Sexing from bovine embryos which were fertilized in vitro implicate a possibility of the sex-controlled cattle production. This study was carried out to investigate the possibility of determining of embryo sex by fluorescence in situ hybridization (FISH) technique. FISH was achieved in in vitro fertilized bovine embryos using a bovine Y-specific DNA probe which constructed from the btDYZ-1 sequences. To evaluate Y-chromosome specificity of the FISH probe, metaphase spreads of whole embryos and lymphocytes were prepared and tested. A male-specific signal was detected on 100% of Y chromosome bearing metaphase specimens. Using the FISH technique with a bovine Y-specific probe, 232 whole embryos of 8 cell- to blastocyst-stage were analyzed. Observing the presence of the Y-probe signal on blastomeres, 102 embryos were predicted as male, and 130 embryos as female. The determining rate of embryo sex by FISH technique was about 93% regardless of embryonic stages. In conclusion, the FISH using a bovine Y-specific DNA probe is an accurate, reliable and quick method for determining the sex of bovine embryos.
The ecotoxicity assessment of nanomaterials (NMs) in the environment is actively conducted throughout the world because of the concerns about their potential risk from usage and release into the environment, as well as their unique physiochemical properties. Ecotoxicity tests for NMs have been conducted using various species and methods; however, in spite of these efforts, the characteristics and toxicity of NMs have not been defined. The fish embryo toxicity test (FET) has been conducted extensively to evaluate the toxicity of NMs as an alternative to a whole-body test in fish. In this study, we collected and analyzed the trends of nanotoxicity on the early development of freshwater fish. The model nanomaterials are carbon NMs ($C_{60},\;C_{70},\;C_{60}$(OH)n and carbon nanotube). Their adverse effects were extensively investigated based on the properties of NMs, test species, and diverse exposure conditions.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.73-73
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2002
Nuclear transfer (NT) techniques have advanced in the last years, and cloned animals have been produced by using somatic cells in several species including pig. However, it is difficult that the nuclear transfer porcine embryos development to blastocyst stage overcoming the cell block in vitro. Abnormal segregation of chromosomes in nuclear transferred embryos on genome activation stage bring about embryo degeneration, abnormal blastocyst, delayed and low embryo development. Thus, we are evaluated that the correlations of the frequency of embryo developmental rates and chromosome aberration in NT and In viかo fertilization (IVF) derived embryo. We are used for ear-skin-fibroblast cell in NT. If only karyotyping of embryonic cells are chromosomally abnormal, they may difficultly remain undetected. Then, we evaluate the chromosome aberrations, fluorescent in situ hybridization (FISH) with porcine chromosome 1 submetacentric specific DNA probe were excuted. In normal diploid cell nucleus, two hybridization signal was detected. In contrast, abnormal cell figured one or three over signals. The developmental rates of NT and IVF embryos were 55% vs 63%, 32% vs 33% and 13% vs 17% in 2 cell, 8 cell and blastocyst, respectively. When looking at the types of chromosome aberration, the detection of aneuploidy at Day 3 on the embryo culture. The percentage of chromosome aneuploidy of NT and IVF at 4-cell stage 40.0%, 31.3%, respectively. This result indicate that chromosomal abnormalities are associated with low developmental rate in porcine NT embryo. It is also suggest that abnormal porcine embryos produced by NT associated with lower implantation rate, increase abortion rate and production of abnormal fetuses.
Because of their unique properties, nano-sized metallic nanomaterials (NMs) have been used in extensive applications of biomedicine, electronics, optics, engineering, and personal care products. Accordingly, with the increasing release of NMs into the environment, numerous studies of nanoecotoxicity have been conducted. Fish embryo toxicity test (FET) has many benefits in evaluating toxicity of NMs as an alternative to a whole-body test in fish. In this study, we collected and analyzed the toxicity studies of metallic NMs on freshwater fish embryos. Most studies have demonstrated that metallic NMs are highly toxic during the early development of fish embryos. However, it should be noted that the results for the same NMs on the same test species show variation due to differences in the size or surface properties of the test NMs and exposure conditions. For the safe use of metallic NMs, we need to analyze their effects based on their properties, test species, environmental media, and diverse conditions.
The cadmium (Cd) toxicological effects on the fertilized eggs, embryos and larvae were investigated in olive flounder, Paralichthys olivaceus water-borne exposed to Cd. The survival rate and hatching success of the embryos significantly diminished in treated groups in dependence of the Cd concentration. Significant differences were found at ${\geq}30{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups compared to the control group. A significant increase of malformation of the embryo was observed at ${\geq}20{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups. They usually include such symptoms as clouded yolk-sac abnormality, fin erosion and spinal curvature. A significant reduction in the survival rate of the larvae was observed in ${\geq}20{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups with accompanied by the disorder. Notably, in larvae, a concentration as low as $10{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups caused significant elevated abnormalities that is incidences of spinal cord deformation, abnormal eyes, deformation of the head region and severe developmental delay.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2007.05a
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pp.39-50
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2007
Sexing from bovine embryos fertilized in vitro implicates a possibility of the sex controlled cattle production. This study was carried out to produce the sex determined cattle through the embryonic sexing by fluorescence in situ hybridization (FISH) technique. FISH was achieved in in vitro fertilized bovine embryos using a bovine Y-specific DNA probe constructed from the btDYZ-1 sequence. Using this probe, a male-specific signal was detected on 100% of Y-chromosome bearing metaphase specimens. The analyzable rate of embryonic sexing by FISH technique was about 93% (365/393) regardless of embryonic stages. As tested single blastomere by FISH and then karyotype with their biopsied embryos, the accuracy of sex determination with FISH was 97.6%. We tried the embryo transfer with sex determined embryos on 15 cattle. Among them, the 5 cattle delivered calf with expected sex last year.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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