The present study was designed to investigate whether ethylacetate (EtOAc) fraction extracted from Rubus coreanum affect the contractility of the isolated thoracic aortic strips and blood pressure of normotensive rats. The EtOAc fraction ($400{\mu}g/mL$) significantly depressed both phenylephrine (PE, $10{\mu}M$)- and high $K^+$ (56 mM)-induced contractile responses of the isolated thoracic aortic strips in a concentration-dependent fashion. In the simultaneous presence of L-NAME (an inhibitor of NO synthase, $300{\mu}M$) and EtOAc ($400{\mu}g/mL$), both PE- and high $K^+$-induced contractile responses were recovered to the corresponding control level in comparison with inhibition of EtOAc-treatment alone. Moreover, in the simultaneous presence of EtOAc after pretreatment with 0.4% CHAPS, both PE- and high $K^+$-induced contractile responses were recovered to the corresponding control level compared to the inhibitory response of EtOAc-treatment alone. Also, in anesthetized rats, EtOAc fraction (0.3~3.0 mg/kg) injected into a femoral vein dose-dependently produced depressor responses. This hypotensive action of EtOAc fraction was greatly inhibited after treatment with phentolamine (1 mg/kg), chlorisondamine (1 mg/kg), L-NAME (3 mg/kg/30 min) or sodium nitroprusside ($30{\mu}g/kg/30 min$). Intravenous infusion of EtOAc fraction (1.0~10.0 mg/kg/30 min) markedly inhibited norepinehrine-induced pressor responses. Taken together, these results demostrate that EtOAc causes vascular relaxation in the isolated rat thoracic aortic strips as well as hypotensive action in anesthetized rats. These vasorelaxation and hypotension of EtOAc seem to be mediated at least by the increased NO production through the activation of NO synthase of vascular endothelium, and the inhibitory adrenergic modulation.
배추김치, 갓김치, 부추김치의 용매획분 추출물을 제조한 뒤 항산화관련 물질들의 함량을 측정한 결과 카로테노이드는 갓김치의 hexane층에서, 클로로필 함량은 부추김치의 hexane층에서 가장 높았고, 비타민 C함량은 갓김치의 EtOAc층과 BuOH층에서 가장 높게 나타났다. 총 폐놀화합물은 부추김 치의 CH$_2$Cl$_2$층과 EtOAc층, 배추김치 CH$_2$Cl$_2$층, 갖김치 EtOAc층과 CH$_2$Cl$_2$층에 많이 함유되어 있었다. DPPH법을 이용한 유리기 소거능을 조사한 결과 부추김치 CH$_2$Cl$_2$층과 EtOAc층, 배추김치 CH$_2$Cl$_2$층, 갓김치 EtOAc층에서 효과가 큰 것으로 나타났다. 김치종류별 용매획분을 hairless mouse의 피부균질액에 첨가하여 자외선 B를 조사한 후 지질과산 화물 함량을 측정한 결과 부추김치의 CH$_2$Cl$_2$층과 EtOAc층, 배추김치, 갓김치의 EtOAc층에서 낮게 나타나 항산화성이 높은 획분에서 피부의 광산화 억제효과가 큰 것을 알 수 있었고 김치 용매획분을 크림에 첨가하여 hairless mouse의 등에 직접 도포한 후 자외선 B를 조사하였을 때 대조군에 비해 갓김치의 hexane층, 부추김치의 hexane층과 BuOH층을 제외한 모든 용매획분이 피부홍반의 생성을 억제하였고 특히 갖김치 EtOAc층, 배추김치 CH$_2$Cl$_2$층, 부추김치 물층에서 피부보호효과가 큰 것으로 나타났다.
We previously reported that Hydnocarpi Semen (HS) has a wound healing effect on diabetic foot ulcer lesion in mice. In this study, ethylacetate (EtOAc) fraction from HS extract were evaluated for their wound healing activity by using in vitro acute inflammation model. GC and GC/MS analysis shows that the main constituents in EtOAc fraction are chaulmoogric acid, hydnocarpic acid, and gorlic acid. EtOAc fraction activated macrophages to increase the production of TNF-${\alpha}$. The fraction also increased the production of TGF-${\beta}$ and VEGF, which induced fibroblast activation and angiogenesis. These results suggest that the mechanism that the fraction helps to enhance healing of skin wound is possibly associated with the production of TNF-${\alpha}$, as well as secretion of VEGF, TGF-${\beta}$ and HS may have a new bioactive material for the treatment of skin wound.
Aspergillus oryzae로 발효시킨 청미래덩굴잎 용매추출분획물의 xanthine oxidase (XO) 및 aldehyde oxidase (AO) 저해활성과 항고요산혈증에 미치는 영향을 조사하였다. 용매별 추출수율(g/kg)은 80% ethanol (EtOH)은 13.56이었으며, n-hexane, dichloromethane (DICM), ethylacetate (EtOAc) 및 n-butanol fraction (BuOH)은 1.35-3.33 범위였다. Total polyphenol 함량(mg/g-extract)은 EtOAc fraction 478.07-501.26, BuOH fraction 259.49-289.02, DICM fraction 165.03-232.27, EtOH fraction 134.02-196.54이었으며 EtOAc 및 DICM fraction에서는 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 각각 4.85 및 40.74%가 높았으나 그 외 모든 fraction에서는 발효시킨 경우가 낮았다. 총 flavonoid 함량은 EtOAc fraction이 여타 fraction에 비하여 높았다. EtOAc 및 BuOH fraction의 TF 함량은 발효시킨 경우가 비 발효에 비하여 각각 10.56% 및 60.17%가 높았으나 여타 fraction들에서는 발효시킨 경우가 낮았다. XO 저해활성은 모든 분획물에서 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 현저하게 높았으며 EtOAc 및 BuOH fraction의 경우 발효시킨 경우는 각각 75.02 및 65.59%로 비발효 경우 39.42 및 5.34% 보다 현저하게 높았다. AO 저해활성은 DICM과 EtOAc fraction에서 각각 81.82 및 77.93%로 여타 fraction들에 비하여 높았으며 XO의 경우와 마찬가지로 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 현저하게 높았다. 고요산혈증 mouse의 혈중 요산(SU) 함량에 미치는 영향을 조사한 결과, 고요산혈증 대조군의 SU 함량은 6.98 mg/dL로 정상대조군 (NC)의 3.82 mg/dL에 비하여 1.83배가 높았으나, EtOAc fraction은 투여량에 의존적으로 SU의 함량이 감소하였으며, 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 유의적인 감소를 보였다. 이상의 결과, A. oryzae와 청미래덩굴잎의 발효과정을 통해, glycoside형태의 flavonoid를 aglycone화하여 비발효에 비해 높은 XO 및 AO 저해활성과 함께 항고요산혈증 효과를 나타내는 것으로 사료된다.
대두를 먼저 헥산(Hex)으로 지방을 제거한 후 메탄올로 추출한 추출물에서 항돌연변이성 및 항암활성 물질을 분리하기 위해 극성이 다른 용매인 디클로로메탄($CH_2Cl_2$), 에틸아세테이트(EtOAC), 부탄올(BuOH)로 분획하여 각 분획물의 항돌연변이 및 항암활성 효과를 검토하였다. $AFB_1$에 대한 돌연변이 억제효과는 대두의 메탄을 추출물(MeOH)의 분획물들 중 디클로로메탄 분획물($CH_2Cl_2$)과 에틸아세테이트 분획물(EtOAc)은 2.5 mg/plate 첨가농도에서 각각 83%로 상당히 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 중간 분획물(Inter)의 경우는 56%의 항돌연변이 효과를 나타내었으나 다른 분획물들의 경우 항돌연변이 효과가 낮았다. 한편 MNNG의 경우, $AFB_1$에 비해 돌연변이 저해효과가 떨어지지만 그 중에서도 에틸아세테이트 분획물(EtOAc)이 67%로 가장 높은 항돌연변이 효과를 나타내었으며 중간 분획물과 디클로로메탄 분획물($CH_2Cl_2$)은 각각 63%, 49%의 돌연변이 저해효과를 나타내었다. 대두의 메탄을 추출물은 첨가농도 2 mg/assay에서 44%의 인체 위암세포의 증식 억제효과를 가졌고 대두 메탄을 추출물의 분획물들 중 에틸아세테이트층(EtOAC)의 저해 효과가 가장 높았는데 동일농도에서 66%로 위암세포 성장을 저해시키는 효과를 나타내었고 디클로로메탄($CH_2Cl_2$)과 중간 분획물(Inter)의 경우에는 각각 54% 및 51%의 저해효과를 나타내었다. Hep 3B 인체 간암세포의 경우, 대두 메탄을 추출물을 2 mg/assay 투여했을 때 60%의 저해효과를 나타내었으며 여기에서도 분획물들 중에서 에틸아세테이트 분획물(EtOAC)이 73%로 가장 높은 저해효과를 보였다. 대두의 메탄을 추출물은 첨가농도 2 mg/assay에서 44%의 인체 결장암세포 증식억제효과를 가졌고 대두 메탄을 추출물의 분획물들 중 에틸아세테이트층(EtOAC)의 저해 효과가 가장 높았는데 동일농도에서 77%의 결장암세포의 성장을 저해시키는 효과를 나타내었다. 이상의 결과로부터 대두 분획물들 중 특히 에틸아세테이트 분획물에 의한 항돌연변이 및 항암활성효과가 가장 높았으므로 이 분획물에 주로 isofavone류가 함유되어 있으므로 에틸아세테이트 분획물을 더욱 정제하여 연구할 필요가 있다고 여겨진다.
To investigate the antioxidative effects of an etbylacetate fraction extracted from the flowers of Chrysanthemum indicum L. (Chrysanthemi Flos) on the antioxidative system and lipid profiles of rats with ethanol induced hepatotoxicity. Sprague-Dawley rats weighing $100\~150$ g were divided into 5 groups: normal group (NOR), Chrysanthemi Flos EtOAC fraction (200 mg/kg) treated group (S1), $35\%$ etbanol (10 mL/kg) treated group (S2), Chrysanthemi Flos EtOAC fraction (200 mg/kg) and ethanol concomitantly treated group (S3) and Chrysanthemi Flos EtOAC fraction (400 mg/kg) and ethanol concomitantly treated group (S4), respectively. The antioxidative activity of each fraction was decreased in order of EtOAC, n-hexane, n-BuOH, water and chloroform. The growth rates and feed efficiency ratios were decreased by ethanol treatment, but were gradually restored to similar levels as in the NOR group by administering Chrysanthemi Flos EtOAC fraction. The whole blood concentrations of total cholesterol and LDL-cholesterol, and the activities of ALT and AST that were elevated by ethanol were significantly decreased in the Chrysanthemi Flos EtOAC fraction treated groups. It was also observed that the activities of SOD, catalase, xanthine oxidase and GSH-Px elevated by ethanol in rat liver were markedly decreased in the Chrysanthemi Flos EtOAC fraction treated group as compared to S2. These results suggest that Chrysanthemi Flos EtOAC fraction has possible protective effects against ethanol induced hepatotoxicity in rat liver.
Katsura tree (Cercidiphyllum japonicum Sieb. Et Zucc) leaves were collected, air-dried and extracted with 70% aqueous acetone, then concentrated and sequentially fractionated using n-hexane, methylene chloride ($CH_2Cl_2$), ethylacetate (EtOAc), and $H_2O$. The EtOAc fraction was chromatographed on a Sephadex LH-20 column with various aqueous MeOH eluting solvents and finally treated with acetone-$H_2O$ (7:3, v/v) to isolate a gallotannin. According to the NMR analysis, including HSQC and HMBC, and with the comparison of authentic literature data, the isolate was elucidated as 6-m-digalloyl-1,2,3,4-tetra-O-galloyl ${\beta}$-D-(+)-glucose, one of hydrolyzable tannins and one of gallotannins. The compound was only gallotannin which was firstly isolated from the extracts of Katsura tree leaves, and has not been reported before in domestic tree sources.
Japanese anise (Illicium anisatum L.) leaves were collected and ground after drying, then immersed with 50 % aqueous acetone for 3 days. After filtration, the extracts were fractionated with n-hexane, chloroform ($CHCl_3$), ethylacetate (EtOAc) and $H_2O$, and then freeze dried after concentration. A portion of EtOAc (3.12 g) and $H_2O$ (6.08 g) soluble fractions were chromatographed on a Sephadex LH-20 column with various aqueous MeOH solution to isolate the compounds. Compound 1 ((+)-catechin) was isolated from EtOAc soluble fraction. Compounds 2 (quercetin), 3 (quercitrin) and 4 (2''-O-rhamnosylvitexin) were isolated from $H_2O$ soluble fraction. For the first time, quercitrin (3) and 2''-O-rhamnosylvitexin (4) of the isolated compounds were obtained from the extracts of japanese anise leaves.
본 연구에서는 1.1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl radical ($^{\cdot}OH$), 그리고 superoxide radical ($O_2{^-}$) 소거능 실험을 통해 쑥부쟁이의 항산화 효과를 평가하였다. 쑥부쟁이는 에탄올로 추출한 뒤, n-hexane, methylene chloride ($CH_2Cl_2$), ethylacetate (EtOAc), 그리고 n-butanol (n-BuOH)로 분획하였다. DPPH 라디칼 소거능 실험에서 모든 추출 및 분획물이 $10-100{\mu}g/mL$의 농도에서 농도 의존적으로 라디칼 소거능이 증가하였으며, 특히 EtOAc 분획물은 가장 강한 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었다. 또한 쑥부쟁이는 $50{\mu}g/mL$ 농도에서 80% 이상의 $^{\cdot}OH$ 라디칼 소거율을 보였다. 특히 EtOAc 분획물은 $0.03{\mu}g/mL$에서 IC50 값을 나타내어 추출물과 분획물 중 가장 강한 $^{\cdot}OH$ 라디칼 소거능을 보여주었다. 또한, EtOAc 분획물은 $O_2{^-}$ 라디칼 소거능에서도 가장 강한 소거활성을 보였다. 이러한 결과는 쑥부쟁이가 산화스트레스로 인한 질병을 예방하는 천연 항산화제로서의 활용 가능성이 있음을 보여준다.
The potential antioxidant activities of different fractions from methanolic extract of Curcuma longa L. were assayed in vitro. All of the fractions exception of n-hexane and $H_2O$ showed a strong antioxidant activity, especially the ethylacetate (EtOAc) fraction, which showed the highest 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity ($IC_{50}=9.86\;{\mu}g/mL$). The results of 2,2'-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS) radical scavenging activity and ferric reducing antioxidant power (FRAP) assay showed concentration dependency, the EtOAc fraction demonstrating a better result than the other fractions at the same concentration in this studies. Additionally, when the total phenolic contents of fractions were measured, the EtOAc fraction contained the highest level. Meanwhile, correlation analysis indicated a high correlation between the antiradical activity and the total phenolic contents, suggesting that fractions obtained from the methanolic extract of Curcuma longa L. have wide potential for use as sources of antioxidant material.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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