• 제목/요약/키워드: Fluorescence loss

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Investigation on the Effects of Three X${\rightarrow}$Histidine Replacements on Thermostability of ${\alpha}$-Amylase from Bacillus amyloliquefaciens

  • Haghani, Karimeh;Khajeh, Khosro;Naderi-Manesh, Hossein;Ranjbar, Bijan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제22권5호
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    • pp.592-599
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    • 2012
  • Bacillus licheniformis ${\alpha}$-amylase (BLA), a thermophilic counterpart of Bacillus amyloliquefaciens ${\alpha}$-amylase (BAA), is an appropriate model for the design of stabilizing mutations in BAA. BLA has 10 more histidines than BAA. Considering this prominent difference, in the present study, three out of these positions (I34, Q67, and P407; located in the thermostability determinant 1 region and Ca-III binding site of BAA) were replaced with histidine in BAA, using the site-directed mutagenesis technique. The results showed that the thermostability of P407H and Q67H mutants had increased, but no significant changes were observed in their kinetic parameters compared to that of the wild type. I34H replacement resulted in complete loss of enzyme activity. Moreover, fluorescence and circular dichroism data indicated a more rigid structure for the P407H variant compared with that of the wild-type BAA. However, the flexibility of Q67H and I34H mutants increased in comparison with that of wild-type enzyme.

Fast High-throughput Screening of the H1N1 Virus by Parallel Detection with Multi-channel Microchip Electrophoresis

  • Zhang, Peng;Park, Guenyoung;Kang, Seong Ho
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제35권4호
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    • pp.1082-1086
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    • 2014
  • A multi-channel microchip electrophoresis (MCME) method with parallel laser-induced fluorescence (LIF) detection was developed for rapid screening of H1N1 virus. The hemagglutinin (HA) and nucleocapsid protein (NP) gene of H1N1 virus were amplified using polymerase chain reaction (PCR). The amplified PCR products of the H1N1 virus DNA (HA, 116 bp and NP, 195 bp) were simultaneously detected within 25 s in three parallel channels using an expanded laser beam and a charge-coupled device camera. The parallel separations were demonstrated using a sieving gel matrix of 0.3% poly(ethylene oxide) ($M_r$ = 8,000,000) in $1{\times}$ TBE buffer (pH 8.4) with a programmed step electric field strength (PSEFS). The method was ~20 times faster than conventional slab gel electrophoresis, without any loss of resolving power or reproducibility. The proposed MCME/PSEFS assay technique provides a simple and accurate method for fast high-throughput screening of infectious virus DNA molecules under 400 bp.

Efficient Complex Surfactants from the Type of Fatty Acids as Corrosion Inhibitors for Mild Steel C1018 in CO2-Environments

  • Abbasov, Vagif M.;El-Lateef, Hany M. Abd;Aliyeva, Leylufer I.;Ismayilov, Ismayil T.;Qasimov, Elmar E.;Narmin, Mamedova M.
    • 대한화학회지
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    • 제57권1호
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    • pp.25-34
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    • 2013
  • The efficiency of three complex surfactants based on sunflower oil and nitrogen containing compounds as corrosion inhibitors for mild steel in $CO_2$-saturated 1% NaCl solution, has been determined by weight loss and LPR corrosion rate measurements. These compounds inhibit corrosion even at very low concentrations. The inhibition process was attributed to the formation of an adsorbed film on the metal surface that protects the metal against corrosive media. The inhibition efficiency increases with increasing the concentration of the studied inhibitors. Maximum inhibition efficiency of the surfactants is observed at concentrations around its critical micellar concentration (CMC). Adsorption of complex surfactants on the mild steel surface is in agreement with the Langmuir adsorption isotherm model, and the calculated Gibbs free energy values confirm the chemical nature of the adsorption. Energy dispersive X-ray fluorescence microscopy (EDRF) observations of the electrode surface confirmed the existence of such an adsorbed film.

부력제트의 주위공기 유입효과 및 등온기체 모델링 (Jet Entrainment Effect in Buoyant Jet and Iso-Thermal Fire Modeling)

  • 이의주
    • 한국화재소방학회논문지
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    • 제23권6호
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    • pp.111-115
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    • 2009
  • 아세톤 LIF와 Rayleigh 산란법 등 두 가지 레이저 측정 기법을 이용하여 Re수가 1,000 미만의 부력제트 노즐근처에서의 공기 유입을 실험적으로 조사하였다. 아세톤 LIF 실험결과 전체적인 혼합기구는 경계면에서의 불안정성에 의한 거대와구조로 판단되고, Re 수가 커질수록 유입되는 시점이 상류로 이동하며 그 양 또한 증가되었다. 또한 Rayleigh 산란법 결과는 상류에서도 혼합이 제트의 내부까지 이루어지고, 노즐에서 분사방향으로 진행할수록 주위공기의 유입이 제트 내부로 진행되고 있음을 알 수 있다. 이 실험결과로서 기존 등온기체모델에서 제트의 주위공기 유입을 고려하여야 한다는 사실을 입증할 수 있다. 또한, 이상적 플룸식에서 복사열손실을 0.35로 고려하였을 경우에 기존의 연기량 및 온도 예측과 근사한 결과를 얻을 수 있으며, 주위공기 유입효과를 고려하여 보다 간단하면서 정확한 등온기체 모델링 방법을 얻을 수 있다.

Processing Characteristics of Freeze-Dried Pork Powder for Meat Emulsion Gel

  • Lee, Seonmin;Choi, Yun-Sang;Jo, Kyung;Jeong, Hyun Gyung;Yong, Hae In;Kim, Tae-Kyung;Jung, Samooel
    • 한국축산식품학회지
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    • 제41권6호
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    • pp.997-1011
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    • 2021
  • The processing characteristics of freeze-dried pork powder as raw meat for comminuted meat products were compared with those of freeze-thawed pork. The tertiary structural properties, oxidation, and solubility of proteins in the freeze-dried pork powder were investigated. In addition, the properties of the emulsion gels manufactured with freeze-dried pork powder (GFD) and freeze-thawed pork (GFT) at 1.5% and 2.0% NaCl were evaluated. The surface hydrophobicity and intrinsic tryptophan fluorescence intensity of myofibrillar proteins between the freeze-dried pork powder and freeze-thawed pork were similar. However, freeze-dried pork powder had higher carbonyl compounds and lower solubility of sarcoplasmic and myofibrillar proteins than freeze-thawed pork (p<0.05). GFD had higher cooking loss than GFT in 2.0% NaCl, and lower hardness and a* value of GFD were observed regardless of NaCl level (p<0.05). Moreover, GFD had higher malondialdehyde content than GFT at the two NaCl concentrations (p<0.05). Therefore, our study demonstrated that freeze-dried pork powder has lower functional properties than freeze-thawed pork as raw meat for comminuted meat products.

QLF(Quantitative light-induced fluorescence)를 이용한 글라스 아이오노머 수복물의 인접면 우식 재광화 효과에 관한 연구 (REMINERALIZATION EFFECT OF INTERPROXIMAL CARIES ADJACENT TO GLASS IONOMER RESTORATIONS: IN VITRO STUDY USING QLF)

  • 이혁상;현홍근;장기택
    • 대한소아치과학회지
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    • 제38권3호
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    • pp.244-249
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    • 2011
  • 글라스 아이오노머 시멘트는 초기 우식 치질에 재광화 효과가 있다고 알려져 있다. 본 연구에서는 시판되고 있는 세 가지 종류의 글라스 아이오노머 시멘트(Fuji IX $GP^{TM}$, $Vitremer^{TM}$, $F2000^{TM}$)를 실험군으로, 복합 레진(Filtek $Z250^{TM}$)을 대조군으로 사용하여 3개월간 인접면 우식증에 대한 재광화 효과를 시편의 파괴 없이 1개월 간격으로 QLF로 시편의 상을 얻고, 이렇게 얻은 상의 무기질 소실량(${\Delta}Q$)을 측정하여 ${\Delta}Q$의 변화량을 계산하여 시편의 재광화 정도를 평가하였다. 인접면 수복물은 인공 우식 병소가 있는 치아 시편과 수복재료(세 가지 글라스 아이오노머 및 복합 레진)를 접촉시켜 재현하였고, 이것을 인공 타액에 완전히 잠기도록 하여 pH 7.0, $37^{\circ}C$를 유지하였다. 치아 시편들은 실험 시작 후 30, 60, 90일 뒤에 꺼내어 QLF로 촬영하였다. 얻어진 영상을 QLF를 이용하여 시편 각각의 무기질 소실량(${\Delta}Q$)을 측정하였고, ${\Delta}Q$의 변화량(${\Delta}{\Delta}Q$), 즉 무기질 소실 변화량을 계산하여 얻어진 값을 ANOVA로 분석하고, Dunnett C multiple comparison test로 사후 검정을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 모든 군에서 병소의 무기질 소실량(${\Delta}Q$)이 증가하였다. 2. 무기질 소실량(${\Delta}Q$)의 변화량인 무기실 소실 변화량(${\Delta}{\Delta}Q$)은, 1 개월 후에는 글라스 아이오노머 시멘트가 복합레진에 비해 유의하게 컸으며(p<0.05), 글라스 아이오노머 중에서는 Fuji IX $GP^{TM}$$Vitremer^{TM}$, $F2000^{TM}$에 비해 유의하게 컸다(p<0.05). 2 개월 후에는 Fuji IX $GP^{TM}$가 나머지 군에 비해 ${\Delta}{\Delta}Q$가 유의하게 컸으며(p<0.05), 3 개월 후에는 모든 군간에 ${\Delta}{\Delta}Q$의 유의한 차이가 없었다. 3. 세 가지 글라스 아이오노머 시멘트에서 무기실 소실 변화량(${\Delta}{\Delta}Q$), 즉 재광화 정도는 시간이 지날수록 점차 감소하였다. 4. 대조군인 복합 레진 군에서도 무기실 소실 변화량(${\Delta}{\Delta}Q$)은 증가하였다.

탄산음료 유발 법랑질 침식에 대한 항우식 제품의 예방 효과 (THE PREVENTIVE EFFECT OF COMMERCIALLY AVAILABLE ANTICARIOGENIC PRODUCTS ON ENAMEL EROSION INDUCED BY CARBONATED BEVERAGE IN VITRO)

  • 송주현;김영재;김정욱;장기택;김종철;한세현;이상훈
    • 대한소아치과학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.1-12
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    • 2010
  • 본 연구는 항우식 제품인 Casein phosphopeptide-amorphous calcium phosphate(CPP-ACP)를 포함하는 치아크림, 불소 바니쉬, 저농도 불소 양치액을 치아에 도포하는 것이 단시간 탄산음료에 의한 법랑질의 침식을 예방할 수 있는지 살펴보기 위해 계획되었다. 법랑질 시편에 다음과 같은 항우식 제품을 도포하였고, 인공타액에 24시간 보관한 후, 콜라에 1분 증류수에 1분씩 5회 번갈아 처리하였다. 1군: 대조군(무처치) 2군: CPP-ACP 치아크림군 3군: 불소 바니쉬군(1,000 ppm F) 4군: 저농도 불소 양치액군(227 ppm F) 5군: 불소 바니쉬 + CPP-ACP 치아크림군 6군: 저농도 불소 양치액 + CPP-ACP 치아크림군 미세경도와 침식깊이를 측정하였고, Quantitative light-induced fluorescence(QLF)를 이용하여 안정된 형광 격자에 대한 부피 형광 변화인 ${\Delta}Q$를 측정하여 무기질 감소량을 평가하였다. 6일 동안 실험을 반복하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 미세경도는 1군$\leq$2군$\leq$4군<6군<3군$\fallingdotseq$5군 순이었다. 2. 평균 침식깊이는 5군$\fallingdotseq$3군<6군<4군$\fallingdotseq$2군$\fallingdotseq$1군 순이었다. 3. ${\Delta}Q$는 1군$\fallingdotseq$2군$\leq$4군$\leq$6군$\leq$3군$\fallingdotseq$5군 순이었다. ${\Delta}Q$의 감소율은 1군과 2군, 4군과 6군, 3군과 5군이 각각 유사하였다. 4. ${\Delta}Q$는 미세경도와 강한 양의 상관관계를 나타냈고(r=0.96, p<0.05), 침식깊이와는 강한 음의 상관관계를 보였다(r=-0.96, p<0.05).

흑미의 주정 추출물이 melanin 생성과 관련된 tyrosinase 및 항산화 활성에 미치는 영향 (Effect of Black Rice (Oryza sativa L. indica) Ethanolic Extract on Tyrosinase Activity and Antioxidant Activity Related to Melanin Production)

  • 이은빈;김문무
    • 생명과학회지
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    • 제28권5호
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    • pp.532-539
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    • 2018
  • 백모 발생은 연령이 증가함에 따라 모낭에 있는 melanocyte 수가 감소됨과 동시에 세포활성이 저하되고 동시에 과산화수소($H_2O_2$)가 축적되어 melanin 합성이 감소되어 진행된다. 본 연구의 목적은 흑미 주정추출물인 Black oryzasativa ethanolic extract (BLEE)가 백모에서 흑모로 전환되는데 관련되어 있는 melanin 합성에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 하였다. 본 연구에서 사용된 BLEE는 DPPH radical scavenging assay 및 환원력 실험에서 $64{\mu}g/ml$에서 항산화 효과가 있는 것으로 나타났으며, tyrosinase 활성 및 melanin 생성 촉진효과는 $16{\mu}g/ml$ 이상에서 효과가 나타났다. DCF fluorescence assay에서 세포내 $H_2O_2$를 소거하는 효과가 있는 것으로 나타났고, $H_2O_2$를 처리한 세포에서 melanin 생성 촉진효과가 있는 것으로 나타났다. 그러나 Western blot 분석에서는 catalase의 발현을 감소시키는 것으로 나타났으며 melanin 생성에 관여하는 tyrosinase, TRP-1, TRP-2, 효소 및 MITF 전사인자의 발현촉진에는 영향이 없는 것으로 나타났다. 그러므로 BLEE의 melanin 생성 촉진효과는 tyrosinase 활성 증가와 세포내 $H_2O_2$의 생성을 감소시켜 melanin 생성을 촉진시키는 것으로 나타났다. 결론적으로 BLEE는 melanin 생성을 촉진시키는데 있어서 중요한 역할을 하고 있는 것으로 확인되었으며, 본 연구에서 개발된 BLEE는 흑모성장과 연관이 있는 melanin생성 촉진과 관련된 모발화장품 개발분야에서 하나의 잠재적인 기능성 소재로 응용 될 수 있다는 것을 시사하고 있다.

Augmentation of Thermotolerance in Primary Skin Fibroblasts from a Transgenic Pig Overexpressing the Porcine HSP70.2

  • Chen, Ming-Yu;Tu, Ching-Fu;Huang, San-Yuan;Lin, Jyh-Hung;Tzang, Bor-Show;Hseu, Tzong-Hsiung;Lee, Wen-Chuan
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제18권1호
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    • pp.107-112
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    • 2005
  • A high environmental temperature affects the economic performance of pigs. Heat shock protein 70 (HSP70) has been reported to participate importantly in thermotolerance. This study aims to produce transgenic pigs overexpressing porcine HSP70.2, the highly inducible one of HSP70 members, and to prove the cellular thermotolerance in the primary fibroblasts from the transgenics. A recombinant plasmid in which the sequence that encodes the porcine HSP70.2 gene is fused to green fluorescence protein (GFP) was constructed under the control of cytomegalovirus (CMV) enhancer and promoter. Two transgenic pigs were produced by microinjecting pCMV-HSP70-GFP DNA into the pronucleus of fertilized eggs. Immunoblot assay revealed the varied overexpression level (6.4% and 1.4%) of HSP70-GFP in transgenic pigs. After heating at $45^{\circ}C$ for 3 h, the survival rate (78.1%) of the primary fibroblast cells from the highly expressing transgenic pig exceeded that from the non-transgenic pig (62.9%). This result showed that primary fibroblasts overexpressing HSP70-GFP confer cell thermotolerance. We suggest that transgenic pigs overexpressing HSP70 might improve their thermotolerance in summer and therefore reduce the economic loss in animal production.

온도 의존성 가변 저항 발열체로 표면 처리된 금속 분리판 제조 및 평가 (Synthesis and Evaluation of Variable Temperature-Electrical Resistance Materials Coated on Metallic Bipolar Plates)

  • 정혜미;노정훈;임세준;이종현;안병기;엄석기
    • 한국신재생에너지학회:학술대회논문집
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    • 한국신재생에너지학회 2010년도 추계학술대회 초록집
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    • pp.73.1-73.1
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    • 2010
  • For the successful cold starting of a fuel cell engine, either internal of external heat supply must be made to overcome the formation of ice from water below the freezing point of water. In the present study, switchable vanadium oxide compounds as variable temperature-electrical resistance materials onto the surface of flat metallic bipolar plates have been prepared by a dip-coating technique via an aqueous sol-gel method. Subsequently, the chemical composition and micro-structure of the polycrystalline solid thin films were analyzed by X-ray diffraction, X-ray fluorescence spectroscopy, and field emission scanning electron microscopy. In addition, it was carefully measured electrical resistance hysteresis loop over a temperature range from $-20^{\circ}C$ to $80^{\circ}C$ using the four-point probe method. The experimental results revealed that the thin films was mainly composed of Karelianite $V_2O_3$ which acts as negative temperature coefficient materials. Also, it was found that thermal dissipation rate of the vanadium oxide thin films partially satisfy about 50% saving of the substantial amount of energy required for ice melting at $-20^{\circ}C$. Moreover, electrical resistances of the vanadium-based materials converge on an extremely small value similar to that of pure flat metallic bipolar plates at higher temperature, i.e. $T{\geq}40^{\circ}C$. As a consequence, experimental studies proved that it is possible to apply the variable temperature-electrical resistance material based on vanadium oxides for the cold starting enhancement of a fuel cell vehicle and minimize parasitic power loss and eliminate any necessity for external equipment for heat supply in freezing conditions.

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