마이크로네시아의 축 주변해에서 채집한 치어(체장 7.8 mm)의 형태적 특징은 체장과 지느러미의 발달단계를 제외하면 Omosudis sp.와 매우 유사하였다. 이 표본을 12S rRNA 마커를 이용하여 홍메치목의 Omosudis lowii로 동정하였다. 분자마커로 동정된 Omosudis lowii 치어의 형태적 특징은 이 종의 자치어 동정에 매우 유용할 것이다.
본 연구에서는 멸종위기종이 서식하는 4개 하천(금강, 지천, 황지천, 섬진강)에서 환경유전자(environmental DNA, eDNA)와 보편적 어구를 이용한 조사 방법을 적용하여 지점별 종 다양성을 확인하고, 이를 통해 eDNA의 활용을 고찰하였다. eDNA 조사를 통해서 확인된 종 수는 지점 평균(±표준편차) 19종(±4.4)이며, 이는 어구를 이용한 정량 조사의 10종(±4.8)과 비교하여 높게 나타났다. 대부분의 지점에서 eDNA 조사가 어구를 이용한 조사보다 효율이 높게 나타났다. 반면 eDNA 조사 결과 고유종 및 근연종에 대해서 동정의 오류가 확인되어, universal primer (MiFish primer set)에 대한 국내 적용의 한계를 확인하였다. 또한 멸종위기종의 서식 여부도 일부 종에 대해서 eDNA 조사 결과가 현장 조사 및 문헌과의 차이를 보였다. 현재 개발된 universal primer는 국내에서 서식하는 모든 담수종의 서식을 확인하는 데 있어서 결과의 신뢰성을 담보할 수 없기 때문에 universal primer의 보완 및 개발이 필요하며, 멸종위기종과 같은 특정종의 서식 확인을 위해서는 종특이적 마커 개발을 통한 적용이 고려되어야 한다. 마지막으로 eDNA의 현장 조사 방법에 대한 매뉴얼이 개발될 경우, 수생태계 조사에 대한 활용성이 증대될 수 있을 것이다.
Pufferfish (Takifugu spp.) are economically important edible marine fish. Mistakes in pufferfish classification can lead to poisoning; therefore, accurate species identification is critical. In this study, we used the mtDNA cytochrome c oxidase subunit I gene (COI) to design specific primers for six Takifugu species among the 21 domestic or imported pufferfish species legally sold for consumption in Korea. We rapidly and simultaneously identified these pufferfish species using a highly efficient, multiplex polymerase chain reaction (PCR) system with the six species-specific primers. The results showed that species-specific multiplex PCR (multiplex species-specific polymerase chain reaction; MSS-PCR) either specifically amplified PCR products of a unique size or failed. MSS-PCR yielded amplification fragment lengths of 897 bp for Takifugu pardalis, 822 bp for T. porphyreus, 667 bp for T. niphobles, 454 bp for T. poecilonotus, 366 bp for T. rubripes, and 230 bp for T. xanthpterus using the species-specific primers and a control primer (ca. 1,200 bp). We visualized the results using agarose gel electrophoresis to obtain accurate contrasts of the six Takifugu species. MSS-PCR analysis is easily performed and provides identification results within 6 h. This technique is a powerful tool for the discrimination of Takifugu species and will help prevent falsified labeling, protect consumer rights, and reduce the risk of pufferfish poisoning..
In order to find out if staphylococci occur in significant numbers in Korean fermented fish products, a total of 40 different fermented fish products were collected from different markets in Korea and analyzed for their physico-chemical and microbiological states. The pH, salt concentration and water activity of the products were measured and the total viable cell count and the number of Staphylococcus grown on mannitol salt agar were determined. The identification of the strains of Staphylococcus were made by API Staph Strip and MIS identification kits, and the physiological properties of the identified strains were further characterized by different conventional methods. The pH, salt content and water activity of fermented fish samples varied widely from 4.8 to 7.1, 7.4-28.7$%$ and 0.77-0.84, repectively, depending on the type of product. The total viable cell count varied from $10^4-10^9$ cfu/ml, and most of the samples had $10^5-10^6$ cfu/ml No correlation was found between the viable cell count and the pH, NaCl concentration and water activity of the samples. Among the 35 colonies identified as Staphylococcus strains by the identification kits, S. xylosus was the most frequently occurring strain marking 17, and S. warneri was 8, S. epidermidis 4 and S. cohnii 2. S. hominis, S. saprophyticus, S. haemolyticus and S. aureus were also identified once each. In some samples (K-3, P-6, K-8, G-5 and G-10), 2-3 different species of Staphylococcus were found. Considering the region of sampling, among the 10 samples from Kunsan 5 were identified as S. warneri, while in the other regions S. xylosus was predominant. Although the physiological characteristics of the identified strains were generally consistent with those in Bergey's Manual, some discrepances were also observed. All the strains were highly salt tolerant, growing in the media containing over 18$%$ NaCl. All the strains except S. aureus (G-11) showed negative in hemolysis activity, plasma coagulation and DNase tests. All the strains including S. aureus (G-11) showed negative in enterotoxin test.
Pseudomonas is currently causing increasing mortality in farmed olive flounder in Jeju Island. It was previously reported that P. anguilliseptica is the pathogen causing the mortality. It is not known whether other sub-species are involved or not. In this study, P. fluorescens was identified from diseased olive flounder by a PCR-based diagnosis. Based on genomic sequencing and BLAST analysis, 5 out of 6 samples were closer with P. fluorescens than P. anguilliseptica. Our finding suggests that P. fluorescens may be the dominant species causing the disease in farmed olive flounder in Jeju Island, South Korea.
현재 양식장에서는 Aeromonad를 비롯한 다양한 병원균에 의한 전염병으로 인해 많은 경제적 손실을 겪고 있다. 연어과 어류뿐만 아니라 담수 및 해수어류에도 치명적인 감염을 야기하는 Aeromonas 종은 적어도 26종 이상이 보고되어왔으며, 전염병을 유발하는 유비쿼터스 세균이다. Aeromonas 종을 확인하기 위해 16S rDNA 및 하우스 키핑 유전자의 핵산 서열을 기반으로 한 분자생물학적 기술이 사용될 수 있다. 본 연구에서 Aeromonas 종은 강원도 16개 양식장의 연어과 어류로부터 분리되었으며 Aeromonad의 16S rDNA와 하우스 키핑 유전자의 서열, 즉 RNA polymerase sigma factor ${\sigma}^{70}$ (rpoD) 또는 DNA gyrase subunit B (gyrB)를 기반으로 계통 발생 학적으로 동정했다. 그 결과 대서양 연어 (Salmo salar), 은연어 (Oncorhynchus keta), 산천어 (Oncorhynchus masou masou), 무지개송어 (Oncorhynchus mykiss)에서 96 개의 균주가 수집되었으며, 36개의 균주가 16S rDNA 분석에 의해 Aeromonas 속으로 확인되었다. 확인된 Aeromonas 속 균주는 rpoD 또는 gyrB 유전자 서열을 기반으로 추가 분석되어 Aeromonas salmonicida (24 균주), A. sobria (10 균주), A. media (1 균주) 및 A. popoffii (1 균주)로 검출되었으며, 이 것은 Aeromonas salmonicida가 강원도의 연어과 어류에서 주요 감염균임을 나타낸다. 또 하우스 키핑 유전자의 서열에 기초한 Aeromonas 종의 계통발생학적 동정은 16S rDNA 서열보다 더 정확하다는 것이 또한 증명되었다.
Mothishri, M.S.;Umasuthan, Navaneethaiyer;Thulasitha, William Shanthakumar;Whang, Ilson;Lee, Jehee
한국어병학회지
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제28권2호
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pp.99-107
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2015
Despite its economic importance as an aquaculture species, the molecular and genetic information regarding physiologically important elements in rock bream (Oplegnathus fasciatus) is not completely understood. Rab proteins play a vital role in cellular mechanisms and immunity as one of the key regulators of membrane trafficking. In this investigation, a Rab gene, named as RbRab-5C-like, was identified from Oplegnathus fasciatus. RbRab-5C-like protein exhibited high homology with Rab proteins of other species and possessed signature characteristics of Rab proteins with four conserved cysteine residues. Phylogenetic analysis showed that RbRab-5C-like clustered with other fish counterparts. The RbRab-5C-like genomic sequence possesses six exons and five introns. Transcriptional analysis revealed that RbRab-5C-like was ubiquitously expressed in all examined tissues with the highest expression occurring in the liver. While the structural and homologic characteristics of RbRab-5C-like suggest a strong conservation of this element in different species, its mRNA distribution implies a wide range of biological significance in rock bream.
Kim Choong-Jae;Yoshimatsu Sada-Akfi;Sako Yoshihiko;Kim Chang-Hoon
Fisheries and Aquatic Sciences
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제7권4호
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pp.175-183
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2004
The dinoflagellate Alexandrium tamiyavanichii Balech, a producer of toxins causing paralytic shellfish poisoning (PSP), has recently been considered as one of main organisms responsible for toxication of shellfish in Japan. In this study, A. tamiyavanichii was subjected to a molecular phylogenetic analysis inferred from 28S rDNA D1-D2 sequences and a species-specific LSU rRNA-targeted oligonucleotide DNA probe was designed to identify A. tamiyavanichii using the whole cell-FISH (fluorescence in situ hybridization). The sequences of the 28S rDNA D1-D2 region of A. tamiyavanichii showed no difference from A. cohorticular AF1746l4 (present name A. tamiyavanichii) and formed a distinct clade from the 'tamarensis species complex'. The probe, TAMID2, reacted specifically with A. tamiyavanichii cultured cells, without any cross-reaction with other species belonging to the same genus, including A. tamarense, A. catenella, A. affine, A. fraterculus, A. insuetum and A. pseudogonyaulax. In a test of cross-reactivity with a field sample, TAMID2 reacted consistently with only A. tamiyavanichii, indicating that the present protocol involving the TAMID2 probe might be useful for detecting toxic A. tamiyavanichii in a simple and rapid manner.
We studied behaviour pattern of anchovy (Engraulis japonicus) shoal by a method of shoal echo integration and tested species identification by a method of artificial neural network using the acoustic data collected in the East China Sea in March 1994 and in the southern coastal waters of the East Sea of Korea in March 1995. Between areas, frequency distribution of 10 shoal descriptors was different, which showed characteristics of shoal behaviour in size, bathymetric position and acoustic strength. The range and mean of shoal size distribution in length and height was wider and bigger in the southern coastal waters of the East Sea than in the East China Sea. Relative shoal size of China Sea. Fractal dimension of shoal was almost same in both areas. Mean volume reverbration index of shoal was 3 dB higher in the southern coastal waters of the East Sea than in the East China Sea. The depth layer of shoal distribution was related to bottom depth in the southern coastal waters of the East Sea, while it was between near surface and central layer in the East China Sea. Principal component analysis of shoal descriptors showed the correlation between shoal size and acoustic strength which was higher in the southern coastal waters of the East Sea, than in the East China Sea. Correlation was also found among the bathymetric positions of shoal to some degree higher in the southern coastal waters of the East Sea than in the East China Sea. The anchovy shoal of two areas was identified by artificial neural network. The contribution factor index (Cio) of the shoal descriptors between two areas were almost identical feature. The shoal volume reverberation index (Rv) was showed the highest contribution to the species identification, while shoal length and shoal height showed relatively high negative contribution to the species identification.
Kim, Soo Cheol;Sumi, Kanij Rukshana;Choe, Myeong Rak;Kho, Kang Hee
한국해양생명과학회지
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제1권2호
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pp.88-94
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2016
Determining the infection history of living organisms is essential for understanding the evolution of infection agents with their host, particularly for key aspects such as immunity. Viruses, which can spread between individuals and often cause disease, have been widely examined. The increasing availability of fish genome sequences has provided specific insights into the diversity and host distribution of retroviruses in fish. The shortspine spurdog (Squalus mitsukurii) is an important elasmobranch species; this medium-sized dogfish typically lives at depths of 100~500 m. However, the retroviral envelope polyprotein in dogfish has not been examined. Thus, the aim of the present study was to identify and analyze the retroviral envelope polyprotein in various tissues of dogfish. The 1334-base pair full-length novel cDNA of dogfish envelope polyprotein (dEnv) was obtained by 3' and 5'-rapid amplification of cDNA end analysis from S. mitsukurii. The open reading frame showed a complete coding sequence of 815 base pairs with a deduced peptide sequence of 183 amino acids that exhibited 34~50% identity with other fish and bird species. It was also expressed according to reverse transcription and real-time polymerase chain reaction in the kidney, liver, intestine, and lung, but not in the gill. This distribution can be assessed by identifying and analyzing endogenous retroviruses in fish, which consists of three main genes: gag, pol and env. Dogfish envelope polyprotein sequence is likely important in evolution and induces rearrangements, altering the regulatory and coding sequences. This is the first report of the identification and molecular characterization of retroviral envelope polyprotein in various tissues of S. mitsukurii.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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