The mushroom Lentinus lepideus was used to produce mycelial as well as soluble polysaccharides in bioreactor cultures. To determine optimal submerged culture conditions, both growth characteristics and water soluble polysaccharides production were compared among four different types of bioreactor and culture conditions. For the production of mycelial biomass, the following bioreactors were proven to be effective in decreasing order: an external-loop type air-lift bioreactor (ETAB; 7g/l), a balloon type air bubble bioreactor (BTBB; 6.2g/l), a stirrer type bioreactor (STB; 6g/l), and a column type air bubble bioreactor (CTBB; 5g/l). Maxiaml production of water soluble exopolysaccharides (EPS; 0.62g/l) and endopolysaccharides (PPS; 7.7%) could also be obtained from BTBB. The mycelial biomass increased with increase in glucose concentration from 15g/l to 75g/l in the media. In contrast, PPS contents in the cells decreased with increase in glucose concentration in the media, showing the highest PPS content (7%) at 15g/l. Among different medium feeding types, fed-batch culture based on concentration control in media (10g/l) produced higher mycelia than fed-batch culture based on volume control of media (5.8g/l) or batch culture (3.4g/l). EPS production was also higher in fed-batch culture based on medium concentration control than that in other feeding types.
Exopolysaccharides (EPSs) such as capsular polysaccharide (CPS) are important bioactive carbohydrate compounds and are often used as bioenrichment agents and bioabsorbers to remove environmental pollutants like di-n-butyl phthalate (DBP). Among the EPS-producing bacteria, lactic acid bacteria (LAB) have gained the most attention. As generally recognized as safe (GRAS) microorganisms, LAB can produce EPSs having many different structures and no health risks. However, EPS production by LAB does not meet the needs of large-scale application on an industrial scale. Here, the capA gene (encoding CPS biosynthesis protein) was overexpressed in Lactobacillus plantarum P1 to improve the production of EPSs and further enhance the DBP adsorption capability. Compared with P1, the CPS production in capA overexpressed strain was increased by 11.3 mg/l, and the EPS thickness was increased from 0.0786 ± 0.0224 ㎛ in P1 to 0.1160 ± 0.0480 ㎛ in P1-capA. These increases caused the DBP adsorption ratio of P1-capA to be doubled. Overall, the findings in this study provide a safe method for the adsorption and removal of DBP.
Yun Ji Kang;Tae Jin Kim;Min Jae Kim;Ji Yeon Yoo;Jeong Hwan Kim
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.51
no.2
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pp.157-166
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2023
Three lactic acid bacteria (LAB) producing exopolysaccharides (EPSs) were isolated from Pa (green onion)-kimchi, and identified as Weissella confusa (SKP 173), Weissella cibaria (SKP 182), and Leuconostoc citreum (SKP 281), respectively by 16S rRNA gene sequencing. The yields of EPS were 21.27, 18.53, and 15.4 g/l for EPS from SKP 173, 182, and 281, respectively when grown in MRS broth containing sucrose (5%, w/v). Total sugar contents were 64.39, 62.84, and 65.16% (w/w) for EPS from SKP 173, 182, and 281, respectively while the protein contents were 0.33, 0.31, and 0.25% (w/w), respectively. EPSs from W. confusa SKP 173 and W. cibaria SKP 182 contained glucose only but EPS from L. citreum SKP 281 contained glucose and glucitol. Viscosities of the 2% (w/w) freeze-dried EPS solution were 9.60, 8.00, and 8.20 centipoise (cP) for EPS from SKP 173, 182, and 281, respectively. Viscosities of culture grown in MRS broth with 5% sucrose (no glucose) were 92.98, 57.19, and 18.8 cP, respectively. The average molecular weights of EPSs were larger than 2 × 107 Da. Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) analyses of EPSs showed typical carbohydrate peaks, suggesting that the EPSs consisted of pyranose saccharides with α-(1,6) and α-(1,3) glycosidic linkages. L. citreim SKP 281 was used as the starter for yogurt fermentation, and EPS production was confirmed.
Mushrooms are regarded as one of the well-known foods and biopharmaceutical materials with a great deal of interest. ${\beta}$-Glucan is the major component of mushrooms that displays various biological activities such as antidiabetic, anticancer, and antihyperlipidemic effects. In this study, we explored the molecular mechanism of its immunostimulatory potency in immune responses of macrophages, using exopolysaccharides prepared from liquid culture of Lentinus edodes. We found that fraction II (F-II), with large molecular weight protein polysaccharides, is able to strongly upregulate the phenotypic functions of macrophages such as phagocytic uptake, ROS/NO production, cytokine expression, and morphological changes. F-II triggered the nuclear translocation of NF-${\kappa}B$ and activated its upstream signaling cascades such as PI3K/Akt and MAPK pathways, as assessed by their phosphorylation levels. The function-blocking antibodies to dectin-1 and TLR-2, but not CR3, markedly suppressed F-II-mediated NO production. Therefore, our data suggest that mushroom-derived ${\beta}$-glucan may exert its immunostimulating potency via activation of multiple signaling pathways.
Na Jeong-Geol;Kim Hyun-Han;Chang Yong-Keun;Lee Sang-Jong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.9
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pp.1331-1337
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2006
A mathematical model has been proposed for the batch culture of Agaricus blazei with mixed carbon sources of glucose and dextrin. In the proposed model, the metabolism of A. blazei was divided into three parts: cell growth, exopolysaccharides (EPS) production, and another EPS production pathway activated by dextrin hydrolysis. Each pathway was described mathematically and incorporated into the mechanistic model structure. Batch cultures were carried out with six different carbon source compositions. Although parameters were estimated by using the experimental data from the two extreme cases such as glucose only and dextrin only, the model represented well the profiles of glucose, cell mass, and EPS concentrations for all the six different carbon source mixtures, showing a good interpolation capability. Of note, the lag in EPS production could be quite precisely predicted by assuming that the glucose-to-cell mass ratio was the governing factor for EPS production.
Marine microorganism strain 96CJ10356 produced exopolysaccharides, designated as EPS-R. To optimize culture conditions for the production of EPS-R, carbon, nitrogen, mineral salt, temperature, and pH were examined. STN medium was suggested as follow; sucrose 20, tryptone 10, NaCl 10, $MgSO_4$ 5, $CaCl_2$ 1, $KH_2PO_4$ 0.0076, $K_2HPO_4$ 0.0083, $FeCl_2$ 0.005, $MnCl_2$ 0.001, $NaMoO_4$ 0.001, $ZnCl_2$ 0.001 (g/1) and pH 7.0 About 9.23 g/l of EPS-R was obtained from the STN medium after cultivation for 120 h at $25^{\circ}C$ in 5-liter jar fermentor with an aeration rate of 0.17 vvm. Apparent viscosity and flocculation activity of the culture broth were increased with the production of the EPS-R and the maximal values were reached to 415 cp and 1400 units/ml against 0.5 % activated carbon, respectively.
To isolate lactic acid bacteria having high exopolysaccharides (EPS) production ability, 50 strains were initially isolated from the sourdough. Twenty-one strains formed highly mucoid colonies on the sucrose agar medium, which are indicative of active EPS synthesis. DU-07, DU-10, DU-12, DU-19, and DU-21 produced $11.51{\pm}0.167$, $13.09{\pm}0.193$, $12.72{\pm}0.108$, $11.61{\pm}0.284$, and $13.32{\pm}0.094\;g/L$ EPS, respectively, in MRS medium. The isolated strains, DU-10, DU-12, and DU-21, were identified as Enterococcus flavescens, Enterococcus faecium, and Lactobacillus amylovorus, respectively, by using API 50CHL kit and determining partial sequences of their 16S rDNA. Especially, L. amylovorus DU-21 showed the highest production of EPS, as well as the highest inhibitory activities against pathogenic (p<0.05). Interestingly, the L. amylovorus DU-21 seem to be endemic to sourdough fermentations, as they have not been isolated from other environments.
In order to select a suitable bioreactor type for the submerged cultivation of Ganoderma applanatum, both growth characteristics and polysaccharides production were compared among four different types of bioreactor. These include an external-loop type air-lift bioreactor (ETAB), a balloon type air bubble bioreactor (BTBB), a column type air bubble bioreactor (CTBB) and a stirrer type bioreactor (STB). The mycelial biomass produced from the reactors were in decreasing order: ETAB ($7\;g/{\ell}$) > BTBB ($6.2\;g/{\ell}$) > STB ($6\;g/{\ell}$) > CTBB ($5\;g/{\ell}$). Maximal soluble exopolysaccharides ($1\;g/{\ell}$) and endopolysaccharides (2.7%) were also obtained from ETAB. Thus, the ETAB was most suitable for submerged culture of G applanatum mycelium. Based on the results, ETAB was chosen for further detailed study. The most effective aeration rate for the mycelial growth in ETAB ranged from 0.05 to 0.1 vvm. For the maximal production, the mycelium at the initial growth stage needed low aeration rate to reduce cell damages by fluid flow. However, as the mycelia grew, the culture became viscous and thus needed higher aeration. The molecular weight of exopolysaccharides obtained from the culture grown in ETAB was higher than that from the culture grown in other bioreactors.
Kim Hyun Han;Na Jeong-Geol;Chang Yong Keun;Lee Sang Jong
KSBB Journal
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v.19
no.6
s.89
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pp.457-461
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2004
DO-stat fed-batch cultures of Agaricus blazei were carried out using various feeding solutions, for the production of mycelial biomass and exopolysaccharides (EPS). It was observed to be more effective to use a feeding solution containing both carbon and nitrogen sources than that containing only carbon source. The best result was obtained when a feeding solution containing 450 g/l glucose, 60 g/l yeast extract, 30 g/l soytone peptone was used. The maxium mycelial biomass and EPS concentrations were 36.5 g/l and 10.9 g/l, respectively, at 100 hours of cultivation. The mycelial and EPS productivities were 0.37 g/l-h and 0.11 g/l-h, respectively. As compared with the batch culture, the mycelial biomass concentration and its productivity were 6.0- and 2.2-folds increased, respectively. The EPS concentration and its productivity were increased by 4.7 times and 1.8 times, respectively.
The production of exopolysaccharide from Zoogloea ramigera 115SLR in batch culture was affected by carbon sources, rifampicin concentration, inoculum size and cell density of starter culture. The increase of organic nitrogen concentration and cell density in defined medium by adding starter culture resulted in higher production of exopolysaccharide (EPS) within 2 days. Glucose and lactose as carbon sources showed EPS production of 10.7 gk and 10.5 ga, respectively. Higher EPS production was obtained with 2.5% (w/v) glucose. White sugar, brown sugar and galactose produced less than 10 gt of EPS. The optical density of starter culture affected on EPS yield, producing over 10 gt of EPS in the range of 1.0-1.7. In the presence of rifsmpicin, Z. ramigera 115SLR produced EPS of 12.9 gt. Molecular weight of EPS produced with/without rifampicin was determined with 1.367$\times$106 and 1.711$\times$106 g/mol using HPSEC-MALLS-RI, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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