In this study, we describe the most expected behavior of cells on the modified surface and the correlation between the modified substrates and the response of cells. The physicochemical characteristics of substrates played an essential role in the adhesion and proliferation of cells. Glass and polymer substrates were modified using air plasma oxidation, and the surfaces were coated with self-assembled monolayer molecules of silanes. The PDMS substrates embedded with parallel micropatterns were used for evaluation of the effect of topologically modified substrate on cellular behaviour. BALB/3T3 fibroblast cells were cultured on different surfaces with distinct wettability and topology, and the growth rates and morphological change of cells were analyzed. Finally, we found the optimum conditions for the adhesion and proliferation of cells on the modified surface. This study will provide insight into the cell-surface interaction and contribute to tissue engineering applications.
The cell cycle phase in which donor nuclei exist prior to nuclear transfer is an important factor governing developmental rates of reconstituted embryos. It was suggested that quiescent G0 and cycling G1 cells could support normal development of reconstituted embryos. In a quest of optimized donor nuclei treatment prior to nuclear transfer, this study was undertaken to examine the cell cycle characteristics of bovine fetal and adult somatic cells when cultured under a variety of culture treatments and the cell cycle change with the lapse of time after trypsinization. This was archived by measuring the DNA content of cells using flow cytometry, Cultured fetal fibroblast cells, adult skin and muscle cells, and cumulus cells were divided by 3 culture treatments; 1) grown to 60-70% confluency (cycling), 2) serum starved culture, 3) culture to confluency. Trypsinized cells were fixed by 70% ethanol and stained with propidium iodide. For one experiment, trypsinized cells were resuspended in DMEM+10% FBS and incubated for 1.5, 3 and 6 h with occasional shaking before ethanol fixation. Cell cycle phases were determined by flow cytometry enabling calculation of percentages of G0+G1, S and G2+M. The majority of cells were in G0+Gl stage regardless of origin of cells. Cultures that were serum starved or cultured to confluency contained significantly (P<0.05) higher percentages of cells in G0+G1 (89.5-95.4%). For every cell lines and culture treatments, percentages of cells in existing in G0+G1 increased with decreasing of the cell size from large to small. In the serum starved and confluency groups, about 98% of small cells were in G0+G1 Serum starved culture contained higher percentages of small-sized cells (38.5-66.9%) than cycling and confluent cultures regardless of cell lines (P<0.05). After trypsinization of fetal fibroblast and adult skin cells that were serum starved and cultured to confluency, the percentages of cells in G0+G1 significantly increased by incubation for 1.5(95.7-99.5%) and 3.0 h (95.9-98.6%). The results suggest that the efficient synchronization of bovine somatic cells in G0+G1 for nuclear transfer can be established by incubation for a limited time period after trypsinization of serum starved or confluent cells.
Adipocytes are differentiated from preadipocytes and have large capacity for storing fats inside cells. In cattle, intramuscular fat (IMF) content is one of the major determinants for meat quality and also highly affects market prices, especially in Japan and Korea. In order to profiling differentially expressed genes between intramuscular fibroblast-like cells (preadipocytes) and their differentiated adipocytes, we have established intramuscular fibroblast-like cells from M. longissimus thoracis in Korean cattle (Hanwoo). The differentially expressed genes were selected by comparing these two types of cells ug thecommercially available 23kese two types of cells ug theco. The results indan ced that 206 arecomelements were differentially expressed. Of these, 67 and 94 ks wn genes were up and d wn regulaced, respectively, in adipocytes ug ng both 2-fold difference and Welch's t-test as the cut-off points. The differentially expressed genes identified in this study can be used as good markers for improving meat quality traits with further verification of their biological functions, especially IMF contents in cattle.
Kim, Seong Sin;Kim, Byung-Ock;Park, Joo-Cheol;Jang, Hyun-Seon
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.36
no.3
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pp.757-765
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2006
Human periodontal ligament fibroblasts (hPDLF) are very important for curing the periodontal tissue because they can be differentiated into various cells. A tissue engineering approach using a cell-scaffold is essential for comprehending today's periodontal tissue regeneration procedure. This study examined the possibility of using an acellular dermal matrix as a scaffold for human periodontalligament fibroblast (hPDLF). The hPDLF was isolated from the middle third of the root of periodontally healthy teeth extracted for orthodontic reasons. The cells were cultured in a medium containing Dulbecco's modified Eagle medium supplemented with 10% fetal bovine serum at $37^{\circ}C$ in humidified air with 5% $CO_2$. The acellular dermal matrix(ADM) was provided by the US tissue banks(USA). Second passage cells were used in this study. The hPDLF cells were cultured with the acellular dermal matrix for 2 days, and the dermal matrix cultured by the hPDLF was transferred to a new petri dish and used as the experimental group. The control group was cultured without the acellular dermal matrix, The control and experimental cells were cultured for six weeks. The hPDLF cultured on the acellular dermal matrix was observed by Transmission Electron microscopy (TEM). Electron micrography shows that the hPDLF was proliferated on the acellular dermal matrix. This study suggests that the acellular dermal matrix can be used as a scaffold for hPDLF.
The responses of human pulp fibroblastic cells to Ga-As Semi-Conductor-Dens-Bio Laser (Frequency: 5 Hz~10,000 Hz Model: SD-101A RCA, U.SA)) were examined in vitro using pulp fibroblastic cells obtained from the pulp tissue of human tooth. The mitogenic effect of soft laser was assessed by measuring the MTT assay. The morphologic effect for soft laser showed under the scanning and transmission electron microscopy. The results as follows; 1. The mitogenic response of the soft laser was not observed until 4th time of radiation, while the mitogenic response at 4th time increased mitogenic effect by as much as 1.7 fold compared to the control value. 2. The mitogenic response of the soft laser on pulp fibroblast differ from the mitogenic response on other fibroblasts. 3. In scanning electron microscopic study, The microvilli of cell surface increased gradually with width and length after laser radiation, it demonstrate that development of microvilli have close connection with differentiation of cells. 4. Under the transmission electron microscope, The laser-treated cells maintained their elongated shape and a high degree of cellular polarization. The large cell body containing a well developed Golgi complex, a large number of profiles of rough endoplasmic reticulum, and great numbers of mitochondria. 5. The laser-treated cells maintained the long straight bundles of closely apposed microfilaments or individual filaments forming a cross-linked network. These findings suggest that the laser may have important roles in promotion of pulp healing and consequently may be useful for clinical application in pulp regenerative procedures.
We have studied the effect of silk proteins to the cell proliferation of human skin fibroblast cells (CCD-986sk) after injury. Silk proteins were extracted treatment with enzyme or NaOH solution from raw silk and culled-cocoon shell of Bombyx mori, Antheraea yamamai and A. pernyi. The cell proliferation after in vitro injury are increased in treatment by Bombyx mori (BM-1,2), Antheraea yamami (AY-1,2) and A. pernyi (AP-1,2). The silk protein fractions-treated cells exhibited proliferation in a dose dependent between $0.1\;{\mu}g/ml$ and $10\;{\mu}g/ml$. But, the macrophage, RAW 264. 7 cell viability was unaffected by the silk protein fractions by MTT assay. The molecular weights of the silk protein fractions were from 300-600 to 900-1500. These results results that the silk protein fractions may function through skin fibroblast proliferation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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