The anti-inflammatory activity of fruit body of Phellinus pini was investigated by activity-guided fractionation. From the screening of each fraction for the inhibitory activity of NO production in lipopolysaccaride (LPS) activated RAW 264.7 cells, methanol extract and its hexane soluble fraction of Phellinus pini exhibited inhibition of NO production compared with LPS control without toxicity. The hexane soluble fraction showed dose-dependent inhibition of NO production. The active hexane fraction was repeatedly chromatographed over silica gel, ergosta-7,24(28)-dien-3-ol(1) and ergosterol peroxide (2) were isolated and identified. Ergosterol derivatives were inhibited NOS activation, $IC_{50}$ of them were $18.9{\pm}3.9{\mu}M$ (1) and $20.4{\pm}4.5{\mu}M$ (2).
Eight compounds were isolated from the fruiting bodies of Ganoderma applanatum, and were identified as 2-methoxyfatty acids (1), 5-dihydroergosterol (2), ergosterol peroxide (3) $3{\beta},7{\beta},20,23{\zeta}-tetrahydroxy-11,15-dioxolanosta-8-en-26-oic$ acid (4), $7{\beta},20,23{\zeta}-trihydroxy-3,11,15-trioxolanosta-8-en-26-oic$ acid (5), cerevisterol (6), $7{\beta},23{\zeta}-dihydroxy-3,11,15-trioxolanosta-8,20E(22)-dien-26-oic$ acid (7), and $7{\beta}-hydroxy-3,11,15,23-tetraoxolanosta-8,20E(22)-dien-26-oic$ acid methyl ester (8) by spectral analysis. All compounds were isolated for the first time from this fruiting bodies, and their effect on rat lens aldose reductase (RLAR) activity was tested. Among these eight compounds, ergosterol peroxide (3) was found to exhibit potent RLAR inhibition, its $IC_{50}$ value being $15.4\;{\mu}g/mL$.
Many studies on plant extracts have been reported for the treatment of candidiasis caused by Candida albicans, a representative fungal infection. This study demonstrates the synergistic antifungal activity of the combination of Phellodendri Cortex and Magnoliae Cortex, previously reported to have antifungal efficacy. Considering the antifungal efficacy and the separation of the active constituents, berberine and magnolol, hot water extraction and carbon dioxide supercritical extraction were selected for Phellodendri Cortex and Magnoliae Cortex, respectively. A combination of 0.55 g/L hot water extract of Phellodendri Cortex and 0.59 g/L carbon dioxide supercritical extract of Magnoliae Cortex showed synergistic antifungal activity. The synergistic antifungal activity of 160 μM berberine and 100 μM magnolol, which are representative antifungal compounds of Phellodendri Cortex and Magnoliae Cortex, respectively, contributes to the synergistic antifungal effect of their extracts. The additive decrease in cellular ergosterol level and the increased antifungal efficacy by extracellular ergosterol suggest that disruption of the biological function of ergosterol in the cell membrane is not responsible for the synergistic antifungal activity of berberine and magnolol. Synergistic cellular release of chromosomal DNA upon mixing berberine and magnolol indicates that disruption of the cellular structure is responsible for the synergistic antifungal effect of berberine and magnolol.
Saccharomyces cerevisiae의 고정화 및 현탁 세포로 구성된 연속식 생물반응기에서 에탄올 생성시 지질 첨가 영향을 연구하였다. 여러가지 배양조건하에서 에탄을 생산량 및 현탁 세포의 알코올 탈수소효소(alcohol dehydrogenase, ADH)의 비활성도를 측정하였다. 무통기 조건하에서 ergosterol과 oleic acid를 세포 배양액에 첨가하였을때, 에탄을 생산량과 균체 생육이 현저히 증가하였으나, 알코올 탈수소효소의 비활성도는 영향을 받지 않았다. 특히 무통기 조건 및 통기 조건하에서 얻어진 현탁 세포간의 알코올 탈수소효소의 비활성도는 차이가 없었다. 계면활성제 첨가시에도 에탄올 생성, 균체 생육, 알코올 탈수소효소의 비활성도가 크게 증가하였다. 고농도($40\;g/{\ell}$ 이상) 에탄올에 노출된 세포배양액에 ergosterol과 oletic acid 첨가시에도 에탄올 생성량, 균체 생육, 알코올 탈수소효소의 비활성도가 증가하였으나, 계면활성제 첨가시에는 효과가 없었다. 따라서, 지질 첨가효과는 저농도 에탄을 조건에 비해 고농도 에탄을 존재시 크게 작용하였다. 여러가지 매양조건에서 얻어진 현탁 세포의 알코올 탈수소효소의 isozyme patteren을 전기영동법에 의해 조사한 결과 ADH I으로 추정되는 한개의 isozyme만이 확인되었으며, isozyme의 이동거리는 세포의 배양조건에 따라 약간의 차이가 있었다. 에탄올 생성량과 알코올 탈수소효소의 비활성도사이의 상관관계는 성립되지 않았으며, 알코올 탈수소효소의 비활성도보다는 균체량이 에탄올 생성에 더 중요한 인자로 작용하였다.
본 연구는 표고의 톱밥재배시 재배배지의 숙도, 자실체 발생단계 및 버섯생산 수량을 정량화하고 예측하고자 실시하였다. 배지의 성숙도는 자실체 발생시기를 결정하는데 매우 유용한 지표로서, 균주, 영양생장기간, 여러 가지 효소의 활성이 관여하며, 배지내의 성분변화, pH 변화 및 수분포텐셜 등이 영향한다. 자실체발생 초기에 배지내의 glucosamine 의 함량이 최고치를 나타냈으며, 자실체 발생후 신속히 감소하였다. lipid phosphate 및 ergosterol 함량도 버섯원기 형성 시에 높은 값을 보였으며, 자실체 발생직전 최고값에 달하였다. 따라서 lipid phosphate 및 ergosterol 함량이 배지의 숙도 및 자실체형성을 예측하는 주요수단으로 사용될 수 있다. 기질내의 pH는 종균접종전 6.3으로부터 자실체형성단계에서 4.0으로 변화하였으며, pH측정으로 자실체수량을 예측할 수 있었는데, 이러한 pH를 bromphenol blue(BPB)의 스프레이로 간단히 측정할 수 있었다. 아울러 기질의 수분포텐셜과 관련하여, -0.5MPa 정도의 수분포텐셜감소가 생장 및 자실체형성에 크게 영향하였으며, 우수한 숙도외 버섯재배 기질이 가지는 수분포텐셜은 버섯발생 전후 각각 -0.7MPa, -4.0MPa 였다. 높은 수분포텐셜은 고밀도의 균체콜로니를 만들 수 있었으며 균주 및 배양기간중의 상호작용이 기질의 수분포텐셜에 현저히 영향하였다.
표고버섯 톱밥재배시 배양에 의한 중량감소율과 생장기간에 따른 에르고스테롤 정량으로 균사 생장량을 조사하였고, 배양기간과 자실체 발생기간에 따른 균체 외와 균체 내의 효소 특성을 조사하였다. 배양기간에 따른 중량 감소는 산림5호가 농기3호와 산림6호에 비해 낮은 중량감소율을 나타냈다. 에르고스테롤 정량에 의한 균사 생장량 조사 결과, 암배양기간 동안 3균주 모두 균사 생장량이 증가하였으며, 농기3호가 상대적으로 높은 증가율을 보인 반면, 산림5호는 낮은 증가율을 보였다. 농기3호와 산림6호는 명배양기간 동안에 균사 생장량이 최고치에 이르렀으며, 산림5호는 자실체 발생기간 전까지 계속 증가하였다. 배양기간과 발생기간에 따른 글체 외와 군체 내 효소 역가를 측정한 결과, 배양 초기(10일)에는 셀룰로오스와 헤미셀룰로오스 분해에 관여하는 CMCase, avicelase, xylanase, glucanase의 역가가 높았고, 배양 10일 후 리그닌 분해에 관여하는 laccase와 Mn-peroxidase의 역가가 높아지는 경향을 나타내었다.
Recently proteasome inhibitors have been emerged as potential anticancer agents. In a continuous study on exploring proteasome inhibitors from natural products, fruiting body of Hericium erinaceum was investigated. The MeOH extracts of the fruiting body of Hericium erinaceum was fractionated with several solvents and the fractions were evaluated on the activity to screen the proteasome inhibitors. The n-Hexane and CHCl3 frs. showed potent activity, of which chemical investigations led to ergosterol peroxide (1), hericenones C (2) and D (3). Their structures were determined by spectroscopic methods such as $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR, and FABMS spectra.
To determine the cytotoxic activity of natural compounds, chromatographic separation of the hexanesoluble fraction from the fruiting body of Ganoderma lucidum led to the isolation of four steroids and one triterpenoid. They were identified as ergosterol peroxide (1), stella sterol (2), ergosterol (3), 9(11)-dehydroergostrol peroxide (4), and ganodermanontriol (5) based on spectroscopic evidence and physicochemical properties. These compounds were examined for their cytotoxic activity against HL-60, MCF-7, and LLC cancer cell lines. Ganodermanontriol (5) showed cytotoxic activity with IC$_{50}$ values of 24.8 and 22.9 $\mu$g/mL against HL-60 and MCF-7 cancer cell lines, respectively, whereas compounds 1 - 4 were inactive.
일부 야생 및 배양 버섯중의 sterol 및 vitamin $D_2함량을 측정하였다. 야생버섯의 부위별 이들 성분의 분포 또한 평가되었다. 또 야생버섯의 자실체의 vitamin $D_2함량의 변화도 연구되었다. vitamin $D_2는 비누화 및 반예비 순상 HPLC 정제를 포함하는 방법을 사용한 후 HPLC법을 사용하여 측정하였는데, 내부 표준품을 이용한 분석용 역상컬럼을 이용한 정량을 하였다. Sterol 함량은 GC로 분석되었으며, 내부표준품을 사용하였다. 비누화 후에 sterol을 trimethylsily1 ester로 유도체화하여 분석의 시료로 하였다. 질량분석이 sterol류의 동정을 확인하기 위하여 사용되었다. 배양 버섯에서는 vitamin $D_2는 거의 존재하지 않았으나, 일부 야생 버섯은 이들 vitamin을 다량(4.7- 194$\mug$/ 100g 건물중) 함유하고 있었다. Ergosterol은 버섯류 중에 가장 많이 존재하는 sterol이었으며, 야생버섯류(296-489 mg/ 100g 건물중)보다 배양버섯류(602.1-678.6 mg/ 100g 건물중)에서 높은 함량을 보였다. Vitamin D2와 ergosterol의 함량은 버섯류의 부위에 따라 아주 다양하거나 적당한 변화를 보였으며, 자루부위에서 가장 낮은 함량을 보였다. 더욱이 개체별 자실체간의 vitamin $D_2함량간에도 많은 차이를 보였다.
Xylaria, belonging to the Ascomycotina, is known to produce diverse classes of bioactive substances. In an effort to identify the chemical constituents of the fruiting bodies of Xylaria polymorpha, linoleic acid (1), linoleic acid methyl ester (2), ergosterol (3), 4-acetyl-3,4-dihydro-6,8-dihydroxy-3-methoxy-5-methyl-1H-2-benzopyran-1-one (4), and 4-hydroxyscytalone (5) were isolated from its methanolic extract. Their structures were assigned on the basis of various spectroscopic studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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