DNA barcoding without assessing reliability and validity causes taxonomic errors of species identification, which is responsible for disruptions of their conservation and aquaculture industry. Although DNA barcoding facilitates molecular identification and phylogenetic analysis of species, its availability in clariid catfish lineage remains uncertain. In this study, DNA barcoding was developed and validated for clariid catfish. 2,970 barcode sequences from mitochondrial cytochrome c oxidase I (COI) and cytochrome b (Cytb) genes and D-loop sequences were analyzed for 37 clariid catfish species. The highest intraspecific nearest neighbor distances were 85.47%, 98.03%, and 89.10% for COI, Cytb, and D-loop sequences, respectively. This suggests that the Cytb gene is the most appropriate for identifying clariid catfish and can serve as a standard region for DNA barcoding. A positive barcoding gap between interspecific and intraspecific sequence divergence was observed in the Cytb dataset but not in the COI and D-loop datasets. Intraspecific variation was typically less than 4.4%, whereas interspecific variation was generally more than 66.9%. However, a species complex was detected in walking catfish and significant intraspecific sequence divergence was observed in North African catfish. These findings suggest the need to focus on developing a DNA barcoding system for classifying clariid catfish properly and to validate its efficacy for a wider range of clariid catfish. With an enriched database of multiple sequences from a target species and its genus, species identification can be more accurate and biodiversity assessment of the species can be facilitated.
HONG Kyung-Pyo;MYOUNG Jung-Goo;SON Jin-Ki;PARK Chul-Won
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.27
no.1
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pp.83-88
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1994
For the purpose of genetic stock indentification of three species of salmonid fishs and their hybrid, lactate dehydrogenase(LDH), malate dehydrogenase(MDH), isocitrate dehydrogenase(IDH), a-gylycerophosphate dehydrogenase(a-GPDH), malic enzyme(ME), 6-phospho-gluconate dehydrogenase(6-PGD), phosphoglucose isomerase(PGI) and phospho-glucomutase(PGM) from skeletal muscle, liver, heart and gill tissues in all three species were analyzed. Chum and masu salmon showed no polymorphic patterns in all isozyme loci, however rainbow trout were found to have polymorphic patterns at MDH-B, LDH and IDH loci. Especially, significant differences were found at MDH-B loci between the three species and the IDH patterns of rainbow trout were also different from the other two species. These loci therefore can be utilized as efficient genetic markers for the identification of hybrids and improve the efficiency of fish breeding. There was no difference except PGI between diploid and triploid isozyme patterns but PGI showed some potential as a marker for triploid in masu salmon.
Park, Jae-Min;Jeon, Hyung-Bae;Jo, Hye-In;Cho, Seong-Jang;Suk, Ho-Young;Han, Kyeong-Ho
Korean Journal of Ichthyology
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v.30
no.2
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pp.75-83
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2018
This study is to observe species identification and early life history of Korean endemic species of Tanakia latimarginata and to use it as a basis for taxonomic studies. As a result of morphological identification, a dark band appeared at the margin of the anal fin, and the ovipositor color of the female was light orange. The shape of the egg was fusiform and sticky. The egg size (long${\times}$short diameter) averaged $4.41{\times}1.44mm$. The incubation time was 126 hours after the fertilization at an average water temperature of $21.0^{\circ}C$. Immediately after hatching, the larvae had egg yolk at an average total length of $5.91{\pm}0.18mm$ (n=5). At 18 days after hatching, the trunk fur was developed in the caudal fin with an average total length of $8.02{\pm}0.08mm$ (n=5). At 41 days after hatching, the larvae absorbed egg yolk at an average total length of $8.70{\pm}0.23mm$ (n=5). At 80 days after hatching, the average length of the fins was $12.6{\pm}0.28mm$ (n=5). The number of fin of the dorsal fin was iii.8, the anal fin iii.9~10, the caudal fin 19, lateral line scales 32~35 were similar to their brood stork.
We attempted to isolate and identify potentially pathogenic bacteria from geoduck clam (Panopea japonica) larvae, juvenile and adult, focusing on Vibrios. The isolates were identified by molecular approach and biochemical characterization. In particular, we applied MLSA (multilocus sequence analysis) to the isolated Vibrios for clear identification and phylogenetic relationships, by combining 16s rDNA and several houskeeping genes (pyrH, recA, rpoA). We obtained 141 isolates; 10 from healthy adults, 52 from moribund adults with blisters and 79 from larvae. 46 from the moribund adults and 39 from the larvae were identified as Vibrio species, while the rest of these samples and all the isolates from healthy adult were identified as marine general bacteria. Among Vibrio species, Vibrio splendidus was the most frequently identified from the moribund adults and clustered with the known V. splendidus in GenBank by MLSA. However, it was still unclear that V. splendidus was the cause of blisters because the artificial infection experiment was not conducted and V. splendidus was isolated also from the larvae. Further studies are necessary to clarify the etiological agent of the blisters found in geoduck clam in this study.
Chung, In Young;Seo, Yong Bae;Yang, Ji-Young;Kim, Gun-Do
Journal of Life Science
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v.27
no.11
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pp.1331-1339
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2017
DNA barcoding is the identification of a species based on the DNA sequence of a fragment of the cytochrome C oxidase subunit I (COI) gene in the mitochondrial genome. It is widely applied to assist with the sustainable development of fishery-product resources and the protection of fish biodiversity. This study attempted to verify horse-head fish (Branchiostegus japonicus) and fake horse-head fish (Branchiostegus albus) species, which are commonly consumed in Korea. For the validation of the two species, a real-time PCR method was developed based on the species' mitochondrial DNA genome. Inter-species variations in mitochondrial DNA were observed in a bioinformatics analysis of the mitochondrial genomic DNA sequences of the two species. Some highly conserved regions and a few other regions were identified in the mitochondrial COI of the species. In order to test whether variations in the sequences were definitive, primers that targeted the varied regions of COI were designed and applied to amplify the DNA using the real-time PCR system. Threshold-cycle (Ct) range results confirmed that the Ct ranges of the real-time PCR were identical to the expected species of origin. Efficiency, specificity and cross-reactivity assays showed statistically significant differences between the average Ct of B. japonicus DNA ($21.85{\pm}3.599$) and the average Ct of B. albus DNA ($33.49{\pm}1.183$) for confirming B. japonicus. The assays also showed statistically significant differences between the average Ct of B. albus DNA ($22.49{\pm}0.908$) and the average Ct of B. japonicus DNA ($33.93{\pm}0.479$) for confirming B. albus. The methodology was validated by using ten commercial samples. The genomic DNA-based molecular technique that used the real-time PCR was a reliable method for the taxonomic classification of animal tissues.
Fish fauna, difference of stable isotope ratio between freshwater and seawater, and trophic guilds of freshwater fishes were investigated in the lower Geum River. The study was conducted in 2011, and total study area was about 30 km of 20 km upstream and 10 km downstream from the Geum River estuary barrage. Only freshwater fishes were used for analyzing trophic guilds, and discriminant function analysis (DFA) was utilized to reclassify trophic guilds based on stable isotope ratio. Fish fauna in freshwater and seawater areas were entirely different each other, but small number of migratory species such as Coilia nasus and Chelon haematocheilus occurred both areas. Other species were not collected in the different areas because they did not have physiological ability to adapt different salinity concentrations. Stable isotope ration of two areas were different considerably due to food sources. Estuary and seawater fishes uptake food sources originated from marine, and freshwater fishes were from freshwater and terrestrial. Some migratory species showed reverse stable isotope ratio. Even though they collected in freshwater, they showed stable isotope ratio of seawater. This is because ecological characteristics of each species. Trophic guilds of freshwater fishes were reclassified by DFA, and showed slight difference with literatures. However, because this result is related with ontogenetic shift of species, more studies are needed to explain exact and correct trophic guilds. Stable isotope ratio can be changed among regions, seasons and ontogenetic stage, thus we always consider these aspects when analyzing results to get a right answer.
The body color pattern in fish is a distinctive feature for species identification. The blass bloched rockfish Sebastes pachycephalus is a commercially important marine fish species, distributed in the central and southern parts of Korea and south Hokkaido of Japan. It has a morphological feature divided into four subspecies according to with or lacking distinct spots on the body surface, and to the location of markings on the body surface. However, the genetic basis of body color pattern of S. pachycephalus is still unknown. Thus we analyzed the transcriptome of S. pachycephalus skin samples using RNA-seq analysis to investigate functional genes related to body color patterns. The experimental skin samples were prepared by classified into 'Wild type' (lacking distinct spots and markings) and 'Color type' (with distinct spots and marking). Two skin sample transcriptomes were compared pairwise and the results revealed that were 164 differentially expressed unigenes in the skin samples of 'Wild type' and 'Color type'. Gene Ontology analysis of 164 differentially expressed unigenes showed that these genes were included in the functional group of molecular function (2 genes), biological process (46 genes), and cellular component (6 genes). There were several genes that body color type skin specific expression and the genes were CTL (Galactose-specific lectin nattectin), CUL1 (Cullin-1), CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase), NMRK2 (Nicotinamide riboside kinase 2), ALOXE3 (Hydroperoxide isomerase ALOXE3), SLC4A7 (sodium bicarbonate cotransporter 3). Our study is the first attempt to search for functional genes involved in the formation of body color patterns in S. pachycephalus. The differentially expressed unigenes obtained in this study can be used as candidate genes for functional gene study related to body coloration of fish.
Here, we present the first morphological description of a larval Naso hexacanthus (5.2 mm in body length) from the East China Sea identified by cytochrome c oxidase subunit I (COI) barcoding. The larva had a kite-shaped body with long serrated first spine of dorsal and anal fins. There were four melanophores on the base of the anal fin, dense melanophores on the caudal peduncle, and scattered melanophores on the surface of the brain. There was one small spine on the snout and behind each eye, with serrations on the head, top of the eye, inner- and outer-preopercle, and on the lower part and side of the opercle. The morphological characteristics of larval N. hexacanthus identified by COI barcoding will be useful for species identification of larval fish.
DNA barcode sequences of commercial seafood products, which are difficult to morphologically discriminate, were analyzed to determine cases of food fraud. The gene sequences were analyzed by amplifying the COX I (cytochrome C oxidase subunit I) gene region of mitochondrial DNA, which is mainly used for species identification. The DNA barcode sequences were compared with the gene sequence of each fish registered in the US National Center for Biotechnology. A total of 46 processed seafood products (12 Pagrus majo, 4 Oplegnathus fasciatus, 7 Dentex tumifrons, 2 Acanthopagrus schlegelii, 7 Oreochromis niloticus, 6 Branchiostegus japonicus, 8 Branchiostegus albus) were investigated. Having DNA sequence identity of more than 97% was judged as the same species. As a result of this study, no cases of forgery and alteration were detected. However, some disparities in the commercial names used in local markets and the standard names given in the Korea Food Code were found, which may cause confusion for consumers. It is therefore suggested that the standard name or scientific name be displayed on seafood product labels.
Park, In-Seok;Choi, Hee-Jung;Noh, Choong-Hwan;Myoung, Jung-Goo;Park, Hye Jung;Goo, In Bon
Development and Reproduction
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v.17
no.4
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pp.399-407
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2013
Morphological changes in the reared rock bream, Oplegnathus fasciatus, from hatching to six days after hatching were examined during the early growth stage under starvation. All the larvae died within five days when feeding was delayed for three days after hatching. These results imply that initial larval food should be supplied within two days of hatching. Changes in the pectoral angle and the ratios of eye height to head height, gut height to standard length, and gut height to myotome height in the rock bream are alternative indicators for the identification of starving fish. These indicators might prove useful in evaluating the successful transition from endogenous to exogenous feeding in this species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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