The biosynthesis of lovastatin, a cholesterol lowering agent formed by the filamentous fungus Aspergillus terreus, was examined in a 2.5 L jar fermenter. In batch bioreactor cultures conducted at various agitation rates, 400 rpm showed the best result in terms of lovastatin production. Notably, the effect of pH on lovastatin biosynthesis was found to be significant: when the pH was controlled at around 5.8 during the whole fermentation period, lovastatin concentration reached 598 mg/L, which is much hihger than the amounts obtained by pH-uncontrolled and pH 7.4-controlled fermentations. In addition, both L-histidine and L-tryptophan were observed to be favorable amino acids for the enhancement of lovastatin production when 6 g/L of the respective amino acids were supplemented at the beginning of the fermentation period. By further optimization of the production media and the physical environment, lovastatin production was increased to 836 mg/L (3.5 mg/L/hr) which is approximately 10 times higher than the productivity of the basic control culture.
White root rot disease, caused by the pathogen Rosellinia necatrix, is one of the world's most devastating plant fungal diseases and affects several commercially important species of fruit trees and crops. Recent global outbreaks of R. necatrix and advances in molecular techniques have both increased interest in this pathogen. However, the lack of information regarding the genomic structure and transcriptome of R. necatrix has been a barrier to the progress of functional genomic research and the control of this harmful pathogen. Here, we identified 10,616 novel full-length transcripts from the filamentous hyphal tissue of R. necatrix (KACC 40445 strain) using PacBio single-molecule sequencing technology. After annotation of the unigene sets, we selected 14 cell cycle-related genes, which are likely either positively or negatively involved in hyphal growth by cell cycle control. The expression of the selected genes was further compared between two strains that displayed different growth rates on nutritional media. Furthermore, we predicted pathogen-related effector genes and cell wall-degrading enzymes from the annotated gene sets. These results provide the most comprehensive transcriptomal resources for R. necatrix, and could facilitate functional genomics and further analyses of this important phytopathogen.
The study has been carried out to compare the pathogenicity, physiological characteristics and genetic reliability between rough colony type strain and smooth colony type strains of Pseudomonas mori (Boyer et Lambert) Stevens which were isolated from diseased plant parts in 5 different areas throughout country. The results are summarized as follow. 1. The rough colony type strain showed more agressive reactions to tested host plant varieties than smooth colony type strains though there was no differences in the appearence of lesion types caused by both strains. 2. Both colony types were differentiated morphologically in that the rough colony type strain was having more than 200r long filamentous body without flagella where as the smooth colony type strains have short rods with one or several polar flagella. 3. The colony of smooth type strains was circular, entire, smooth and opaque, while the rough type strain shelved endulated, irregular margin, rough and wrinkled colony on nutrient agar media. 4. There were no differences between both colony types in the physiological and serological test. 5. Both of smooth and rough colony type strains showed genetic reliability through more than 100 succeeding cultures on the media, and were stable to various chemicals such as 1 to 3 percent of NaCl, 5 kinds of organic acid and 4 kinds of antibiotics.
Colussi, Francieli;Serpa, Viviane;Da Silva Delabona, Priscila;Manzine, Livia Regina;Voltatodio, Maria Luiza;Alves, Renata;Mello, Bruno Luan;Nei, Pereira Jr.;Farinas, Cristiane Sanches;Golubev, Alexander M.;Santos, Maria Auxiliadora Morim;Polikarpov, Igor
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.8
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pp.808-817
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2011
Because of its elevated cellulolytic activity, the filamentous fungus Trichoderma harzianum has a considerable potential in biomass hydrolysis applications. Trichoderma harzianum cellobiohydrolase I (ThCBHI), an exoglucanase, is an important enzyme in the process of cellulose degradation. Here, we report an easy single-step ion-exchange chromatographic method for purification of ThCBHI and its initial biophysical and biochemical characterization. The ThCBHI produced by induction with microcrystalline cellulose under submerged fermentation was purified on DEAE-Sephadex A-50 media and its identity was confirmed by mass spectrometry. The ThCBHI biochemical characterization showed that the protein has a molecular mass of 66 kDa and pI of 5.23. As confirmed by smallangle X-ray scattering (SAXS), both full-length ThCBHI and its catalytic core domain (CCD) obtained by digestion with papain are monomeric in solution. Secondary structure analysis of ThCBHI by circular dichroism revealed ${\alpha}$- helices and ${\beta}$-strands contents in the 28% and 38% range, respectively. The intrinsic fluorescence emission maximum of 337 nm was accounted for as different degrees of exposure of ThCBHI tryptophan residues to water. Moreover, ThCBHI displayed maximum activity at pH 5.0 and temperature of $50^{\circ}C$ with specific activities against Avicel and p-nitrophenyl-${\beta}$-D-cellobioside of 1.25 U/mg and 1.53 U/mg, respectively.
This study was conducted to investigate the characteristics of the medium used on the composting step, comparing the excavator agitator with the self-propelled turner. The temperature of the outdoor composting medium tended to increase rapidly after flipping in the turner. The late composting medium temperature was maintained at the excavator treatment area (farm practice), and the late composting effect progressed. During the field composting stage, various microorganisms such as Bacillus spp., Actinomycetes, fluorescent Pseudomonas spp., and filamentous fungi were distributed in the medium, and the density of aerobic bacteria involved in the decomposition of the medium was increased. Under high-temperature composting conditions, blue fungi, and mesophilic actinomycetes were inhibited or killed. Thermophilic actinomycetes, which play an important role in decomposing organic matter, showed higher densities than those observed in farm practices in the self-propelled turner process. The length of rice straw was slightly shorter when the self-propelled turner was used, and the water content did not show any significant difference between treatments. The a and b values tended to increase as the inverter was turned over. The CN ratio of the composting broth was lowered from 23.1 to 16.2 for the 5th turnover in the context of farming practices, and from 23.3 to 16.9 in the context of the self-propelled turner. The yield of each treatment was increased by 20% in 1 period, 28% in 2 periods, and 26% in 3 periods; the overall yield was 23%.
The ultrastructure of small arterioles and capillaries in the lumbrical muscles of rat digits were studied by electron microscopy and following results were obtained. 1. The diameter of small arterioles of rat digits were $12\sim20{\mu}m$, and it was relatively smaller than human $(30\sim35{\mu}m)$. 2. All the endothelial cells of small arterioles and capillaries in the lumbrical muscles of rat digits were continuous type, and they had typical morphological characteristics of continuous endothelial cells : numerous cytoplasmic pinocytic vesicles and many tight junctions between the endothelial cells. 3. In the small arterioles subendothelial layers were irregularly spaced beneath the basal lamina, and membrane to membrane contacts were found between the endothelial cells and smooth muscle cells. 4. Pericytes were often found nearby capillary endothelium, and their cytoplasmic processes surrounded part of endothelial cells. They were enclosed by basal lamina. 5. Smooth muscle cells in tunica media of small arterioles were only one layered, that is, they were terminal arterioles. Sarcoplasm of smooth muscle cell was divided to 2 areas; homogeneous or filamentous area and non-homogeneous perinuclear area. 6. The tunica adventitia contained fibroblasts with extremely attenuated cytoplasmic processes and collagen fibirls.
In this study, we analyzed the densities and taxonomic characteristics of various microorganisms that play important roles in Agaricus bisporus culture medium composting, and examined changes in the levels of decomposition-related enzymes secreted by these microorganisms. Various microorganisms such as thermophilic bacteria, actinomycetes, fluorescent Pseudomonas spp., and filamentous bacteria are closely associated with culture medium composts of Agaricus bisporus. The population densities of microorganisms change, and harmful bacteria disappear during thermophilic composting. Psychrobacter sp., Pseudomonas sp., Bacillus sp., and Pseudoxanthomonas sp. accounted for the highest proportion of bacteria in the culture media during outdoor composting, whereas Bacillus sp. and Psychrobacillus sp. were dominant after pasteurization. Cellulose and hemicellulose enzymes of the microorganisms were important at an early stage of rice straw composting and after decomposition of carbon sources, respectively. Microorganisms that secreted these enzymes were present in the second and third turning stage of composting.
Actinobacteria tolerating extreme conditions can be a rich source of bioactive compounds and enzymes. In this study filamentous actinobacteria were isolated from soils of Ulleung Island, and their physiological properties were examined. Soil samples were collected, serially diluted and spread on various agar media. The average viable counts of total bacteria were $1.28{\times}10^7CFU/g$ for soil sample 1 (ULS1) and $2.05{\times}10^7CFU/g$ for soil sample 2 (ULS2). As a result, 34 strains of actinobacteria were isolated and assigned to the genera Streptomyces (16 strains), Isoptericola (5 strains), Rhodococcus (4 strains), Agromyces (3 strains), Micrococcus (2 strains), Arthrobacter (1 strain), Williamsia (1 strain), Microbacterium (1 strain), and Oerskovia (1 strain) based on 16S rRNA gene sequence analysis. Enzyme activity and plant growth promoting potential were tested for representative isolates. Multiple strains of Streptomyces degraded starch, casein and Tween 80. As for plant growth promoting potential, strains of Oerskovia, Williamsia, Isoptericola, and Streptomyces solubilized phosphate, and those of Agromyces, Oerskovia, Micrococcus, Rhodococcus, Streptomyces, and Isoptericola produced 3-indole-acetic acid (IAA), respectively. Selected strains of Streptomyces exhibited strong antagonistic activity against Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis as well as Candida albicans. This study confirms that actinobacteria from Ulleung Island can be a good source of novel bioactive compounds.
The investigation of air fungal population in the storages to keep papers and textiles that are designated as important folk life materials or treasures was carried out from Dec. 17 to. 23, 1980. Isolation media was used for malt extract agar with chloramphnicol to prevent bacterial contamination. Isolation and identification of air fungi from the four preserved rooms were Cladosporium cladosporioides, Alternaria chlamydospora, Aspergillus fumigatus, A. versicolor, Eurotium chevalieri, Penicillium charlesii var. rapidum, P. oxalicum. P. viridicatum, Trichoderma viride, Acremomium sp., Mucor sp. and Yeast. It was found that nine species in eight genera was isolated. Among them, underscribed species in Korea was two species ; Eurotium chevalieri and Penicillium visidicatum. The fungal population of four storages was showed to be dominant species such as Cladosporium cladosporioides and the order was Acremonium, Penicillium, Aspergillus, Trichoderma, Alternaria and Eurotium. Eurotium chevalieri was ascomycetous fungi including distinctive ascospores in cleistothecia, the filamentous fungi was directly isolated from the papers and cellulose materials showing to be fourteen species in eight genera. The most species of the fungi isolated was also Cladosporium cladosporioides and the other fungi were found as Acremonium, Penicillium, Aspergillus and Trichoderma. It was confirmed that underscribed fungi were two species ; Mucor racemosus and Penicillium spinulosvm. The effect of four antifungal agents, benzoic acid, sorbic acid, dehydroacetic acid and thymol was also examined on eight species of Aspergillus, Penicillium, Cladosporium. and Tricoderma. this results were shown that more than 0.5% concentration of thymol inhibited the grow of all fungalspecies and other three chemicals appeared various inhibition zones of fungal growth depending in their different concentrations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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