To produce ergosterol Saccharomyces toke KBA No. 6 was used and various factors related to ergosterol accumulation were investigated. The most effective inorganic nitrogen source was ammonium chloride and 3.50 % of ergosterol was accumulated in the cell when the C/N ratio was 200/1. When Tween 80 and potassium nitrite were used simultaneously, ergosterol content and total amount of ergosterol were increased by 56 % and 45 %, respectively, compared to their control in which 0.2 % of Tween 80 and 0.1 % of potassium nitrite were used. Under the optimum conditions, ergosterol content increased from 1.73 % to 5.3 % and the total amount of ergosterol was increased from 65.2 mg/l to 135.15 mg/l.
Ergosterol, an essential constituent of membrane lipids of yeast, is distributed in both the cell membrane and intracellular endomembrane components such as vacuoles. Honokiol, a major polyphenol isolated from Magnolia officinalis, has been shown to inhibit the growth of Candida albicans. Here, we assessed the effect of honokiol on ergosterol biosynthesis and vacuole function in C. albicans. Honokiol could decrease the ergosterol content and upregulate the expression of genes related with the ergosterol biosynthesis pathway. The exogenous supply of ergosterol attenuated the toxicity of honokiol against C. albicans. Honokiol treatment could induce cytosolic acidification by blocking the activity of the plasma membrane Pma1p H+-ATPase. Furthermore, honokiol caused abnormalities in vacuole morphology and function. Concomitant ergosterol feeding to some extent restored the vacuolar morphology and the function of acidification in cells treated by honokiol. Honokiol also disrupted the intracellular calcium homeostasis. Amiodarone attenuated the antifungal effects of honokiol against C. albicans, probably due to the activation of the calcineurin signaling pathway which is involved in honokiol tolerance. In conclusion, this study demonstrated that honokiol could inhibit ergosterol biosynthesis and decrease Pma 1p H+-ATPase activity, which resulted in the abnormal pH in vacuole and cytosol.
Kim, Dong-Seon;Baek, Nam-In;Oh, Sei-Ryang;Jung, Keun-Young;Lee, Im-Seon;Kim, Jung-Hee;Lee, Hyeong-Kyu
Archives of Pharmacal Research
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v.20
no.3
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pp.201-205
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1997
A very high content (at least 0.23%) of ergosterol peroxide was isolated from Naematoloma fasciculare Karst. Not only ergosterol peroxide but also ergosterol showed very strong anticomplementary activity on the classical pathway, the $IC_{50}$ values being $5.0 {\mu}M$ and $1.0 {\mu}M$, respectively. The $ ^{1}H $and $^{13}C$ NMR data of ergosterol peroxide were revised and completely assigned by DEPT, $^{1}H-^{1}H$ COSY, HMQC and HMBC correlations.
Ergosterol is the significant component of the cell wall of fungi. Its presence is regarded as evidence of fungi contamination in grain and other foods. Many studies on ergosterol detection have been carried out using chemical methods, but those methods required complicated pre-treatments and long analysis times. In this study, an amperometric biosensor was developed for fast and precise ergosterol detection. The biosensor system used the electron transfer of hydrogen peroxide produced from the reaction of ergosterol with cholesterol oxidase. The biosensor system consisted of a peristaltic pump, a syringe loading sample injector, an enzyme reactor, a fabricated flow-through cell containing a working electrode, a reference electrode and a counter electrode, and a potentiostat/recorder. The working electrode was prepared by coating modified multi-wall carbon nanotube (MWNT) on glassy carbon electrode. The $MWNT-NH_2$ coated glassy carbon electrode linearly responded to hydrogen peroxide in the range of $1{\times}10^{-5}{\sim}8{\times}10^{-5}$ M with a detection limit of $10^{-7}$ M in the basic performance test. The currents produced from the ergosterol biosensor showed the linearity in a range from $1.0{\times}10^{-6}$ M to $1.0{\times}10^{-5}$ M ergosterol.
Sparassis crispa fruits were extracted in 80 % MeOH, and the concentrated extract was partitioned into EtOAc, n-butyl alcohol, and water fractions. The repeated octadecyl $SiO_2$ and silica gel ($SiO_2$) column chromatographies for the EtOAc and nbutyl alcohol fractions led to isolation of two ergosterol peroxides. There chemical structures were determined as ($3{\beta}$,$5{\alpha}$,$8{\alpha}$,22E)-5,8-Epidioxyergosta-6,22-dien-3-ol (ergosterol peroxide) (1) and 3-O-${\beta}$-D-glucopyranosyl ergosterol peroxide (2) based on spectroscopic data analyses including nuclear magnetic resonance, infrared spectrometry, and mass spectrometry (MS). Compounds 1 and 2 were for the first time isolated from S. crispa in this study.
In order to elucidate the action mechanism of prochloraz and triadimefon, the mycelia of the Valsa ceratosperma were treated with the compounds in vitro. Analysis by GLC of the sterol extract from Valsa ceratosperma mycelia revealed one major peak and two minor peaks. Their relative retention time(RRT) relative to chloresterol were 1.29, 1.48 and 1.82, The compounds with RRT 1.29 and RRT 1.82 were identified as ergosterol and 24-methylenedihydrolanosterol by GC/MS, respectively. Five ppm of prochloraz and triadimefon applied to mycelia caused decrease in ergosterol content, whereas increase in 24-methylenedihydrolanoserol content in mycelia. The longer treatment time and the higher concentrations of the chemicals resulted in the greater decrease in ergosterol and the greater increase in 24-methylenedihydrolanosterol. Based on the analysis, it is considered that the two chemicals inhibit the ergosterol biosynthesis in Valsa ceratosperma by blocking C-14 demethylation as found previously in other fungi arid yeasts.
The effects of bovine serum albumin, myoinositol and ergosterol on protoplast formation, regeneration and fusion from auxotrophic mutants of Candida pseudotropicalis were examined. Frequency of protoplast formation ranged from 48 to 98% depending on auxotrophic types. When myoinositol (0.5mg/ml) and ergosterol (0.1mg/ml) were supplemented in the medium of cell growth, and bovine serum albumin (4mg/ml)was added to protoplasting buffer, 50-100% of cells were converted to protoplasts. Such a treatment of three additives improved 2.2-3.0 fold of regeneration rate of protoplasts. The fusion frequencies between complementary auxotrophs ranged from $7.0\times 10^{-4}$ to $1.5\times 10^{-3}$ in the optimal conditions. These values showed 1.9-2.3 fold increase when compared with fusion frequencies obtained without the treatment of additives. These results suggested that these comsion frequencies obtained without the treatment of additives. These results suggested that these xompounds may improve protoplast regeneration and fusion between complementary auxotrophs used in this study.
Entomopathogenic fungus of Cordyceps militaris is famous of its medicinal efficacies. An antitumor compound was purified from the n-hexane extract of artificially cultivated fruiting bodies of C. militaris and identified as ergosterol peroxide $(5{\alpha},\;8{\alpha}-epidioxy-24(R)-methylcholesta-6,22-dien-3{\beta}-o1,\; C_{28}H_{44}O_3)$ mainly by $^1H\;and\;^{13}C-NMR$ spectroscopic techniques. When the antitumor activity of ergosterol peroxide was measured against 3 tumor cell lines from Korean cancer patients, it showed the most strong activity against gastric cancer SNU-l cell line 3 days after treatment. The 50% inhibitory concentrations $(IC_{50})$ of ergosterol peroxide 6 days after treatment were $75.8{\mu}g/ml$ for human gastric SNU-1 tumor cell line, $39.7{\mu}g/ml$ for human colorectal SNU-C4 tumor cell line and $32.7{\mu}g/ml$ for human hepatoma SNU-354 cell line.
The chemical constituents of Kyllinga brevifolia Rottb. var. leiolepsis Hara (Cyperaceae) were studied. From the chloroform and n-butanol soluble fractions, five compounds were isolated by chromatographic purification process. They were identified as ${\beta}-sitostenone$, ergosterol peroxide, ${\beta}-sitosterol$, ${\beta}-sitosteryl$-3-O-{\beta}-D-glucopyanoside and vitexin, respectively. This is the first report of the identification of ${\beta}-sitostenone$, ergosterol peroxide from Cyperaceae.
Methanol extract of Sarcodon aspratus Berk. (S. Ito) was analyzed by thi layer chromatography, gas chromatography and mass spectrophotometer. Nine fractions from primary methanol extract were observed by TLC. Six fractions were observed by the second TLC analysis of the second and the third fractions. 27,28-digydrolanosterol({TEX}$C_{30}H_{52}${/TEX}O), ergost-7-en-3-ol({TEX}$C_{28}H_{48}${/TEX}O) were identified from two fractions of the second TLC analysis by mass spectrophotometer. The molecular weights of 27,28-dihydrolanosterol and ergost-7-en-3-ol were 413 and 400 respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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