The recombinant lysozyme-HJL34 proteins were expressed and purified using commercial Escherichia (E.) coli expression system. Stx2e+ F18+ E. coli, Actinobacillus pleuropneumoniae (APP), Streptococcus (S.) suis, and Clostridium (C.) perfringens strains were isolated from pigs. The minimum inhibitory concentrations (MICs) of the recombinant lysozyme-HJP34 proteins were examined by means of the microtiter plate method, according to the NCCLS recommendations. The possibility of its as the alternatives to antibiotics was tested in piglets. The MICs were determined as 75 ㎍/mL, 300 ㎍/mL, 75 ㎍/mL, 35.5 ㎍/m against Stx2e+ F18+ E. coli, APP, S. suis, C. perfringens, respectively. A total of 25 piglets were divied 5 groups. The piglets in group A~C were fed with commercial feed and those in groups D, E were fed with commercial feedstuff. All piglets in groups B~E were challenged with virulent Stx2e+ F18+ E. coli, APP, S. suis strains. Groups C and D were treated with antimicrobial from 24 h after challenge. All piglets in group B died within 3 days after challenge. Among 5 piglets in groups C and D piglets, 80% survived after challenge. Among group E piglets, 60% were alive until the end of this study. Therefore, this study indicates that recombinant lysozyme-HJP34 proteins is a suitable possibility as a feed additive for reduction of diseases by bacterial pathogens in piglet feed.
고상 반응법을 이용하여 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$$Co_{0.2}$F $e_{0.8}$$O_{3-}$$\delta$/ 및 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분말을 합성하고 혼합전도체 분리막을 소결하여 제조하였다. 제조된 분리막들은 정확한 페롭스카이트 결정구조를 나타내었으며, 95% 이상의 높은 상대밀도를 나타내었다. 산소이온 변환 능력을 향상시키기 위해 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ disk의 양 표면에 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$Co $O_{3-}$$\delta$/ paste를 스크린 프린팅 방법으로 코팅하였으며 코팅 막은 비교적 치밀한 미세구조를 나타내었다. 코팅되지 않은 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$$Co_{0.2}$F $e_{0.8}$$O_{3-}$$\delta$/ 및 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막과 코팅된 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막의 산소투과 성능을 비교 실험한 결과, 90$0^{\circ}C$에서 L $a_{0.6}$S $r_{0.4}$$Co_{0.2}$F $e_{0.8}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막이 정상상태에서 0.266 mL/min.$\textrm{cm}^2$로 가장 많은 투과량을 보였으며 코팅된 L $a_{0.7}$S $r_{0.3}$G $a_{0.6}$F $e_{0.4}$$O_{3-}$$\delta$/ 분리막의 정상상태 산소 투과 유속은 최고 0.19 mL/min.$\textrm{cm}^2$ 정도로 코팅되지 않은 분리막에 비해 약 2~3배로 높게 나타났다.정도로 코팅되지 않은 분리막에 비해 약 2~3배로 높게 나타났다.코팅되지 않은 분리막에 비해 약 2~3배로 높게 나타났다. 높게 나타났다.
In this study, we investigated the electromagnetic Properties of M $n_{Y}$Z $n_{1-x}$ F $e_{x}$$O_4$(X=0.67~0.69, Y=0.13~0.19) doped with and without H $o_2$$O_3$(each of 0.05~ 0.2wt%, step 0.05wt%). The greatest initial permeability of composition is M $n_{0.17}$Z $n_{0.16}$F $e_{0.67}$$O_4$. As X and Y components, increased. generally resistivity slightly change by the various X and Y components. The initial permeability of M $n_{0.17}$Z $n_{0.16}$F $e_{0.67}$$O_4$ doped with H $o_2$$O_3$ showed the about 2.5 times higher than that of M $n_{0.17}$Z $n_{0.16}$F $e_{0.67}$$O_4$ doped without H $o_2$$O_3$EX>EX>EX>X>>EX>EX>EX>X>
In this paper, the stress intensity factors at the crack tips in a finite plate having a straight crack with arbitrary lengths and directions are analyzed by means of Boundary Collocation Method in Cartesian coordinates under the following two cases. A) Case of only considering stress components at the boundary collocation points B) Case of considering stress resultant at the boundary, in addition to case of )A) and analyzed by means of F.E.M. To certify the Boundary Collocation Method the solutions of B.C.M. are compared with the solutions of F.E.M. demonstrates the simplicity of input data preparation and the reduction of cpu time against F.E.M.
In [25] Taskinen shows that if $\{E_n\}_n\;and\;\{F_n\}_n$ are two sequences of Frechet spaces such that ($E_m,\;F_n$) has the BB-property for all m and n then (${\Pi}_m\;E_m,\;{\Pi}_n\;F_n$) also has the ΒΒ-property. Here we investigate when this result extends to (i) arbitrary products of Frechet spaces, (ii) countable products of DFN spaces, (iii) countable direct sums of Frechet nuclear spaces. We also look at topologies properties of ($H(U),\;\tau$) for U balanced open in a product of Frechet spaces and $\tau\;=\;{\tau}_o,\;{\tau}_{\omega}\;or\;{\tau}_{\delta}$.
Both the SS41 steel and the M.E.F(martensite encapsulated islands of frrite) dual phase steel made of SS41 steel by heat treatment were welded by friction welding, and then manufactured machinemade Vnotch standard Charpy impact specimens and precracked with a fatigue system at BM(base metal), HAZ(heat affected zone) and WZ(weld interface Zone). The impact test of them was performed with an instrumented impact test machine at a number of temperatures in constant loading velocity and the dynamic fracture characteristics were studied on bases of the absorbed energy, dynamic fracture toughness and fractography from the test. The results obtained are as follows; At the room temperature, the absorbed energy is HAZ.geq.WZ.geq.BM in case of the M.E.F. dual phase steel: BM.geq.HAZ.geq.WZ in case of the SS41 steel, HAZ.geq.BM.geq.WZ at the low temperature. The absorbed energy is decreased markedly with the temperature lowering; it is highly dependent on the temperature. The dynamic fracture toughness of the M.E.F. dual phase steel is HAZ.geq.WZ.geq.BM at the room temperature; BM.geq.WZ.geq.HAZ below-60.deg. C. Therefore the reliability of friction welding is uncertain at the low temperature(below-60.deg. C). The dynamic fracture toughness of the SS41 steel; HZA.geq.WZ.geq.BM at overall temperature region. The flaw formed by rotational upsetting pressure was shown y SEM; in this region. The absorbed energy per unit area and dynamic fracture toughness were low relative to other region.
Kim, Tae-Hyun;Namgoong, Suk;Kwak, Joon-Hyeok;Lee, Se-Yong;Lee, Heung-Shick
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권6호
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pp.789-796
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2000
In order to analyze the effects of tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL expression in a tryptophan-producing Escherichia coli, a series of plasmids carrying the genes were constructed. Introduction of tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL into the E. coli strain resulted in approximately 10-20 fold increase in the activities of transketolase, the feedback inhibition-resistant 3-deoxy-D-arabinoheptulsonate-7-phosphate synthase, and shikimate kinase. Expression of $aroF^{FBR}$ in the aroB mutant strain of E. coli resulted in the accumulation of 10 mM of 3-deoxy-D-arabinoheptulsonate-7-phosphate (DAHP) in the medium. Simultaneous expression of tktA and $aroF^{FBR}$ in the strain further increased the amount of excreted DAHP to 20 mM. In contrast, the mutant strain which has no gene introduced accumulated 0.5 mM of DAHP. However, the expression of tktA and $aroF^{FBR}$ in a tryptophan-producing E. coli strain did not lead to the increased production of tryptophan, but instead, a significant amount of shikimate, which is an intermediate in the tryptophan biosynthetic pathway, was excreted to the growth medium. Despite the fact that additional expression of shikimate kinase in the strain could possibly remove 90% of excreted shikimate to 0.1 mM, the amount of tryptophan produced was still unchanged. Removing shikimate using a cloned aroL gene caused the excretion of glutamate, which suggests disturbed central carbon metabolism. However, when cultivated in a complex medium, the strain expressing tktA, $aroF^{FBR}$, and aroL produced more tryptophan than the parental strain. These data indicate that additional rate-limiting steps are present in the tryptophan biosynthetic pathway, and the carbon flow to the terminal pathway is strictly regulated. Expressing tktA in E. coli cells appeared to impose a great metabolic burden to the cells as evidenced by retarded cell growth in the defined medium. Recombinant E. coli strains harboring plasmids which carry the tktA gene showed a tendency to segregate their plasmids almost completely within 24h.
일반적으로 Streptomyces류는 성장이 늦고 유지가 어려운 반면, E. coli는 배양기간이 짧고 유전자 조작도 간편한 장점이 있기 때문에, E. coli를 이용하여 유용단백질을 생산하는 연구가 일반적인 흐름이다. 그러나 E. coli에서 외래유전자를 도입하여 대량으로 생산을 시키는 경우에 비용해성의 inclusion body를 형성하는 경우가 많으므로 용해성의 활성형 단백질을 생산하기 위하여는 여러 가지 조건을 고려하여야 한다. 본 논문에서는 aklavlnone 11-hydroxylase gene(dnrF)을 E. coli BL2l에서 발현시킬 때의 배양조건을 배양온도와 IPTG농도의 두가지 요소를 조합하여 변형시키는 방법으로, 활성형 단백질의 생산을 최대화하고 inclusion body의 형성을 최소화하는 배양조건을 조사하였다. 그 결과, 37$^{\circ}C$에서 배양했을 때에는 0.02mM의 IPTG를 첨가하였을 때 inclusion body를 가장 적게 만들고, 그에 따라 생산되는 효소활성도 가장 높았다. 반면, 28$^{\circ}C$로 배양온도를 낮추었을 때에는 0.06mM의 IPTG를 첨가하였을 때 aklavinone 11-hydroxylase효소가 최대로 생산됨을 SDS-PAGE 및 효소 활성측정으로 확인하였다. IPTG농도를 0.1 mM로 높인 경우에는 28$^{\circ}C$, 37$^{\circ}C$에서 모두 aklavinone 11-hydroxylase효소가 과발현되어 Inclusion body를 가장 많이 생성하였음을 알 수 있었다. 방선균에서 동일 유전자를 대량발현시키는 경우 발현된 단백질의 효소 활성은 있으나 SDS-PAGE상에서의 단백질의 관찰이 불가능하였고, 동시에 단백질의 정제시 효소활성이 소실되어 정제가 불가능하였다. 이러한 효소 활성의 소실의 원인은 세포내의 어떤 저분자물질일 것으로 추정되며 본 연구에서 제작한 antibody를 이용하면, 효소의 정제가 용이하게 수행될 것이다. 특히 대장균계에서의 활성형 효소의 최적발현조건에서 세포를 배양하거나, inclusion body의 refolding을 실시한 후, 항체를 이용한 Western blot assay를 지표로 효소를 정제하면, 미지의 cofactor의 정체도 밝혀지고 aklavinone 11-hydroxylase류의 효소 특성 연구에 큰 도움이 될 것이다. 또한 이 효소를 이용한 다양한 종류의 bioconversion을 실시하여 그동안 background 때문에 생성된 product의 검출이 불가능했었던 소량의 생성산물의 분석도 가능할 것으로 판단되어 금후의 bioconversion연구에 기대하는 바가 크다.
The Gibbs free energy of formation of $BaThO_3$ from elemental oxides has been measured at temperatures between 853 and 903 K using a $CaF_2$ solid electrolyte galvanic cell. The galvanic cell consisted of Pt, $O_2, CaO+CaF_2 \parallel CaF_2 \parallelBaThO_3+ThO_2+BaF_2, O_2$, Pt EMF gave the standard Gibbs free energy for the reaction $CaF_2+BaThO_3=CaO+BaF_2+ThO_3$ as $\DeltaG^o$,/TEX>=124111.031-117.597 T(J/mol).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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