공을 높이기 위하여 일차로 $TA-1^{st}FosBp$ plasmid를 얻은 후, 다시 $TA-1^{st}FosBp$ plasmid를 template로 Kpn1과 Nhe1 제한 효소 절단부위를 프라이머에 삽입한 후 제작하여 2차 PCR을 수행하였으며, $TA-2^{nd}FosBp$ 플라스미드를 제작한 후 제한 효소로 절단하여 pGL3-luc vector로 subcloning하였다. 제작된 pGL3-FosBp-luc를 이용하여 항암제에 대한 활성도를 분석하고자 A549 사람 폐암세포주에 pGL3-FosBp-luc 플라스미드를 transfection 한 후 luciferase 활성도 분석을 수행하였다. Luciferase 활성도 증가는 doxorubicin, taxol 등을 처리한 후 단백질 발현 양상과 비교 하였을 때도 일치되는 결과를 얻을 수 있었다. 그러므로 FosB프로모터 클로닝은 향후 유전자 발현 연구, 마커분석 등에 유용할 것으로 사료된다.

A Brief Introduction to the Transduction of Neural Activity into Fos Signal

  • Chung, Leeyup
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제19권2호
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    • pp.61-67
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    • 2015
  • The immediate early gene c-fos has long been known as a molecular marker of neural activity. The neuron's activity is transformed into intracellular calcium influx through NMDA receptors and L-type voltage sensitive calcium channels. For the transcription of c-fos, neural activity should be strong enough to activate mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway which shows low calcium sensitivity. Upon translation, the auto-inhibition by Fos protein regulates basal Fos expression. The pattern of external stimuli and the valence of the stimulus to the animal change Fos signal, thus the signal reflects learning and memory aspects. Understanding the features of multiple components regulating Fos signaling is necessary for the optimal generation and interpretation of Fos signal.

섬유성 이형성증 및 골섬유성 이형성증에서의 c-fos 단백 발현 (Expression of c-fos Protein in Fibrous Dysplasia and Osteofibrous Dysplasia)

  • 박혜림;박용구;김덕환
    • 대한골관절종양학회지
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    • 제5권4호
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    • pp.216-220
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    • 1999
  • The purpose of this study was to evaluate the role of c-fos oncogenes in the development of fibrous dysplasia and osteofibrous dysplasia. The immunohistochemical expression of c-fos protein was evaluated in 15 cases of fibrous dysplasia and 8 cases of osteofibrous dysplasia. Ten cases of fibrous dysplasia were weakly positive with c-fos. Six cases of osteofibrous dysplasia were weakly positive and the remaining two cases were strongly positive. The overall expression of c-fos protein is weaker than high-grade osteosarcoma, thus the implication of c-fos protein is little in the development of these tumors. Fibrous dysplasia and osteofibrous dysplasia share some features of characteristic histology and c-fos expression.

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무선 센서 네트워크의 데이터 전송 특성을 고려한 효율적인 플러딩 기법 (Efficient Flooding Mechanisms with Considering Data Transmission Characteristics of the Wireless Sensor Network)

  • 안상현;임유진;김만희
    • 정보처리학회논문지C
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    • 제16C권2호
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    • pp.209-216
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    • 2009
  • 무선 센서 네트워크에서는 질의 분배(dissemination)나 이벤트 광고를 위해 플러딩이 요구된다. Simple(또는 blind) 플러딩은 폭주(implosion) 문제와 겹침(overlap) 문제를 야기하며, 따라서 simple 플러딩은 센서 네트워크의 수명을 감소시킬 수 있다. 따라서 본 논문에서는 플러딩 오버헤드를 줄이기 위해 플러딩 오버레이 구조(Flooding Overlay Structure; FOS)를 제안한다. 두 종류의 FOS 기법인 중앙형 FOS(Centralized FOS; CFOS)와 분산형 FOS(Distributed FOS; DFOS)를 제안하며, CFOS에서는 싱크가 네트워크 토폴로지 정보를 수집해서 그 정보를 기반으로 포워딩 노드를 선택하는 반면, DFOS에서는 각 센서 노드가 자신의 로컬 정보를 기반으로 자신이 브로드캐스트 패킷의 포워딩에 참여할지 여부를 결정한다. 제안한 FOS 기법들의 성능 분석을 위해 NS-2 기반의 시뮬레이션을 수행했으며, FOS 기법들과 simple 플러딩 및 gossiping의 성능을 비교했다. 시뮬레이션 결과, 제안한 FOS 기법들이 네트워크 수명 측면에서 simple 플러딩보다, 데이터 전달율 측면에서 gossiping보다 우수함을 알 수 있었다.

암종양유전자 SETDB1과 FosB 발현에 대한 p53의 음성 조절기작 (Negative Regulation of Tumor Suppressor p53 at the Promoter Regions of Oncogenic SETDB1 and FosB Genes)

  • 윤현지;나한흠;김근철
    • 생명과학회지
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    • 제30권12호
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    • pp.1070-1077
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    • 2020
  • 암세포에 항암제를 처리하게 되면, 세포증식, 이동성 또는 약물 내성과 관련된 많은 유전자들의 발현 변화가 발생하며, 유전자 발현 변화는 상호간의 조절 네트워크에 의해 밀접하게 연결될 수도 있다고 추측된다. 본 연구에서 p53 유전자 유무가 다른 A549와 H1299 인간 폐암세포에 독소루비신을 처리하면, 원종양유전자인 FosB의 발현은 증가하지만, 원종양유전자인 SETDB1의 발현은 감소하지만, 단백질 발현의 양적인 차이가 발생한다는 사실을 알 수 있었다. TF motif binding 분석 프로그램을 이용하여 SETDB1과 FosB 프로모터지역에서의 p53단백질의 결합가능성을 분석한 결과, SETDB1의 경우 18부위, FosB의 경우 21 부위의 p53 결합부위를 예측할 수 있었다. SETDB1과 FosB 프로모터의 subcloning하여 luciferase 분석을 수행한 결과, p53은 SETDB1과 FosB을 음성적으로 조절한다는 사실을 알 수 있었다. 또한, H1299 세포에 p53의 과발현은 SETDB1 과 FosB의 발현을 감소시킬 수 있음을 RT-PCR, western blot, qPCR, 면역염색 실험을 통해 확인하였다. 이러한 결과를 종합하여 본다면, p53에 의한 SETDB1과 FosB 유전자 발현 조절은 항암제 처리과정에서 나타나는 암세포의 사멸과 생존에 대한 기능적 조절 네트워크로 사료된다.

흰쥐의 발바닥 절개 통증모형에서 척수 후각의 c-fos 발현 (Spinal c-fos Expression in a Rat Model of Incisional Pain)

  • 김학송;윤명하;최정일;배춘상
    • The Korean Journal of Pain
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    • 제14권2호
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    • pp.142-149
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    • 2001
  • Background: The expression of the proto-oncogene c-fos in spinal cord neurons following various noxious stimuli has been demonstrated in numerous studies. However, the pattern of expression of c-fos after incisional stimulus has not been evaluated. This study was designed to examine c-fos expression in an incisional pain model of rats. Methods: A 1 cm longitudinal incision was made through the skin, fascia and muscle of the plantar aspect of the hindpaw in enflurane-anesthetized rats. Withdrawal responses were measured using von Frey filaments at areas around the wound before surgery and for the next 48 hours. The expression of c-fos protein in the lumbar spinal cord was examined by immunohistochemistry. Results: After incision, c-fos was strongly expressed within laminae I, II, III, IV, V and VI ipsilateral to the incision. C-fos positive neurons were detected in the controlateral site, as well. Conclusions: These studies suggest that spinal c-fos protein may not be used as a specific marker for spinal nociceptive processing in an incisional pain model.

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SETDB1 mediated FosB expression increases the cell proliferation rate during anticancer drug therapy

  • Na, Han-Heom;Noh, Hee-Jung;Cheong, Hyang-Min;Kang, Yoonsung;Kim, Keun-Cheol
    • BMB Reports
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    • 제49권4호
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    • pp.238-243
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    • 2016
  • The efficacy of anticancer drugs depends on a variety of signaling pathways, which can be positively or negatively regulated. In this study, we show that SETDB1 HMTase is down-regulated at the transcriptional level by several anticancer drugs, due to its inherent instability. Using RNA sequence analysis, we identified FosB as being regulated by SETDB1 during anticancer drug therapy. FosB expression was increased by treatment with doxorubicin, taxol and siSETDB1. Moreover, FosB was associated with an increased rate of proliferation. Combinatory transfection of siFosB and siSETDB1 was slightly increased compared to transfection of siFosB. Furthermore, FosB was regulated by multiple kinase pathways. ChIP analysis showed that SETDB1 and H3K9me3 interact with a specific region of the FosB promoter. These results suggest that SETDB1-mediated FosB expression is a common molecular phenomenon, and might be a novel pathway responsible for the increase in cell proliferation that frequently occurs during anticancer drug therapy.

인삼(人蔘) 약침(藥鍼)이 에탄올 중독 흰쥐의 해마에서 c-fos 생성에 미치는 영향 (Effects of Panax ginseng Radix herb-acupuncture on c-fos expression in the hippocampus of ethanol-intoxicated Sprague-Dawley rats)

  • 김민수;이은용
    • Journal of Acupuncture Research
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    • 제20권3호
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    • pp.131-140
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    • 2003
  • Objective : The purpose of this study is to investigate the effect of Panax ginseng Radix herb-acupuncture on c-fos expression in each area of the hippocampus of acutely ethanol-intoxicated rats. Methods : Twenty-four male Sprague-Dawley tats were divided into untreated(normal), ethanol-treated(control), Panax ginseng Radix-treated(sample A), ethanol-and Panax gingseng Radix-treated(sample B) groups. Each group was evaluated by the changes of c-fos-positive neurons in each area of the hippocampus by using and image analyzer and microscope. Results : 1. In the CA1 area, the number of c-fos-positive neurons in the control group was diminished compared with the normal group. The number of c-fos-positive neurons in the sample B group had no marked difference from the control group. 2. In the CA2-3 area, the number of c-fos-positive neurons in the control group was diminished compared with the normal group, The number of c-fos-positive neurons in the sample B group was increased compared with the control group. 3. In the Dentate gyrus area, the number of c-fos-positive neurons in the control group was diminished compared with the normal group. The number of c-fos-positive neurons in the sample B group was increased compared with the control group. Conclusions : These results indicate that, c-fos expression in each area of the hippocampus was reduced in ethanol-intoxicated group. Treatment of Panax ginseng Radix herb-acupuncture increased this diminution. Panax ginseng Radix could be able to effect on the prevention of the amnesia and learning disability in alcoholism.

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골육종의 c-fos 발현에 관한 면역조직화학적 검색 (Immunohistochemical c-fos Expression in Osteosarcoma)

  • 박용구;박혜림
    • 대한골관절종양학회지
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    • 제5권3호
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    • pp.162-168
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    • 1999
  • c-fos와 c-jun은 암 유전자의 하나이며, 이 유전자의 단백질 산물은 여러 가지의 다른 활성화 단백 (activator protein 1, AP-1)으로 골 종양에서 골세포의 증식과 분화를 조절하는 중요한 역할을 하는 인자 중 하나로 알려져 있다. 본 연구에서는 단클론 항체를 이용하여 포르말린에 고정된 파라핀 포매조직을 이용하여 35례의 사람 골육종에서 c-fos 단백의 발현을 연구하였다. c-fos의 발현은 골 형성 병변에서 주로 발현되며, 저등급의 연골형성 병변에서는 발현이 관찰되지 않았다. 높은 빈도의 c-fos 단백의 발현이 골아성 골육종에서 발현되었으나 (17례 중 13례에서 1등급 내지 2등급으로 발현), 2례의 연골형성 골육종, 1례의 섬유아세포성 골육종, 2례의 방골성 골육종에서는 음성으로 나타났다. 2례의 혈관확장성 골육종에서는 양성으로 c-fos 단백의 발현되었다. 비록 조직학적으로 고등급의 골육종에서 면역조직화학적 염색상 고 빈도의 c-fos 단백의 발현이 관찰되나, 조직학적 등급과, 면역염색상 발현사이에 통계적인 유의성은 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 c-fos 단백이 골육종의 발생에 관여할 것으로 추론되며, 저등급의 연골형성 육종에 이 단백의 역할에는 추후 연구가 필요할 것으로 사료된다.

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프락토 올리고당과 프락토 올리고당을 함유한 스폰지 케?이 흰쥐의 혈청지질과 장기능 및 단쇄지방산 생성에 미치는 효과

  • 이선영;조정화;이경애
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제36권4호
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    • pp.344-351
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    • 2003
  • The purpose of this study was to elucidate effects of fructooligosaccharide on gastrointestinal tract and blood lipids of rats when this was supplied as purchased condition or oligosaccharide containing sponge cake. Male Sprague-Dawley rats were assigned to one of 3 treatments 1) control diet 2) 7.5% fructooligosaccharide containing diet (FOS diet) 3) lyophilized sponge cake powder containing diet (FOS-C diet). The sponge cake was made with fractooligosaccharide which replaced 40% of its surose, and the final concentration of fructooligosaccharide in FOS-C diet was 7.5%. Cecal and fecal water contents, amount of cecal content, and cecal wall weight were higher from fructooligosaccharide consumption, whereas total gut transit time was longer in rats consuming fructooligosaccharide compared with those fed control diet. Cecal and fecal pH were lower in FOS and FOS-C groups than in control group. Total cecal SCFA pools were higher from ingesting fructooligosaccharide containing diets compared with control diet. Serum triglyceride levels were lower in rats fed FOS and FOS-C diet than those fed control diet, while serum cholesterol levels were unaffected by treatment. Therefore the effects of fructooligosaccharide in sponge cake on serum lipids and gastrointestinal tract were similar to those of intact fructooligosaccharide. Also, adding 7.5% of FOS accompanied diarrhea symptom which suggests some precaution are needed when using FOS.