Shin, Hye Young;Kim, Gi Hoon;Kang, Sang Jae;Han, Jeung-Sul;Choi, Cheol
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.4
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pp.388-393
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2017
We report an Agrobacterium-mediated transformation procedure optimized for 'Kyoho' that is a major table grapevine cultivar in Korea, and its transgenic plants with antifreeze protein gene of carrot (DcAFP). The full length of DcAFP coding region in accordance with the previous report was isolated from young leaves of carrot and recombined into a plant transformation vector. Ethylene inhibitors such as silver nitrate and aminoethoxyvinylglycin (AVG) supplemented in a co-cultivation medium distinctly increased frequency of shoot regeneration when explants were sub-cultured in a selection medium: particularly ten-fold higher in treatment with 0.1 mg/L AVG than one without ethylene inhibitor. Among various antibiotics and their concentrations, the combination of 150 mg/L cefotaxime plus 150 mg/L $Clavamox^{TM}$ was selected for elimination of Agrobacterium cells in addition to minimization of adverse effect on shoot regeneration, while 50 mg/L kanamycin monosulfate effectively suppressed regeneration of non-transgenic shoots. Applying the elucidated culture condition, we finally obtained a total of 5 transgenic 'Kyoho' plantlets with DcAFP, of which integration with the grapevine genome and transcription was confirmed by nucleic acid analyses.
The tomato ripening associated membrane protein (TRAMP) (Fray et al., 1994) is a member of the major intrinsic protein (MIP) family, defined as channels facilitating the passage of water and small solutes through membranes. During normal fruit ripening the TRAMP mRNA levels were increased whereas the expression levels of TRAMP in low ethylene ACO1-sense suppressed lines, Nr and rin fruits, were lower than at the breaker stage of wild type fruit. TRAMP mRNA is inhibited by $LaCl_3$, which is an inhibitor of $Ca^{2+}$-stimulated responses, treatment but drought condition did not affect TRAMP expression. The levels of TRAMP mRNA transcripts were substantially higher in the dark treated seedlings and fruits. These suggest that TRAMP function as a water channel may be doubted because of several reasons; no water content was changed during ripening in wild type, antisense and overexpression lines, TRAMP expression under light condition was lower than dark condition and TRAMP expression was not changed in drought condition. Co-suppression plant, 3588 was one of sense suppression lines, which contain CaMV 35S promoter and sense pNY507 cDNA, produced small antisense RNA, approximately 21-25 nucleotides in length, mediated post-transcriptional gene silencing. Therefore, TRAMP expression was inhibited by small antisense and multiple copies might induce gene silencing without any production of double strand RNA. Total seven selected volatile productions, isobutylthiazole, 6-methyl-5-hepten-2-one, hexanal, hexenal methylbutanal, hexenol, and methylbutanol, were highly reduced in sense line whereas total volatile production was increased in TRAMP antisense line. These results suggested TRAMP might change volatile related compounds.
1-Aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) deaminase, which is encoded by some bacteria, can reduce the amount of ethylene, a root elongation inhibitor, and stimulate the growth of plants under various environmental stresses. The presence of ACC deaminase activity and the regulation of ACC in several rhizospheric bacteria have been reported. The nitrogen-fixing Pseudomonas stutzeri A1501 is capable of endophytic association with rice plants and promotes the growth of rice. However, the functional identification of ACC deaminase has not been performed. In this study, the proposed effect of ACC deaminase in P. stutzeri A1501 was investigated. Genome mining showed that P. stutzeri A1501 carries a single gene encoding ACC deaminase, designated acdS. The acdS mutant was devoid of ACC deaminase activity and was less resistant to NaCl and NiCl2 compared with the wild-type. Furthermore, inactivation of acdS greatly impaired its nitrogenase activity under salt stress conditions. It was also observed that mutation of the acdS gene led to loss of the ability to promote the growth of rice under salt or heavy metal stress. Taken together, this study illustrates the essential role of ACC deaminase, not only in enhancing the salt or heavy metal tolerance of bacteria but also in improving the growth of plants, and provides a theoretical basis for studying the interaction between plant growth-promoting rhizobacteria and plants.
The influences of ethylene inhibitors ($AgNO_3$ and silver thiosulfate) and cytokinins (BAP and TDZ) on shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants of B. napus cv. Youngsan were investigated. The presence of $50{\mu}M$ Silver thiosulfate (STS) in shoot regeneration medium formed shoots at 60-68% after 3-4 weeks of culture, which was enhanced by 2-fold compared to that of Silver nitrate ($AgNO_3$). Moreover, cotyledon explants were more regenerative than hypocotyls; shoots from cotyledon explants began to occur 4-5 days earlier than that of hypocotyl explants. TDZ at a concentration of $8-10{\mu}M$ was effective for shoot regeneration, compared with BAP. Consequently, the optimal shoot regeneration response was observed in medium supplemented with $50{\mu}M\;STS+8{\mu}M\;TDZ$. In transmission electron microscopy (TEM) analysis, higher density of silver nanoparticles was shown to be accumulated widely inside the cell wall and plasmodesmata of regenerating leaf cultured in medium supplemented with $AgNO_3$. By contrast, in the cell cultured in medium with STS, fine-grained deposits were partly observed in the surroundings of the cell wall.
Kim, Young-A;Lee, Jong-Suk;Park, Jong-Su;Lee, Poong-Ok
Horticultural Science & Technology
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v.28
no.6
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pp.985-989
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2010
This experiment was conducted to clarify the effects of 1-methylcyclopropene (1-MCP) on vase life of cut 'Blue Magic' iris. Pretreatment for 4 h with concentrations of 500 nL and 1000 nL 1-MCP, an inhibitor of ethylene action, inhibited the wilting and inrolling response of cut iris. The vase life of iris flowers of 500 nL or 1000 nL 1-MCP treatment was prolonged to 0.5 day compared to those held in distilled water (control). Vase life of iris showed no significant difference between $3{\mu}L{\cdot}L^{-1}$ ethylene exposure after 1-MCP treatment and control. 1-MCP treatment inhibited inrolling and increased fresh weight, water uptake, and water balance. The increase of fresh weight was high in 500 nL 1-MCP treatment and water uptake was increased by 1000 nL 1-MCP. Especially, iris flower without 1-MCP treatment dramatically decreased the water uptake as compared to the control for four or five days. Water balance of iris flowers held in water was changed to minus value faster than those with pretreatment of 1-MCP.
The objective of this study was to determine the effect of exogenous abscisic acid (ABA) on the red coloration and endogenous ABA contents of apple fruit skins. ABA and fluridone (an ABA synthetic inhibitor, FD) was sprayed on 'Hongro' apple fruit skins at 107 days after full bloom (DAFB). Visual coloration and hunter's color values were not affected by the ABA and FD treatments. Anthocyanin contents in fruit skins increased similarly to hunter $a^*$ values of fruit skins, but ABA and FD did not affect its accumulations. Liquid chromatography analysis revealed that endogenous ABA contents in control fruit increased at first and then decreased from 12 hours after the treatment. ABA treatment increased ABA contents in fruit skins from 2 hour after the treatment and it lasted until the end of the treatments. FD decreased ABA contents in fruit skins from 6 hours after the treatment. ABA treatment increased MdNCED2 (an ABA biosynthetic gene), MdACO1 (an ethylene biosynthetic gene), and MdCHS and MdDFR expressions. However, MdUFGT expressions were not affected by ABA treatment.
After $SnO_2$ fine powder by precipitation method, Ca as crystallization inhibitor and Pd as catalyst were added to $SnO_2$ raw material by various methods. Thick film device was fabricated on the alumina substrate by mixing ethylene glycol and such mixed powders. The sensing characteristics of the device for methane gas were investigated. The most excellent gas sensing property was shown by the thick film device fabricated by Method 3 in which Ca and Pd doped $SnO_2$ powder is prepared by mixing $SnO_2$ powder, 0.1 wt% Ca acetate and 1 wt% $PdCl_2$ in deionized water and by calcining the mixture, after $Sn(OH)_4$ is dried at $110^{\circ}C$ for 36h. The sensitivity of the sensor fabricated with $SnO_2$-0.1 wt%Ca acetate-1wt%$PdCl_2$ powder heat-treated at $700^{\circ}C$ for 1h was about 86% for 5,000 ppm methane in air at $350^{\circ}C$ of the operating temperature. Response time and recovery were also excellent.
In this study, a hydrate inhibition system is investigated for shallow water gas fields. Mono-ethylene glycol (MEG) injection has been used as a typical method for inhibiting hydrate formation in gas fields; therefore, most offshore platforms are equipped with MEG injection and regeneration processes. A recent application of a kinetic hydrate inhibitor (KHI) has reduced the total volume of MEG injection and hence reduce the operating cost. Experiments are designed and performed to evaluate and verify the KHI performance for inhibiting hydrate formation under shallow water conditions. However, the shut-in and restart operation may require the injection and regeneration of MEG. For this operation, the MEG concentration must be optimized while considering the cost of MEG regeneration. The obtained results suggest that decreasing MEG concentration from 80 wt% to 70 wt% can reduce the life cycle cost (LCC) of MEG regeneration process by approximately 5.98 million USD owing to reduced distillation column cost. These results suggest that the hydrate inhibition system must be evaluated through well-designed experiments and process simulations involving LCC analysis.
Fresh ginseng has a limited storage life due to the quality change caused by microbial spoilage as well as physiological deterioration. The present study investigated the effects of 1-methylcyclopropene (1-MCP) treatment, an inhibitor of ethylene action, on the microbial growth and quality maintenance of fresh ginseng during storage. Harvested fresh ginsengs were treated with $1{\mu}L{\cdot}L^{-1}$ 1-MCP for 20 hours at $4^{\circ}C$ and then stored at room temperature (RT) for 18 days or low temperature ($4^{\circ}C$) for 160 days. After 18 days of storage at RT, the percentage weight loss in 1-MCP treated fresh ginseng (8.3%) is lower than that of control (10.1%). During long-term storage at $4^{\circ}C$, weight losses were increased slightly until 120 days without difference between non-treated and 1-MCP ginsengs. In contrast, after 120 days of storage at $4^{\circ}C$, higher increase in weight loss was observed in non-treated ginsengs than in 1-MCP treated ginsengs. Respiration rate and ethylene production of fresh ginseng were reduced by 1-MCP treatments at RT. The 1-MCP treatment also resulted in lower microbial population compared to those of non-treated ginsengs at RT. However, in ginsengs stored at $4^{\circ}C$ for short-term (45 days), no differences were noted in weight loss and microbial population between 1-MCP treated and non-treated ginsengs. Major ginsenosides was not changed by 1-MCP treatment during the 7 days of storage at RT. Results suggest that 1-MCP treatment can be used to maintain the freshness of ginseng at room temperature for short term storage and at low temperature for long term storage. 1-MCP treatment could be applied on fresh ginseng to avoid deleterious effect of exogenous ethylene during storage and shipping.
In order to evaluate a potential role of mitochondria in the mediation of toxicity of paraquat (PQ), submitochondrial particle and microsome of mouse liver were compared by oxygen radical generation and lipid peroxidation. With NADH in submitochondrial particle and NADPH in microsome as electron donors, PQ stimulated production of superoxide anion and $H_2O_2$ in both fractions. Under the same conditions, PQ enhanced the generation of ethylene from methional suggestiong stimulation of OH production by PQ. But these effects by PQ were somewhat lower in submitochondrial particle than in microsome. In addition, lipid peroxidation(measured as MDA production) was stimulated by PQ in both fractions. The stimulation of lipid peroxidation in both fractions seemed to occur by the same mechanism probably through perferryl ion. This was supported by the following findings: i) The lipid peroxidation in both fractions was partially inhibited by SOD and completely inhibited by DETAPAC(an iron chelator) but not by catalase or OH scavenger. ii) Addition of $ADP-Fe^{3+}$ further increased PQ-induced lipid peroxidation but decreased ethylene production from methional suggesting no correlation between OH production and lipid peroxidation. The redox-cycling of PQ in mitochondria appeared to be linked to NADH dehydrogenase, not to CoQ since all of the observed stimulations by PQ in submitochondrial particle were inhibited by p-hydroxymercuribenzoate(a NADH dehydrogenase inhibitor) but not affected by other respiratory chain blockers. The above results demonstrate that redox-cycling properties of PQ leading to oxygen radical generation and lipid peroxidation can also occur in mitochondria in the same manner as in microsome. Therefore, the observed actions of PQ in mitochondria suggest that mitochondria may also contribute to toxicity of this drug in vivo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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