We developed a kind of soy-based sauce for stews using three recipes and sensory evaluation processes, and examined the biological activities such as antioxidative, fibrinolytic and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities of hot water extract of Cornus officinalis S. et Z in order to use as functional ingredient. The developed stew was composed of soy sauce $1\frac{1}{2}$ Tbsp, sugar $1\frac{1}{4}$ Tbsp, garlic, small green onion, powdered sesame and sesame seed oil $\frac{1}{2}$ tsp, respectively, ginger extract $\frac{1}{4}$ tsp, black pepper $\frac{1}{8}$ and water $\frac{2}{3}$C per 300 g of main ingredients(pork rib, chicken and dried pollack). It was evaluated more highly acceptable than the original recipes by sensory test. Replacement of water in the recipe of the developed stew sauce with hot water extract of Cornus officinalis S. et Z did' nt affect the sensory quality. From the above results. we concluded that hot water extract of Cornus officinalis S. et Z might be a excellent source to provide health functionality.
Effects of Nattokinase fibrinol (NKF), defined as a fibrinolytic product, on fibrinolytic and atherogenetic markers were studied for healthy adults (20-31 years old), who is smoking more than 20 cigarettes per day. Subjects were divided into 29 for NKF group and 10 for placebo group in a short term study. They were given 2 tablets of NKF (4,000 unit) or placebo tablet and thereafter blood samples were collected at 0, 2, 4 hr prerid. For a 4-week long term study, 15 subjects for NFK group and 10 subjects for placebo group were supplemented one tablet of each NKF (2,000 unit) and placebo per day, respectively. Blood samples were collected at 0, 1, 2, 4 weeks later. The short-term experimental trial showed that NKF remarkably increased fibrinolytic activity at 2hr after consumption, which was maintained up to 4 hr, relative to that of placebo, while NKF reduced the euglobulin clot lysis time (ECLT) and retarded the activated partial thromboplastin time (aPTT), as compared to placebo group. NKF supplementation for 4 weeks elevated fibrinolytic activity, shortened ECLT and retarded aPTT. Furthermore, NKF supplementation increased anti-atherogenic index by decreasing triglyceride (TG) and elevating high-density lipiprotein (HDL)-cholesterol. These results indicate that NKF supplementation for short term or long term might have beneficial effects on preventing and treating cardiovascular disease by increasing fibrinolytic activity and improving atherogenic markers such as hyperlipidemia.
In this study, fibrinolytic activities of fermented yellow agabean (FYA) and black agabean (FBA), and the antioxidation efficiencies of 70% ethanol extract of fermented yellow agabean (FYAE) and black agabean (FBAE) were investigated by selecting Bacillus sp. sm26 strain. Fibrinolytic activities of FYA and FBA were $6.38{\pm}0.5$ and $6.83{\pm}0.5\;U/ml$, which were 1.3 and 1.4 times higher than that of FSB, respectively. With regard to total phenolic contents, FYAE and FBAE were $3.40{\pm}0.44\;mg/g$ and $2.45{\pm}0.20\;mg/g$ respectively, suggesting that their contents were about twice as high as that of fermented soybean extract (FSBE) used as a control. In comparison with FSBE, total protein and sugar contents of FYAE were $0.56{\pm}0.11$ and $2.41{\pm}0.48\;mg/g$, respectively, and those of FBAE were $0.39{\pm}0.12$ and $2.72{\pm}0.63\;mg/g$, respectively. This result suggests that FYAE was 4.7 and 1.7 times higher than FSBE, respectively. The DPPH radical scavenging activity of FBAE was 79% at 1 mg/ml, which was highest among the fermented bean extracts, and was twice as high as FSBE in regards to activity. In addition, FBAE exhibited the highest reducing power at 1 mg/ml, which was higher than FSBE by two-fold. With regard to lipid peroxidation, FBAE and FYAE were 93% and 80% at 1 mg/ml, which were 3 and 2.5 times higher than FSBE, respectively. Of note, the hydrogen peroxide scavenging activities of FBAE and FYAE were 82% and 54% at 1 mg/ml, offering activity that was 4 and 2.5 times higher than FSBE, respectively. Based on these results, the fibrinolytic activity and antioxidation efficiency of the fermented agabeans were significantly higher than other soybeans. Therefore, these studies may suggest that the functional agabeans can be a potential candidate for a natural functional food.
Kim, Jieun;Choi, Kyoung-Hwa;Kim, Jeong Hwan;Song, Young-Sun;Cha, Jaeho
Journal of Life Science
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v.23
no.1
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pp.15-23
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2013
AprE51 from Bacillus amyloliquefaciens CH51 is a 27 kDa subtilisin-like protease with fibrinolytic activity. AprE51-6 showing increased catalytic activity was produced previously. To enhance the thermostability of AprE51-6, 2 residues, Gly-166 and Asn-218 based on B. subtilis subtilisin E were mutated by site-directed mutagenesis. The results of the mutational analysis showed that substitution of arginine for Gly-166 (AprE51-7) increased the fibrinolytic activity 1.8-fold. An N218S mutant (AprE51-8) also increased the fibrinolytic activity up to 4.5-fold in a fibrin plate assay. Purified AprE51-7 and AprE51-8 mutants had a 1.9- and a 2.5-fold higher $k_{cat}$, respectively, and a 2.1-1.9-fold lower $K_m$, respectively. This resulted in a 3.8- and a 4.7-fold increase in catalytic efficiency ($k_{cat}/K_m$), respectively, relative to that of wild-type AprE51. AprE51-8 had a broader pH range than AprE51-6 and nattokinase, especially at an alkaline pH value. In addition, AprE51-8 showed higher thermostability than AprE51-6 at $60^{\circ}C$. The half-lives of AprE51-7 and AprE51-8 at $50^{\circ}C$ were 21.5 and 27.3 min, respectively, which are 2.0 and 2.6 times longer, respectively, than that of the wild-type AprE51.
In this study, Tenebrio molitor (T. molitor) was fermented with Lactobacillus plantarum JBMI F3 (F3), Lactobacillus plantarum JBMI F5 (F5), Lactobacillus gasseri Ba9 (Ba9), Aspergillus kawachii KCCM 32819 (Ak), Saccharomyces cerevisiae KACC 93023 (Sc), and Bacillus subtilis KACC 91157 (Bs). After fermentation, the fermented products were extracted by water, ethanol, and methanol, and their physicochemical and biological properties were investigated. In a DPPH assay, the water extracts of the fermented products of T. molitor showed high antioxidant ability. Among the water extracts, the fermented product by Bs showed the highest DPPH radical scavenging activity. The total contents of phenolic compounds and flavonoids were highest in the fermented products by Ak and Bs, respectively. Reducing activity was detected the most high activity on ethanol extract of fermented product by Bs. The water extract of the fermented product by Bs exhibited strong enzymatic activity for fibrinogen and starch hydrolysis. Based on the observed physicochemical and biological properties, the fermented products of T. molitor by microorgansims can likely be applied as functional materials in various industries.
Six lumbrokinase (LK) fractions from Lumbricus rubellus lysates were purified by a series of column chromatographies. The molecular weights of the six LK fractions appeared to range from 24.6 to 33.1 kDa. In the experimental model of rat venous thrombosis, the thrombus weight and PAI activity decreased significantly when the LK was administered orally. However, the activities of APTT, PT and plasmin showed a significant increase. The aggregation of rat platelets pretreated with various LK doses was inhibited by thrombin, and the MDA generation decreased. The rat thoracic aorta and mesentric arteries contracted with phenylephrine relaxed due to the treatment of the LK fractions. These results suggest that the fibrinolytic effects of LK were mediated not only by proteolytic activity, but also by the inhibition of platelet agregation and the relaxation of blood vessels. It is concluded that the LK may be useful as a hemolytic agent for treatment of fibrin clot.
This study was conducted to investigate the antioxidant activity, fibrinolytic activity and cytotoxic effect of Korean traditional noble rice wine made using different methods (A-C) and commercial rice wine (D-H) on various tumor cell lines. The antioxidant activity of rice wine was measured by DPPH (2,2-dipicryl-1-picrylhydrazyl), ABTS [2,2'-azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid)] and NO (nitric oxide) radical scavenging assay. In this study, Samhaeju showed the greatest fibrinolytic activity of 13-17U and exhibited the highest antioxidant activity. Among the different Samhaeju, the sample prepared using method C had the highest antioxidant activity. The cytotoxic effect of rice wine were also examined against the human cancer cell line (A549 cells and HeLa cells) based on the results of a WST-1 assay and morphological changes. Rice wine induced the inhibition of cell proliferation and morphological changes in tumor cell lines in a concentration-dependent manner, with Samhaeju diluted 10 fold having the strongest effect on these factors. These findings suggest that Korean rice wine has antioxidant activity and cytotoxic effect, and that these factors are influenced by the method of preparation.
A bacterial strain producing a fibrinolytic enzyme, subtilisin CP-1, was isolated from Doen-Jang, a Korean traditional fermentation food. Based on the analysis of gene sequence of 16S rRNA and biochemical analysis, the strain was identified as Bacillus sp. and named as Bacillus sp. CP-1. To investigate the effect of the medium on the production of fibrinolytic enzyme from Bacillus sp. CP-1, two commercial bacterial culture media, tryptic soy broth (TSB) and Luria-Bertani (LB), were applied to the cultivation of Bacillus sp. CP-1. The strain secreted only one proteolytic enzyme (subtilisin CP-1) in the culture broth. The molecular weight of subtilisin CP-1 was estimated to be 28 kDa. Subtilisin CP-1 was optimally active at pH 9.0 and $45^{\circ}C$, and exhibited high specificity for Meo-Suc-Arg-Pro-Tyr-pNA (S-2586), a synthetic chromogenic substrate for chymotrypsin. The first eight amino acid residues of the N-terminal sequence of the enzyme are AQSVPYGI; this sequence is identical to that of subtilisin NAT and E.
This study was aimed to investigate the contents of flavonoids and the biological activity of fermented beverage of medical plants, DeulBit (DB). 50 g of Cassia semen (Cassia tora L.), 50 g of Omija (Schisandra chinensis Baillon.), 50 g of Gugija (Lycium chinense Mill), 50g of Menthae herba, 75 g of Chrysanthemum indicum Linne, 25 g of Dioscorea batatas, 5 g of Lindera obtusiloba Blume, 150 g of Polygonatum odoratum, 25 g of Glycyrrhiza uralensis, 25 g of Acanthopanacis cortex, 100 g of green tea (Camellia sinensis), and 100 g of Laminaria japonica was fermented with sucrose ($50.0{\sim}60.0^{\circ}Brix$.) and 0.5% of deep sea water in 10 L of distilled water for six months at room temperature. Total flavonoids contents of DB was calculated to $3.4{\pm}0.5\;{\mu}g/g$ and antioxidative activity of DB was measured by using DPPH radical scavenging and SOD-like activity. DPPH radical scavenging and SOD-like activity of DB was 96% and 29% at 100% of DB, respectively. In addition, DB indicated about 88% and 66% of the xanthine oxidase and angiotensin converting enzyme inhibitory activities at 1% and 10% of DB, respectively and showed fibrinolytic activity. Nitric oxide (NO) synthesis was increased to 15 times by addition of DB. In addition, NO productions of the macrophages RAW264.7 cells stimulated with lipopolysaccharide (LPS) were reduced to 40.4% by addition of DB. These results suggested that DB is significant role for antioxidative and fibrinolytic activity, and have the strong xanthine oxidase and angiotensin converting enzyme inhibitory activities.
Shrimp Jeot-Gal is a popular traditional Korean fermented seafood and has been used for seasoning. We isolated a bacterium showing strong extra-cellular fibrinolysis and chitinase activity from shrimp Jeot-Gal and the strain was designated SC082. SC082 was identified as Bacillus licheniformis by 16S rRNA sequence homology search. B. licheniformis SC082 exhibited optimum temperature, pH, and salt concentration at $37^{\circ}C$, pH 7.0, and 6%, respectively. Substrate specificity of the culture supernatant from B. licheniformis SC082 was detected in fibrin, skim milk, and chitin plate. The fibrinolytic activity was highly maintained up to $50^{\circ}C$ at a pH of 7.0 for 3 hr and was stable up to pH 9.0 at $37^{\circ}C$ for 3 hr. The chitinase activity was remarkably induced by addition of 1.0% colloidal chitin and the pH and temperature optima of the enzyme were 5.0 and $45^{\circ}C$, respectively. In sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and zymogram analysis, this strain produced three fibrinolytic isozymes and two chitinase isozymes. The approximate molecular weights of the putative fibrinolytic enzymes were 23.0, 62.0, and 72.0 kDa and those of the chitinases were 62.0 and 55.0 kDa, respectively. The antioxidant activity of SC082 was also measured by using 2,2-diphenyl-l-picryl-hydrazyl (DPPH) free radical. The DPPH radical scavenging was slightly increased in a dose-dependent manner.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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