Kim, Eun-Ji;Talha, Nabeel A.H.;Jeon, Yu-Byeol;Yu, Il-Jeoung
Journal of Animal Reproduction and Biotechnology
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v.34
no.1
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pp.57-63
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2019
This study was conducted to find out the effect that ${\kappa}-Carrageenan$ has on the properties of dog sperm when it was added to the cryoprotectant. Extender basically was contained 1.21 g Trizma base, 0.67 g citric acid, 0.4 g glucose, 0.03 g penicillin G, 0.05 g streptomycin sulfate. Extender1 was added with 0.1%, 0.2%, 0.3%, and 0.5% carrageenan, while extender2 was supplemented with glycerol. After freezing-thawing, the motility, viability, acrosome integrity, apoptosis, and ROS (reactive oxygen specifications) of sperm were measured to analyze the effects of the supplementation of carrageenan. Total Motile (TM), Rapid Progressive Motile (RPM), Medium Progressive Motile (MPM), and Immotile were measured through the CASA system after thawing in 37 degree water. Extender with 0.2% ${\kappa}-carrageenan$ ($64.26{\pm}0.49$) was significantly higher than control ($40.24{\pm}8.27$) (p < 0.05). RPMs of extender with 0.1%, 0.2% ${\kappa}-carrageenan$ ($57.64{\pm}6.34$, $56.47{\pm}1.35$) were significantly higher than the other groups (p < 0.05). Acrosome integrity was measured by dyeing to PSA-FITC with an epifluorescence microscope. Normal acrosome ratio of extender with 0.5% ${\kappa}-carrageenan$ ($61{\pm}8.03$) was higher than the other groups (p < 0.05). Apoptosis was measured with a FACSCalibur flow cytometer using FITC (FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit). Treated groups of ${\kappa}-carrageenan$ of 0.1% ($0.81{\pm}0.05$), 0.2% ($0.85{\pm}0.05$) were significantly higer (p < 0.05) than control. Modified SYBR/PI staining was used for determination of viability and DCF staining was used for evaluation of ROS. Viability and ROS were not significantly different from other groups. In conclusion, adding a certain concentration of carrageenan to the extender of cryopreservation, carrageenan contributes to the improvement of the sperm motility, acrosome integrity and prevention of apoptosis.
The Transactions of the Korean Institute of Electrical Engineers P
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v.59
no.1
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pp.77-82
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2010
This study evaluated the characteristics and reliability of an auger crane with a built-in hydraulic extender. The field test of the hydraulic extender was performed with the hydraulic lines filled with hydraulic fluid and free of air. The pressure generated during the test was measured with a digital pressure gauge. The crane was considered to have undergone one cycle of the excavation process after it had performed excavation under three conditions at the same location. This process was performed three times in total. From the results of the excavation using the hydraulic extender, it was found that the maximum pressure and torque measured were 19.9 [MPa] and 895.4 [$kgf{\cdot}m$], respectively. The rotation force of the auger crane generated at this time signifies a horizontal force. If the excavation diameter of the auger crane is increased, the rotation speed is reduced causing the circumferential speed to also be reduced. The torsional shear stress of the extendable auger crane was calculated to be approximately 23.5 [MPa]. However, the rotation shaft material used for this system was carbon steel for machine structural use (SM45C). Since the minimum torsional yield stress is greater than 150 [MPa] according to KS D 3752, it means the equipment has secured a safety factor greater than 6. Therefore, it was found that when performing work using the extendable auger crane, it exhibited no problems with the safety and reliability of its shaft.
The objective of this study was to evaluated the efficiency of sperm cryosurvival using each extenders Triladyl and LEY containing egg yolk to the cryopreservation of separated sperm by percoll in miniature pig. The ejaculated semen from miniature pig was separated by 65% percoll and un-separated sperm as a control before freezing. The freezing of diluted semen added with Triladyl containing egg yolk and LEY solution (solution I: 11% Lactose or Triladyl + egg yolk; solution II: solution I + glycerol + OEP). Analysis of sperm ability was estimated by viability, capacitation acrosome reaction using chlortetracycline (CIC) the morphologic abnormality and hypoosmotic swelling test(HOST). The groups were designed that as separated sperm by Percoll with Triladyl(ST) or LEY(SL) for cryopreservation. And unseparated sperm with Triladyl(UT) or LEY(UL). As a results, the viability was higher significantly(p<0.05) in ST, SL, UT than UL extender. The morphologic abnormality was measured significantly (p<0.05) lower in ST than other extenders. The AR-patterned in CTC analysis was measured significantly(p<0.05) lower in SL and UL than other extenders. In conclusion, using Triladyl extender resulted in viability and morphology of separated sperm by percoll that were effective than using LEY extender, but it resulted in capacitation acrosome reaction was lower than using LEY extender.
This study was conducted to discuss the effects of hardener and extender contents on peak temperature, reaction enthalpy (${\Delta}H$), gelation time, viscosity change, and pH value in three types of UMF (urea-melamine- formaldehyde) resin with the help of perpHecT LogR meter, differential scanning calorimetry (DSC), and advanced rheometric expansion system (ARES), The results indicated that the pH value of Control A steeply decreased to 5,2 in the early stage but relatively remained constant thereafter as in Synthesis 1 and Synthesis 2, The peak temperature and time decreased as well, whereas ${\Delta}H$ and viscosity increased with the increase of hardener content. On the other hand, ${\Delta}H$ was not changed up to the extender content of 5% and then decreased with its further addition, And the pH value and peak temperature showed no change with the increase of extender content at the hardener content of 5% in three types of UMF resin, The effect of hardener content in this experiment, however, appeared more conspicuous in Control A than in the other two types of Synthesis 1 and Synthesis 2, These results might be caused by higher molecular weight with longer chains of methylene ($-CH_2-$) and methylene ($-CH_2-O-CH_2-$) ether bridges or much more branched chains in Control A.
Influence of blend mode of extender oil on the properties of thermoplastic vulcanizates (TPVs), based on an ethylene-propylene-diene copolymer (EPDM) and a polypropylene (PP), was studied. The EPDM/PP TPVs were prepared in an open roll mill using two different modes in blending sequence of paraffinic oil and phenolic curative, i.e., Oil-Cure and Cure-Oil modes. Degree of cross-linking by gel fraction and properties such as hardness, tensile strength, elongation at break, and melt flow rate were investigated as a function of extender oil content for the two modes. Little influence of the blend mode of extender oil on the degree of cross-linking and mechanical behaviors was observed. However, the use of Cure-Oil mode in the preparation of EPDM/PP TPVs resulted in a marked increase in the level of processability as reflected by melt flow index, as compared to the use of Oil-Cure mode.
In this study, we examined the effect of a liposome-based extender (Optixcell) and a tris-citric egg-yolk extender (Triladyl) on the frozen-thawed spermatozoa characteristics and the calving rate. The percentages for the total motility of the frozen-thawed spermatozoa were similar in the Optixcell and Triladyl groups. However, among the motile spermatozoa with a straight line velocity (VSL) ${\geq}25{\mu}m/sec$, the curvilinear velocity (VCL, ${\mu}m/sec$), VSL (${\mu}m/sec$), average path velocity (VAP, ${\mu}m/sec$), amplitude of lateral head displacement (ALH, ${\mu}m$), beat cross frequency (BCF, Hz), and plasma membrane integrity of the frozen-thawed spermatozoa for the Optixcell group were significantly higher than those for the Triladyl group. Furthermore, the calving rate in the Optixcell group (79.0%) was higher than that of the Triladyl group (62.8%). However, the acrosomal membrane integrity of the frozen-thawed spermatozoa in the Optixcell and Triladyl groups was not significantly different. These results indicate that semen freezing with Optixcell improved the motility and plasma membrane integrity of frozen-thawed spermatozoa and the calving rate of Hanwoo cows (native Korean cattle). In conclusion, our results suggest that semen freezing with the liposome-based extender Optixcell is more efficient than with the tris-citric egg-yolk extender Triladyl for improved offspring production.
Objective: The present study evaluated the preservation of ram semen at 0℃ using soybean lecithin with a Tris-fructose extender. Methods: Semen was collected by artificial vagina ejaculation from six rams with proven fertility. High quality ejaculates were diluted by soybean lecithin (0.25%, 0.5%, 0.75%, 1.0%, 1.25%) using Tris-fructose extender and control (Tris-fructose egg yolk extender), respectively. The ejaculates were diluted to a concentration of 5×108 sperm/mL, followed by cooling to 0℃ in 90 min and maintaining the temperature for 12 days. The diluted semen samples were examined and recorded for sperm progressive motility, acrosome integrity at 0, 24, 72, 144, 216, 288 h, respectively. Two hundred and twenty-three ewes were inseminated for 216 h with optimal soybean lecithin concentrated semen or control via trans-cervical insemination. Results: The results showed that there were no differences in sperm progressive motility at 0, 24, 72, and 144 h (p>0.05). After 216 h, the sperm progressive motility in the control group and 0.5% concentration groups was significantly higher when compared to 0.25% concentration (p<0.05). The 0.5% concentration group demonstrated the highest survival rate and had no difference with the control group (p>0.05). At 216 h, the sperm progressive motility of all groups was still above 50%. The acrosome integrity of all groups was decreased with prolongation of storage time, but there was no difference at each time point (p>0.05). There was no significant difference in the lambing rate and pregnancy rate between the 0.5% concentration group and the control group (p>0.05). Conclusion: These results suggest that ram sperm is capable of fertilization after preservation at 0℃ with 0.5% of soybean lecithin in Tris-based extender substituted for egg yolk and produce normal offspring after insemination.
Epididymal sperm cryopreservation provides a potential method for preserving genetic material from males of endangered species. This pilot study was conducted to develop a freezing method for tiger epididymal sperm. We evaluated post-thaw sperm condition using testes with intact epididymides obtained from a Siberian tiger (Panthera tigris altaica) after castration. The epididymis was chopped in Tyrode's albumin-lactate-pyruvate 1x and incubated at 5% CO2, 95% air for 10 min. The Percoll separation density gradient method was used for selective recovery of motile spermatozoa after sperm collection using a cell strainer. The spermatozoa were diluted with modified Norwegian extender supplemented with 20 mM trehalose (extender 1) and subsequent extender 2 (extender 1 with 10% glycerol) and frozen using LN2 vapor. After thawing at 37℃ for 25 s, Isolate® solution was used for more effective recovery of live sperm. Sperm motility (computerized assisted sperm analysis, CASA), viability (SYBR-14 and Propidium Iodide) and acrosome integrity (Pisum sativum agglutinin with FITC) were evaluated. The motility of tiger epididymal spermatozoa was 40.1 ± 2.0%, and progressively motile sperm comprised 32.7 ± 2.3%. Viability was 56.3 ± 1.6% and acrosome integrity was 62.3 ± 4.4%. Cryopreservation of tiger epididymal sperm using a modified Norwegian extender and density gradient method could be effective to obtain functional spermatozoa for future assisted reproductive practices in endangered species.
Objective: This study was conducted to examine influence of skimmed milk-based extender (SM), INRA 96 extender and BotuSemen Gold extender on parameters of stallions' ejaculate during storage. Methods: In this study, 14 stallions between 4 and 20 years of age were monitored. Total and progressive motility, viability and morphology of sperm were evaluated at time intervals of 24, 48, and 72 hours after collection. Results: The total motility, progressive motility, and values of sperm with normal morphology were significantly higher in the INRA 96 and BotuSemen Gold extenders than in the SM (p<0.01). The sperm viability differed significantly in all extenders (p<0.01). The highest value of sperm viability was in INRA 96 (64.69%±0.67%) and lowest in SM (59.70%±0.81%). The highest differences occurred at 72 hours of storage. Values of total motility, progressive motility and sperm viability decreased over time (p<0.01). In case of sperm morphology there was no statistically significant decrease between 48- and 72-hour time intervals. Conclusion: It can be concluded that the extenders with a chemically defined composition have shown better indicators of insemination capabilities in ejaculates than the SM. The BotuSemen Gold extender is a suitable alternative to the INRA 96, when used within 48 hours; after 72 hours of storage, however, the INRA 96 showed a higher share of viable spermatozoa.
Objective: Semen cryopreservation result in decreased sperm parameters and fertilization ability. Sericin exhibits antioxidant activity by reducing lipid peroxidation resulting from free radicals, which can potentially improve cryopreservation outcomes. The present study aimed to examine the efficacy of various sericin concentrations supplemented with a rooster semen-freezing extender on post-thaw semen quality and fertilizing ability of sperm after cryopreservation. Methods: Semen samples were collected from 40 roosters (5 reps), then were pooled, and divided into four groups by the levels of sericin supplementation (0%, 0.25%, 0.50%, and 0.75%) in a freezing extender. Semen suspensions were loaded in medium straw (0.5 mL) and cryopreserved with the traditional liquid nitrogen vapor method. Post-thawed semen was evaluated for sperm motility, sperm viability, and lipid peroxidation. Also, the fertility test was determined. Results: The results showed that supplementation of the freezing extender with 0.50% to 0.75% sericin resulted in greater total motility and progressive motility and lower malondialdehyde levels than the other groups after cryopreservation (p<0.05). However, the viability of 0.75% decreased compared with the value of 0.50% sericin supplementation (p<0.05). Moreover, the fertility and hatchability of total eggs were significantly higher in the 0.50% sericin group than in the other groups (p<0.05). Conclusion: In conclusion, 0.50% sericin is recommended as an alternative component of the freezing extender to improve cryopreserved rooster semen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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