Nooranizadeh, MH;Mogheiseh, A;Kafi, M;Sepehrimanesh, M;Vaseghi, H
Laboraroty Animal Research
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제34권4호
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pp.211-215
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2018
The following experiments were designed to examine the effect of serum of spayed dogs on superovulation response in mice and rats. In Experiment 1, female mice at diestrus (n=30) were divided into three equal groups and superovulated with either administration of 5 IU pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) or recombinant follicle stimulating hormone (rFSH) (reducing dose from 2.5 to 0.5 IU) and 5 IU human chorionic gonadotropin (hCG) administered 48h later. Serum of spayed dogs was administered intraperitoneally at a reduced dose from 0.1 to 0.025 mL in a 48 h period. In Experiment 2, female rats (n=30) at diestrus stage were divided into three equal groups. Superovulation was induced using either 30 IU PMSG, or a dose reduced from 5 to 1 IU rFSH and 25 IU hCG administered 48h later. Serum of spayed dogs was administered in a reduced dose from 0.6 to 0.1 mL in a 48 hour period. Female mice and rats were mated 24 h following hCG administration. On day 14 after mating, animals were euthanized and ovarian sections were fixed for histopathological evaluation and corpus luteum (CL) counting. No significant difference observed in mean (${\pm}SEM$) number of CLs between the PMSG group and the mice that received serum of spayed dog ($10.4{\pm}1.3$ vs $9.2{\pm}1.0$). Mean (${\pm}SEM$) number of CLs tended to be lower in rats that received serum of spayed dog than those of rats which received either PMSG or rFSH ($15.1{\pm}1.9$ vs $23.6{\pm}3.1$ and $23.1{\pm}2.9$, P=0.06, respectively). In conclusion, serum of spayed dogs is able to induce a superovulatory response in mice and rats.
We present data from three Caucasian men with Zinner syndrome who attended our center for the treatment of primary couple's infertility. Each patient was scheduled for conventional testicular sperm extraction (cTESE) and cryopreservation. Sperm analysis confirmed absolute azoospermia. Patient 1 had right and left testis volumes of 24 mL and 23 mL, respectively; left seminal vesicle (SV) agenesis, severe right SV hypotrophy with right renal agenesis. Follicle-stimulating hormone (FSH) was 3.2 IU/L. Patient 2 exhibited right and left testis volumes of 18 mL and 16 mL, respectively; a left SV cyst of 32 × 28 mm, ipsilateral kidney absence, and right SV agenesis. FSH was 2.8 IU/L. Patient 3 showed a testicular volume of 10 mL bilaterally, a 65 × 46 mm left SV cyst, right SV enlargement, and left kidney agenesis. FSH was 32.0 IU/L. Sperm retrieval was successful in all patients. Nevertheless, cTESE should be performed on the day of oocyte retrieval.
Objectives: The purpose of this study is to assess the efficacy of Jibaekjihwang-hwan and Daeboeum-hwan combination therapy for the treatment of precocious puberty. Methods: 6 databases were searched from the date of inception until April 2021 for relevant studies. We included randomized controlled trials (RCTs) and non-randomized controlled trials (nRCTs) which focused on effects of Jibaekjihwang-hwan and Daeboeum-hwan on precocious puberty. Results: Total 8 literatures were included in qualitative analysis and meta analysis on results was conducted on 4 synthesizable studies. The response rate was significantly higher in Jibaekjihwang-hwan and Daeboeum-hwan combination group than in conventional therapy group. Also, serum estradiol and follicle stimulating hormone (FSH) level were significantly lower in Jibaekjihwang-hwan and Daeboeum-hwan combination group than in conventional therapy group. Conclusions: It seems that combination therapy of Jibaekjihwang-hwan and Daeboeum-hwan can effectively reduce serum estradiol and FSH level while increasing response rate significantly. Further high quality studies are needed to supplement the efficacy and safety of combination therapy of Jibaekjihwang-hwan and Daeboeum-hwan on precocious puberty.
Ji-Eun Park;Seung Gee Lee;Seung-Jin Lee;Wook-Joon Yu;Jong-Min Kim
한국발생생물학회지:발생과생식
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제27권4호
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pp.185-193
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2023
Although increasing evidence of cause-and-effect relationship between BPA exposure and female reproductive disorders have been suggested through many studies, the precise biochemical and molecular mechanism(s) by which BPA interferes with steroidogenesis in the ovarian cells still remain unclear. Therefore, the purpose of this study was to discover the steroidogenic biomarker(s) associated with BPA treatment in human granulosa cell line, KGN. In this study, our results obtained via the analysis of steroidogenesis-related protein expression in KGN cells using quantitative polymerase chain reaction (qPCR) and western blot analyses revealed that the expression levels of steroidogenic acute regulatory (StAR) and aromatase decreased considerably and gradually after BPA treatment in a dose-dependent manner under BPA treatment. Further, remarkable decreases in their expression levels at the cellular levels were also confirmed via immunocytochemistry, and subsequent StAR and aromatase mRNA expression levels showed profiles similar to those observed for their proteins, i.e., both StAR and aromatase mRNA expression levels were significantly decreased under BPA treatment at concentrations ≥0.1 μM. We observed that follicle stimulating hormone upregulated StAR and aromatase protein expression levels; however, this effect was suppressed in the presence of BPA. Regarding the steroidogenic effects of BPA on KGN cells, controversies remain regarding the ultimate outcomes. Nevertheless, we believe that the results here presented imply that KGN cells have a good cellular and steroidogenic machinery for evaluating endocrine disruption. Therefore, StAR and aromatase could be stable and sensitive biomarkers in KGN cells for the cellular screening of the potential risk posed by exogenous and environmental chemicals to female reproductive (endocrine) function.
목 적: 본 연구에서는 한국 불임 여성의 난포자극호르몬 수용체 유전자형의 분포 빈도를 파악하고, 체외수정 시술에서 난포자극호르몬 수용체 유전자형에 따른 과배란 유도 과정에서의 난소 반응과 각종 임상 결과와의 관련성을 알아보고자 하였다. 연구방법: 연구대상은 제일병원에 내원한 여성 불임 환자 1, 020명을 대상으로 난포자극호르몬 수용체의 유전자형, 즉 Thr307Ala (T/A)과 Asn680Ser (N/S)을 조사하였으며, 이들 중에서 과배란 유도와 체외수정 및 배아이식술을 시행한 302주기에서의 임상 결과를 이들의 유전자형에 따라 비교하였다. 결 과: 대상 환자에서 난포자극호르몬 수용체의 Thr307Ala와 Asn680Ser의 유전자형 빈도는 TT/NN 군이 44.80% (n=457), TA/NS 군이 41.96% (n=428) 그리고 AA/SS군이 10.49% (n=107)의 분포로 조사되었다. 과배란 유도에서의 각 유전자형에 따른 대상 환자의 나이, 난소 반응에 관련된 사용한 난포자극호르몬의 용량과 이에 따른 혈중 에스트라디올의 농도와 채취된 난자의 수 등에서 통계적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다. 그러나 배아이식 후 AA/SS 유전자형 환자에서의 착상률이 TT/NN에 비해 통계적으로 유의하게 높게 나타났다 (24.5% vs 15.7%, p<0.05) 결 론: 대표적인 세 가지 TT/NN, TA/NS 그리고 AA/SS 유전자형에 따른 과배란 유도에서의 난소 반응은 통계적으로 의미있는 차이를 나타내지 않았다. 그러나 각각의 유전자형에 따라 난소 반응과 임상 결과가 다소 차이가 나타남을 확인할 수 있었으며, 이에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
Chasombat, J.;Nagai, T.;Parnpai, R.;Vongpralub, T.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제26권4호
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pp.488-500
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2013
The objective of this study was to compare the effectiveness of the protocols for superstimulation of follicular growth in Thai native heifers. Heifers (n = 20) were randomly divided into four groups of five heifers/group. Heifers were given a single dose by i.m. administration of 100 mg Follicle Stimulating Hormone dissolved in polyvinylpyrrolidone (FSHp) at 24 h. Ovum pick up (OPU) occurred at 72 h ($F_{24}O_{72}$ protocol; Group 1) or 96 h ($F_{24}O_{96}$ protocol; Group 2), and at 36 h and OPU at 72 h ($F_{36}O_{72}$ protocol; Group 3) or 96 h ($F_{36}O_{96}$ protocol; Group 4) after follicular ablation. The dynamics of ovarian follicular growth were monitored by twice-daily ultrasonographic examinations. Blood sample collections were performed every 12 h after initiation of treatment for assessment of FSH, E2 and P4 profiles. All heifers were subjected to eight repeated sequential sessions of OPU. The follicular deviation commenced $24{\pm}5.32$ h after follicular ablation in all groups. The circulatory FSH surged quickly from 24 to 36 h (>0.8 ng/ml) after follicular ablation and circulatory estrogen levels steadily increased from 36 h until OPU in all groups. At the end of the OPU sessions, the mean number of aspirated follicles/heifer/session in $F_{36}O_{72}$ protocol (Group 3) and $F_{36}O_{96}$ protocol (Group 4) were higher than in the two other groups (p<0.05). The number of cumulus-oocyte complexes (COCs), cleaved and day 8 blastocysts rates in the $F_{36}O_{72}$ protocol (Group 3) were higher than in the other groups (p<0.05). It can be concluded that a single dose i.m. administration of 100 mg FSHp at 36 h and OPU at 72 h after follicular ablation ($F_{36}O_{72}$ protocol; Group 3) was the most effective protocol for superstimulation of follicular growth for repeated OPU and subsequent in vitro embryo production in Thai native heifers.
The objective of this study was to examine the effect of eCG and various concentrations (20, 40, and 80 ${\mu}g/ml$) of porcine FSH on nuclear maturation and intracellular glutathione (GSH) level of oocytes, and embryonic development after parthenogenetic activation (PA) and somatic cell nuclear transfer (SCNT) in pigs. Immature pig oocytes were matured in TCM-199 supplemented with porcine follicular fluid, cysteine, pyruvate, EGF, insulin, and hormones (10 IU/ml hCG and 10 IU/ml eCG or $20{\sim}80{\mu}g/ml$ FSH) for the first 22 h and then further cultured in hormone-tree medium for an additional 22 h. Nuclear maturation of oocytes ($85{\sim}89%$) was not influencem foreCG and various concentrations FSH. Embryonic development to the cleavage stage ($86{\sim}94%$) and mean number of cells in blastocyst ($33{\sim}37$ cells) after PA were not altered but blastocyst formation e-treignificaddlor(p<0.05) improvem forthe supplementation eith 80 ${\mu}g/ml$ FSHr(64%) compared to 47%, io8%, iand 47% in oocytes that were treated with eCG, 20,i and 40 ${\mu}g/ml$ FSH,i numectivelo. In SCNT, fusion ($78{\sim}83%$) of cell-cytoplast couplets and siosequent embryo cleavage ($82{\sim}88%$) were not influencem fordifferent gonadotropins but blastocyst formation tended to increase forthe supplementation eith 80 ${\mu}g/ml$ FSHr(25% vs. $11{\sim}18%$). Our nuults demonstrated that oocyte maturation and embryonic development after PA and SCNT e-frinfluencem fortype of gcem fortype of gits concentration. In this study, supplementation of maturation medium eith 80 ${\mu}g/ml$ FSHrimproved preimplantation development of PA and SCNT pig embryos, probably by increasing intracellular GSH concentration of matured oocytes.
This paper reports 3 cases with 46,XX sex reversed male. Three 46,XX hypogonadal subjects showed complete sex reversal and had normal phallus and azoospermia. We studied them under clinical, cytogenetic and molecular aspects to find out the origin of the sex reversal. Patients had markedly elevated serum follicle-stimulating hormone (FSH) and lutenizing hormone (LH) and decreased or normal range of serum testosterone. The testicular volumes were small (3-8ml). Testicular biopsy showed Leydig cell hyperplasia and atrophy of seminiferous tubules. We obtained the results of normal 46,XX, and the presence of Y chromosome mosaicism was ruled out through XY dual fluorescent in situ hybridization (FISH). By using polymerase chain reaction (PCR), we amplified short arm (SRY, PABY, ZFY and DYS14), centromere (DYZ3), and heterochromatin (DYZ1) region of the Y chromosome. PCR amplification of DNA from these patients showed the presence of the sex-determining region of the Y chromosome (SRY) but didn't show the centromere and heterochromatin region sequence. The SRY gene was detected in all the three patients. Amplification patterns of the other regions were different in these patients; one had four amplified loci (PABY+, SRY+, ZFY+, DYS14+), another had two loci (SRY+, ZFY+) and the other had two loci (PABY+, SRY+). We have found that each patient's translocation elements had different breakpoints at upstream and downstream of the SRY gene region. We conclude that the testicular development in 46,XX male patients were due to insertion or translocation of SRY gene into X chromosome or autosomes.
생쥐 난자-난구 복합체를 인공배양하면서 adenylate cyclase의 촉진제인 forskilin과 phosphodiesterase의 저해제인 3-isobutyl-1-methylxanthine(IBMX)을 배양액에 첨가하여 이들이 난구세포의 분산과 난자의 성숙(핵붕괴)에 미치는 효과를 관찰한 결과 다음과 같았다. 1. Forskilin은 0.001$\mu$M에서 부터 난구세포의 분산을 유도하기 시작하여 (36%) 0.1-10$\mu$M 구간에서 최대의 분산율을 나타내었고 (80-90%) 100$\mu$M에서는 그 효과가 줄어들었다(60%). 이때 난자의 핵 붕괴는 10$\mu$M까지 정상으로 일어나다 (75-80%) 100$\mu$M에서 부분적으로 억제되기 시작하였다(40%). 2. IMBX는 0.01$\mu$M에서 부터 난구세포의 분산을 유도하기 시작하여 (30%) 1-1,000$\mu$M의 전 구간에서 최대의 분산율(81-89%)을 나타내었다. 난자들은 10$\mu$M의 농도까지 정상적으로 핵 붕괴를 일으키었으나(90% 이상) 100$\mu$M 이상에서 급격히 억제되었다(14%). 3. 난구세포의 분산을 유도하는데 필요한 최소의 자극기간을 조사해 본 결과 HCG는 2분, FSH와 forskilin은 15-30분, IBMX는 2시간이었다. 위 결과로 부터 생쥐 난구세포에서 cAMP의 농도를 높이는데 adenylate cyclase 와 phosphodiesterase의 두 효소가 모두 중요한 기여를 하며 난구세포는 단 기간에 생긴 cAMP의 peak로서 분산이 유도될 수 있으나 난자의 성숙억제 과정에서는 지속적인 cAMP의 존재가 필요하다는 것을 알았다.
It is well known that the clinical test for responsibility of accurate fertilization capacity in male partners is very important to diagnose and treat the infertility. However, it has been reported that the traditional semen analysis cannot accurately predict fertilization and pregnancy potential. The present study was performed to evaluate the acrosomal reaction to ionophore challenge (ARIC) test as a prognostic indicator for fertilization of sperm and oocyte in an in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) program. From March 1996 to Februry 1997, 30 couples undergoing IVF program were allocated to this study group. All female partners in the study group were 35 years old or less and their serum level of basal follicle stimulating hormone (FSH) and estradiol $(E_2)$ were normal. All the male partners have normal parameters of semen analysis. The ARIC tests were performed on the day of ovum pick up and in vitro insemination in all the male partners. The controlled ovarian hyperstimulation (COH) using luteal long protocol of gonadotropin releasing hormone (GnRH) agonist was used in all couples for IVF-ET. The acrosomal reaction with $10{\mu}l$ of 10% DMSO was induced spontaneously in $10.1{\pm}9.8%$, and acrosomal reaction with calcium ionophore A 23187 was induced in $27.4{\pm}18.1%$, and the ARIC value was $17.4{\pm}16.2%$. There were no significant correlation between the ARIC value and the fertilization rate ($r^2$=0.044, p=0.268). There were also no significant correlation between the ARIC value and the percentage of the grade I, II embryos ($r^2$=0.046, p=0.261). On the basis of above results, it was suggested that ARIC test might not be a useful prognostic indicator for fertilization in IVF-ET in male partners with normal parameters of conventional semen analysis. We guessed that IVF-ET could be performed to the patients primarily without universal appilcation of ARIC test to all male partenrs, and if fertilization failure occurs, the micro assisted fertilization (MAF) such as intracytoplsmic sperm injection (ICSI) might be used as an alternative mode of treatment with acceptable success rate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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