Whey protein (WP) is a mixture of proteins, and is of high nutritional values. WP has become an important source of functional ingredients in various health-promoting foods. In this study, size-exclusion chromatography (SEC) and asymmetrical flow field-flow fractionation (AsFlFFF) were used for separation and analysis of whey proteins. It was found that a lab-prepared WP from raw milk is mostly of ${\beta}$-lactoglobulin with small amount of higher molecular weight components, while a commercial whey protein isolate (WPI) powder contains relatively larger amount of components other than ${\beta}$-lactoglobulin, including IgG and protein aggregates. Results suggest that AsFlFFF provides higher resolution for the major whey proteins than SEC in their normal operation conditions. AsFlFFF could differentiate the BSA and Albumin, despite a small difference in their molecular weights, and also was able to separate much smaller amount of aggregates from monomers. It is noted that SEC was able to show the presence of low molecular weight components other than the major whey proteins in the WP samples, which AsFlFFF could not show, probably due to the partial loss of those low molecular weight species through the membrane.
Flow field-flow fractionation (FlFFF) is a technology to separate the molecules by size in an open channel. Molecules with different size have different diffusivities and are located vertically in different positions when passing through an open channel. In this study, hollow fiber membranes instead of conventional rectangular channels have been used as materials for the open channel and this change would decrease the cost of manufacturing. FlFFF is a useful technique to characterize the biopolymeric materials. Retention time, diffusion coefficients and Stokes radius of analysis can be calculated from the related simple equations. Hollow-fiber flow field-flow fractionation (HF-FlFFF) has been used for the characterization and separation of protein mixture in a phosphate buffer solution and has demonstrated the potential to be developed into a disposable FlFFF channel. The important indexes for the analytical separation are selectivity, resolution and plate height. The optimized separation condition for protein mixture of Ovalbumin, Alcohol dehydrogenase, Apoferritin and Thyroglobulin is ${\dot V}_{out}/{\dot V}_{rad}=0.65/0.85\;mL/min$.
High viscosity carbon black dispersions are used in various industrial fields such as color cosmetics, rubber, tire, plastic and color filter ink. However, carbon black particles are unstable to heat due to inherent characteristics, and it is very difficult to keep the quality of the product constant due to agglomeration of particles. In general, particle size analysis is performed by dynamic light scattering (DLS) during the dispersion process in order to select the optimum dispersant in the carbon black dispersion process. However, the existing low viscosity analysis provides reproducible particle distribution analysis results, but it is difficult to select the optimum dispersant because it is difficult to analyze the reproducible particle distribution at high viscosity. In this study, dynamic light scattering (DLS) and asymmetrical flow field-flow fractionation (AsFlFFF) analysis methods were compared for reproducible particle size analysis of high viscosity carbon black. First, the stability of carbon black dispersion was investigated by particle size analysis by DLS and AsFlFFF according to milling time, and the validity of analytical method for the selection of the optimum dispersant useful for carbon black dispersion was confirmed. The correlation between color and particle size of particles in high viscosity carbon black dispersion was investigated by using colorimeter. The particle size distribution from AsFlFFF was consistent with the colorimetric results. As a result, the correlation between AsFlFFF and colorimetric results confirmed the possibility of a strong analytical method for determining the appropriate dispersant and milling time in high viscosity carbon black dispersions. In addition, for nanoparticles with relatively broad particle size distributions such as carbon black, AsFlFFF has been found to provide a more accurate particle size distribution than DLS. This is because AsFlFFF, unlike DLS, can analyze each fraction by separating particles by size.
Flow field-flow fractionation (Fl-FFF) device has been widely used to verify the size and molecular weight of various colloids and organics. The Fl-FFF, however, generally uses carrier solutions with only low to moderate ionic strengths to exclude the high affinity of materials to the membrane under high ionic strength conditions. Thus, materials existing in seawaters have not been accurately analysed based on the hydrodynamic size and molecular weight using current Fl-FFF techniques. The highest ionic strength tested was up to 0.1 M, while seawater ionic strength is about 0.6 M. The aim of this study is to accurately measure the hydrodynamic size of particles under carrier solutions close to seawater conditions with the Fl-FFF. By employing various operating conditions during the Fl-FFF analyses, it was demonstrated that the flow conditions, the concentration of surfactants, and stabilization times were key factors in acquiring compatible data. Results have shown that the cross flow was more influential factor than the channel flow. The concentration of the surfactant was to be at least 0.05% and the minimum 15 hr of stabilization was needed for accurate and reproducible data acquisition under seawater condition.
Kim, Kihyun;Choi, Seong-Ho;Lee, Seungho;Kim, Woonjung
Analytical Science and Technology
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v.32
no.5
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pp.173-184
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2019
As the size of semiconductors becomes smaller, it is necessary to perform high precision polishing of nanoscale. Ceria, which is generally used as an abrasive, is widely used because of its uniform quality, but its stability is not high because it has a high molecular weight and causes agglomeration and rapid precipitation. Such agglomeration and precipitation causes scratches in the polishing process. Therefore, it is important to accurately analyze the size distribution of ceria particles. In this study, a study was conducted to select dispersants useful for preventing coagulation and sedimentation of ceria. First, a dispersant was synthesized and a ceria slurry was prepared. The defoamer selection experiment was performed in order to remove the air bubbles which may occur in the production of ceria slurry. Dynamic light scattering (DLS) and asymmetrical flow field-flow fractionation (AsFlFFF) were used to determine the size distribution of ceria particles in the slurry. AsFlFFF is a technique for separating nanoparticles based on sequential elution of samples as in chromatography, and is a useful technique for determining the particle size distribution of nanoparticle samples. AsFlFFF was able to confirm the presence of a little quantities of large particles in the vicinity of 300 nm, which DLS can not detect, besides the main distribution in the range of 60-80 nm. AsFlFFF showed better accuracy and precision than DLS for particle size analysis of a little quantities of large particles such as ceria slurry treated in this study.
Ji, Eun-Sun;Choe, Seong-Ho;Yun, Guk-Ro;Chun, Jong-Han;Lee, Seung-Ho
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.27
no.9
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pp.1433-1438
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2006
An AsFlFFF channel was designed and built, and then tested for analysis of pullulans and proteins. Pullulans and proteins having various nominal molecular weights were injected at various conditions of the cross-flow rate ($F_c$) and the channel-out flow rate ($F_{out}$). The retention (measured by the retention ratio R) and the zone broadening (measured by the plate height H) were measured, and then compared with theory. When the incoming flow rate, $f_{in}$ (and thus $F_{out}$) was varied with $F_c$ fixed at 2.5 mL/min, the plate height measured for the pullulan with nominal molecular weight (M) of about 100,000 showed the trend expected by the longitudinal diffusion theory (H decreases with increasing flow rate). In contrast, when $F_{out}$ was varied with the flow rate ratio, $F_c/F_{out}$, fixed constant at 5, the plate height measured for the same sample showed the trend expected from the non-equilibrium theory (H increases with increasing flow rate). Calibration plots (log D vs. log M) obtained with pullulans and proteins were not coincide, probably due to the difference in molecular conformation, suggesting the analysis of pullulans and proteins using AsFlFFF requires independent calibration. It was found that the linearity of the protein-calibration plot was improved by using a buffer solution as the carrier.
A flow and sedimentation field-flow fractionation method has been used to characterize colloidal particles in environmental samples. The opposed flow sample concentration (OFSC) method was employed. The OFSC procedure was optimized for the analysis of particles in ground water with respect to various experimental parameters including sample introduction time, flow rates, etc. The effectiveness in low concentration and characterization of the OFSC-FlFFF was demonstrated with GW-1 and GW-2 ground water samples. Ground water of upto 100 mL has been successfully loaded, concentrated, and characterized by OFSC-FlFFF. The OFSC technique allow the application of FlFFF possible for the separation and characterization of colloidal particles in very low concentrations. The results show FFF provides a simplified alternative to existing off-line concentration procedures, and shows a high potential for the applications to the analysis of dilute colloidal particles in the environmental samples.
Kim, Sung-Hee;Lee, Woo-Chun;Kim, Soon-Oh;Na, So-Young;Kim, Hyun-A;Lee, Byung-Tae;Lee, Byoung-Cheun;Eom, Ig-Chun
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.35
no.11
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pp.835-860
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2013
Recently, the consumption of nanomaterials has been significantly increased in both industrial and commercial sectors, as a result of steady advancement in the nano-technologies. This ubiquitous use of nanomaterials has brought up the concern that their exposure to environments may cause detrimental effects on human health as well as natural ecosystems, and it is required to characterize their behavior in various environmental media and to evaluate their ecotoxicity. For the sake of accomplishing those assessments, the development of methods to effectively separate them from diverse media and to quantify their properties should be requisitely accompanied. Among a number of separation techniques developed so far, this study focuses on Field-Flow Fractionation (FFF) because of its strengths, such as relatively less disturbance of samples and simple pretreatment, and we review overseas and domestic literatures on the separation of nanomaterials using the FFF technique. In particular, researches with Flow Field-Flow Fractionation (FlFFF) are highlighted due to its most frequent application among FFF techniques. The basic principle of the FlFFF is briefly introduced and the studies conducted so far are classified and scrutinized based on the sort of target nanomaterials for the purpose of furnishing practical data and information for the researchers struggling in this field. The literature review suggests that the operational conditions, such as pretreatment, selection of membrane and carrier solution, and rate (velocity) of each flow, should be optimized in order to effectively separate them from various matrices using the FFF technique. Moreover, it seems to be a prerequisite to couple or hyphenate with several detectors and analyzers for quantification of their properties after their separation using the FFF. However, its application has been restricted regarding the types of target nanomaterials and environmental media. Furthermore, domestic literature data on both separation and characterization of nanomaterials are extremely limited. Taking into account the overwhelmingly increasing consumption of nanomaterials, the efforts for the area seem to be greatly urgent.
Hollow Fiber flow field-flow fractionation (HF-FlFFF) has been tested in polyacrylonitrile (PAN) membrane channel in order to compare it with polysulfone (PSf) membrane channel. It has been experimentally shown that the separation time of 0.05-0.304 ${mu}m$ polystyrene latex (PSL) standards in PAN membrane channel is shorter than that in PSf channel by approximately 65%. The optimized separation condition in PAN membrane is ${\dot V}_{out}/{\dot V}_{rad}=1.4/0.12\;mL/min$, which is equal to the condition in PSf membrane channel. In addition both the resolution ($R_s$) and plate height (H) in PAN membrane channel are better than that in PSf membrane channel. The membrane radius was obtained by back calculation with retention time. It shows that the PSf membrane is expanded by swelling and pressure, but the PAN membrane doesn't expand by swelling and pressure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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