• 한국식품과학회지
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• 제30권6호
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• pp.1464-1469
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• 1998

3-Chloro-1,2-propanediol (3-MCPD), 1,3-dichloro-2-propanol (1,3-DCP), 2,3-dichloro-1-propanol (2,3-DCP)과 같은 chloropropanol들이 일부 식품에서 검출됨으로서 위해성 논란이 제기되었기에 본 연구에서는 Ames test와 SOS Chromotest를 이용하여 미생물 시험계에서의 chloropropanol류의 유전독성 및 변이원성을 검토하였다. E. coli PQ37에서는 1,3-DCP를 제외한 3-MCPD와 2,3-DCP는 뚜렷한 용량반응 관계를 보이며 SOS반응 유도활성을 나타내어 유전독성이 있는 것으로 판단되었고 3-MCPD보다는 2,3-DCP가 강한 유도활성을 나타내었다. 또한 E. coli PQ35 (PQ37 $uvrA^+)$에서는 SOS반응 유도활성이 E. coli PQ37에서 보다 매우 낮은 반면에, E. coli PQ243 (PQ37 tagA alkA)에서는 매우 높게 나타남으로서 이들 물질에 의하여 유도되는 DNA 손상은 절제수복에 의해 수복될 수 있는 손상과 절제수복에 의해 수복되지 않으며 adaptive response를 유도할 수 있는 3-methyladenine 또는 이와 유사한 손상 등이 작용하는 것으로 나타났다. S. typhimurium TA100을 이용한 Ames test에서도 3-MCPD와 2,3-DCP는 뚜렷한 용량반응 관계를 보이며 강한 돌연변이원성을 나타내었으나 SOS Chromotest에서와는 달리 1,3-DCP 또한 돌연변이원성을 나타냈으며, 변이활성정도는 2,3-DCP>3-MCPD>1,3-DCP의 순으로 나타났다. 그러나 S. typhimurium TA98과 TA97a에서는 돌연변이활성이 미미하게 나타남으로서 chloropropanol류에 의한 돌연변이는 주로 염기치환에 의한 작용임을 알 수 있었다. 한편, S. typhimurium TA1535 (-R factor plasmid)에서 3-MCPD와 2,3-DCP의 돌연변이활성이 S. typhimurium TA100에 있어서 보다 상당히 낮은 결과로부터 이들 물질에 의한 돌연변이 유발은 주로 SOS수복 의존성인 것으로 나타났다. Amestest와 SOS Chromotest의 결과를 종합하여 볼 때 3-MCPD와 2,3-DCP는 3-methyladenine 또는 이와 유사한 DNA 손상에 의한 SOS수복 비의존성 돌연변이 및 SOS반응 유도성 손상, 특히 절제회복에 의해 쉽게 제거될 수 있는 손상에 의한 SOS수복 의존성 돌연변이를 동시에 일으키는 것으로 사료된다.

• 핵의학기술
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• 제14권2호
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• pp.45-49
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• 2010

뇌조 조영술에 이용되는 방사성의약품들 중 최근에는 Tc-99m DTPA를 이용한 뇌 척수액 영상이 대부분이다. 하지만 Tc-99m DTPA는 사용 시 무균수막염, 근육강직, 경련 등 여러 부작용이 발생할 우려가 있다. 따라서 Tc-99m DTPA의 이러한 부작용의 발생을 사전에 예방하기 위하여 안정성검사를 시행하였으며 그 유용성을 알아보고자 한다. 방사성의약품 Vial검사는 2008년 12월 16일 - 2009년 12월 30일에 뇌조조영술을 시행한 환자(n=12)를 대상으로 시행하였으며, 시술시 사용한 vial내의 DTPA 성분 (Mallinckrodt사의 Techscan-DTPA사용), NaPertechnate radiation dose 및 volume, 생리 식염수량, 환자주사용 용량 및 activity 등을 측정하여 순수 DTPA의 양을 계산하였다. 방사성의약품의 내독소평가(Bacterial endotoxin)는 2008년 12월 16일-2009년 12월 30일에 뇌조 조영술을 시행한 환자(n=12)를 대상으로 하였고, 이 때 사용한 DTPA vial의 Pyrogen test (LAL test)를 시행하였다. 시약이 함유된 Positive/Negative control vial(표준액)에 normal saline 0.2 mL을 주입하고, 동일한 Test control vial(실험액)에 normal saline 0.1mL 와 Tc-99m DTPA 0.1 mL로 주입하였으며 Digital hot plate에서 $37.5^{\circ}C$로 1시간 반응시킨 후 응고여부를 표준액과 대조하여 관찰하였다. 안정적인 제조절차 준수는 보존제(방부제)가 없는 미 개봉한 CaNa3 DTPA kit를 사용하였으며 Tc-99m DTPA는 한 Vial당 한명의 환자선량으로 뽑아 투여한다. 이때 적정 용량을 맞추기 위해 0.9% NaCl 멸균 생리 식염수를 사용하여 희석하였다. 방사성의약품 Vial검사는 측정된 성분값들로 순수 DTPA의 양을 얻어내었으며 이는 2가지의 계산식을 이용하여 선량 대비 DTPA의 용량(평균 0.88 mg), 용량 대비 DTPA의 용량(평균 0.74 mg)을 도출해내었다. 방사성의약품의 내독소 평가에서는 동일한 조건으로 시험(n=12)을 시행한 결과 모두 Bacterial endotoxin이 기준치인 단위 선량 당 14 endotoxin units (EU)미만의 반응인 Negative(-)로 나왔다. 안정적인 제조절차 준수에서는 검사 관련 sheet를 만들어 작성 및 제조절차 준수 여부를 확인하였으며 결과 모두 준수하여 제조과정 내에서 방사성의약품에 의하여 발생할 수 있는 부작용이 없었다. Tc-99m DTPA를 이용한 Cisternography 검사 시 항상 방사성의약품의 안정성문제가 제기되어 왔다. 수막강 내 주입용 방사성의약품으로서 제조 및 사용 시 불안정한 취급으로 부작용이 발생할 우려가 있으며, 이에 따른 사용지침이 확립되어야 한다고 생각되었다. 수막강 내 주입용 방사선의약품으로써 free acid 혹은 sodium을 포함하는 DTPA는 적절하지 않으며, 반면 Calcium이 포함된 DTPA는 적절한 것으로 알려져 있다. 위와 같이 Techscan-DTPA(Mallinckrodt): CaNa3으로 간단하며 편리하게 안정성검사를 시행할 수 있었으며 각 검사결과(n=12) 안정성검사를 모두 통과하여 검사 시 동반될 수 있는 부작용은 나타나지 않았다. 앞으로 위와 같은 SOP (Standard Operating Procedures)를 적용하여 보다 쉽고, 편리하게 안정성검사를 시행할 수 있으리라 사료된다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제25권2호
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• pp.162-169
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• 2010

식품위생법개정에 의한 음식점 식육 원산지 표시제가 시행됨에 따라 표시제도의 정착을 위해 마련한 과학적 한우판별 시험법을 이용하여 소고기 원산지 표시제에 대한 실패를 전국적 규모로 점검하였다. 본 연구에 사용한 한우판별시험법은 앞선 사업에서 검증된 90개의 한우판별용 SNP 바이오마커를 이용한 시험방법으로 소고기원산지표시제의 제도정착에 큰 기여를 하고 있다. 2009년도 식품안전관리지침에 계획도니 음식점 소고기 원산지 표시제 시행 대상 음식점으로는 구이용 쇠고기 판매 음식점으로서 영업장 면접이 $100m^2$이상인 곳 가운데 서울지역 48개 시료 및 지방 168개 시료 등 총 216건에 대하여 원산지 표시실태 모니터링 검사를 실시하였으며, 그 결과 총 검체의 1.3% (3건/216건)가 허위표시임이 파악되었다. 이는 2008년도의 모니터링 검사를 통하여 확인한 허위표시 비율인 5.14%에 비해 감소한 결과로 "음식점식육원산지표시제"가 점차 정착되고 있는 것으로 판단된다. 또한, 한우판별시험법이 마련되기 전 실시했던 음식점 소고기 원산지 표시에 대한 모니터링 실시결과 2005년 34.0%, 2006년 30.1%으로 나타난 반면 한우판별시험법이 확립된 후 모니터링 결과는 2007년도 3.2%, 2008년도 5.14%으로 나타나 한우판별시헙법의 확립이 음식점 소고기 원산지 표시제에 큰 기여를 하고 있음을 증명해 주고 있다.

• 한국가축번식학회지
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• 제15권2호
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• pp.133-139
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• 1991

This stduy was carried out in order to investigate the effects of concentration and equilibration time of cryoprotective agents on survival rate of slow and ultrarapidly frozen in vitro fertilized bovine embryos. In vitro fertilized bovine embryos, following dehydration by cryoprotective agents and sucrose, were slowly freezed(from 2$0^{\circ}C$ to -7$^{\circ}C$/-1$^{\circ}C$/min., from -7$^{\circ}C$ -35$^{\circ}C$/-0.2$^{\circ}C$/min. from -35$^{\circ}C$ to -38$^{\circ}C$/-0.3$^{\circ}C$/min.) by cell freezer and directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 38$^{\circ}C$ water. Survival rate was defined by development rate to the morula and blastocyst stage after in vitro cultured and FDA test. The results are summarized as follows : 1. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after slow frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol＋2.0M propanediol were 84.3%, 85.9%, 77.8%, 74.3%, respectively. 2. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after slow frozen-thawing in the freezing of 0.50M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol＋2.0M propanediol were 83.8%, 85.1%, 71.4%, 74.6%, respectively. 3. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing of 0.25M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol＋3.0M propanediol were 69.3%, 70.8%, 63.2%, 67.1%, respectively. 4. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing of 0.25M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol＋2.0M propanediol were 69.4%, 70.1%, 62.3%, 63.5%, respectively. 5. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after slow and ultrarapid fromthawing in the freezing medium of sucrose added cryoprotective agents were not significant difference between 5min. and 10min. of equilibration time.

• 한국가축번식학회지
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• 제15권2호
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• pp.141-147
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• 1991

This stduy was carried out in order to investigate the effects of cryoprotective concentration and equilibration time on survival rate of ultrarapidly frozen in vitro fertilized bovine embryos. In vitro fertilized bovine embryos, following dehydration by cryoprotective agents and sucorese were directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 38$^{\circ}C$ water. Survival rate was defined by development rate to the morula and blaqstocyst stage after in vitro culture of by FDA test. The results are summarized as follows : 1. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucroese added 2.0M, 2.5M, 3.0M, 3.5M, 4.0M glycerol were 75.0%, 72.0%, 67.6%, 44.8% and 18.3% respectively. 2. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.0M, 2.5M, 3.0M, 3.5M, 4.0M DMSO were 64.0%, 66.7%, 70.8%, 52.7% and 18.6, respectively. 3. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.0M, 2.5M, 3.0M, 3.5M, 4.0M propanediol were 68.4%, 64.9%, 63.2%, 62.2% and 34.7%, respectively. 4. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 2.50M glycerol added 0.1M, 0.25M, 0.5M, 0.75M, sucrose were 60.5%, 72.2%, 70.1% and 54.9%, respectively. The survival rate of in vitro fertilized embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 2.5M glycerol added 0.25M sucrose were higher than concentration of 0.10M, 0.50M and 0.75M sucrose. 5. The equilibration time on the survival rate of in vitro fertilized bovine embryos was attained after short period of time(2.5~5min.) in the freezing medium added 0.25M sucrose and 3.0M DMSO higher than long period time(1~20min.).

• 한국수정란이식학회지
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• 제17권1호
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• pp.61-65
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• 2002

한우 미성숙 난자의 vitrification 동결시 발생단계별 생존성과 체외발생율을 알아보고자 난자를 0, 10, 14 및 20시간 성숙배양시킨 후 vitrification 동결 융해 후의 체외발생율을 조사하였다 본 연구에서 나타난 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 0, 10, 14 및 20시간 성숙배양시킨 난자를 vitrification 동결보존 후 MR 단계로의 발생율은 각각 33.3%, 55.0%, 68.3% 73.3%였으며, diploid로의 발생율은 26.7%, 21.7%, 6.7%, 1.7%로서 대조군의 M II 단계의 78.2%에 비해 낮게 나타났으나 diploid단계의 3.6%에 비해서는 높게 나타났다. 2. 미성숙 난자를 0, 10, 14 및 20시간 성숙배양 시킨 후 vitrification 동결 응해 후의 생존율은 각각 38.0%, 30.0%, 20.0% 및 12.0%로서 비동결 대조군의 48.0%에 비해 낮은 생존율을 나타냈다. 3. 미성숙 난자를 0, 10, 14 및 20시간 성숙배양 시킨 다음 vitrification동결 응해 후 수정하였 때 체외수정율은 64.6%, 61.6%, 54.8%, 32.3% 였으며, 배 반포로의 체 외 발생 율은 각각 32.3%, 21.7%, 14.5%, 4.6%로서 대조춘의 80.0%와 55.0%에 비해 낮은 체외수정율과 체외발생율을 나타냈다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제16권1호
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• pp.23-28
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• 2003

The present study was undertaken to investigate the effects of PVP concentration and exposure temperature to vitrification solution on the post-thaw survival, in vitro maturation and development of immature bovine oocytes (germinal vesicle stage). The vitrification solution (VS) consisted of 40% ethylene glycol (EG)+0.5 M sucrose (S)+10% FBS. PVP was added to VS: 0%, 5% or 10%. The cumulus-oocyte complexes (COCs) were diluted in VS as one step, after 2 min the COCs were loaded in straw and vitrified by direct immersion into liquid nitrogen. For thawing, the straws were plunged into $30^{\circ}C$ water bath for 10s. After thawing, the oocytes were diluted in 0.5 M (in DPBS with 10% FBS) sucrose solution for 5 min. The survival rate (FDA-test and trypan blue) of immature bovine oocytes was measured. The survival rate was higher in 5% PVP (91.5%) than in 0% (64.2%) or in 10% PVP (79.7%). The proportion of metaphase II formation was 69.35% in control (no vitrified COCs), 9.3% in 40% EG+0.5 M S+0% PVP and 21.05% in 40% EG+0.5 M S+5% PVP (p<0.05). The effect of room temperature ($25^{\circ}C$ for 10 min) and cold temperature ($4^{\circ}C$ for 10 min) on COCs were determined in this study. After IVF, the cleavage and blastocysts rate of oocytes exposed to room temperature and cold temperature in VS+5% PVP was significantly different (2 cell: 63.20% vs 37.97%, blastocysts: 18.40% vs 2.53%). The cleavage rates of frozen-thawed oocytes were 20.53% with PVP and 22.13% without PVP (p>0.05). Two out of 151 oocytes (1.32%) developed to blastocyst stage after frozen-thawed with 5% PVP (p>0.05). Development of oocytes after frozen-thawing to the 2 cell were not significantly affected with or without PVP following IVF. However, the vitrification of immature bovine oocytes with PVP maintained the ability to develop to the blastocyst stage after IVM-IVF and IVC, while no blastocysts were obtained from oocytes vitrified without PVP. These results suggested that PVP has a protective role for vitrification of immature bovine oocytes as far as survival is concerned, however, the protection was not sufficient enough to support blastocyst formation.

• 한국환경독성학회:학술대회논문집
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• 한국환경독성학회 2002년도 추계국제학술대회
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• pp.168-168
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• 2002

To establish a test protocol for the rodent 20-day thyroid/pubertal assay, flutamide and diethylstilbestrol (DES) were administered to intact male Sprague-Dawley rats from postnatal day 33 for 20 days. Flutamide (1, 5, and 25 mg/kg/day) or DES (10, 20, and 40 ug/kg/day) was given once daily by oral gavage to immature male rats. Prepuce separation was significantly delayed in flutamide group and in DES group. One day after the last dose, the rats were killed and pituitary, thyroid, and reproductive organs were removed and weighed. Flutamide treatment resulted in a significant reduction in the weights of epididymides, ventral prostate, seminal vesicles plus coagulating glands and fluid (SVCGF), levator ani. bulbocarvenus muscles (LABC), Cowper's glands, and glans penis. The weight of adrenal glands decreased at % mg/kg/day, while testes and any other organ weights were unaffected. No microscopic changes were observed in the thyroid glands. Serum levels of testosterone wert significantly increased in the flutamide-treated groups and serum levels of estradiol were also increased. A significant reduction in the weights of testes, epididymides, ventral prostate, SVCGF, LABC, Cowpers glands, and glans penis of DES treated group. Serum testosterone and LH decreased significantly in DES group. Decrease of estradiol was observed, but not significant. These results indicate that flutamide and DES delay puberty in the male rat and its mode of action appears to be via altered secretion of steroids, which subsequently affect the development of the reproductive tract. (Supported by the grant from NITR/Korea FDA for Endocrine Disrupter Research.)

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제23권5호
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• pp.486-492
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• 2015

Drug metabolism mostly occurs in the liver. Cytochrome P450 (CYP) is a drug-metabolizing enzyme that is responsible for many important drug metabolism reactions. Recently, the US FDA and EU EMA have suggested that CYP enzyme induction can be measured by both enzymatic activity and mRNA expression. However, these experiments are time-consuming and their interassay variability can lead to misinterpretations of the results. To resolve these problems and establish a more powerful method to measure CYP induction, we determined CYP induction by using luminescent assay. Luminescent CYP assays link CYP enzyme activity to firefly luciferase luminescence technology. In this study, we measured the induction of CYP isozymes (1A2, 2B6, 2C9, and 3A4) in cryopreserved human hepatocytes (HMC424, 478, and 493) using a luminometer. We then examined the potential induction abilities (unknown so far) of mesalazine, a drug for colitis, and mosapride citrate, which is used as an antispasmodic drug. The results showed that mesalazine promotes CYP2B6 and 3A4 activities, while mosapride citrate promotes CYP1A2, 2B6, and 3A4 activities. Luminescent CYP assays offer rapid and safe advantages over LC-MS/MS and qRT-PCR methods. Furthermore, luminescent CYP assays decrease the interference between the optical properties of the test compound and the CYP substrates. Therefore, luminescent CYP assays are less labor intensive, rapid, and can be used as robust tools for high-throughput CYP screening during early drug discovery.

• 한국식품과학회지
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• 제40권1호
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• pp.101-105
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• 2008

시판되고 있는 선식 원료를 수거하여 최근 새로운 식중독균으로 보고되고 있는 Enterobacter sakazakii 분리 실험을 실시하였다. 그 결과 총 23종의 선식 원료 중 8개의 선식 원료에서 E.sakazakii로 추정되는 콜로니를 분리할 수 있었으며 API 20E kit를 이용하여 1차적으로 동정한 결과, 다시마 분말, 멸치 분말, 현미 분말, 청국장 분말 및 멥쌀 분말에서 E. sakazakii를 분리할 수 있었다. 이후 3 종의 primer를 이용한 PCR을 실시하여 2차적으로 동정하였다. 또한, 분리된 균주에 대한 RAPD-PCR을 실시하여 최종적으로 8종의 분리균으로 molecular typing을 할 수 있었다.