• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제19권5호
• /
• pp.514-520
• /
• 1991

Extrusion시켜 구조변형시킨 전분(질)을 기질로 cyclodextrin glucanotransferse(CGTase)를 활용하여 액화과정을 거치지 않고 직접 cyclodextrin을 합성하는 불용성 extrusion된 전분-수용성 CGTase로 구성된 불균일상 효소반응계에 관하여 연구하였다. Extrusion된 전분을 기질로 이용할 경우 기존의 액화전분을 기질로하는 균일상 효소반응계에서 보다 현저히 증가된 CD 농도, 수율 그리고 합성속도를 얻을 수 있었으며, extrusion된 전분 기질농도가 100g/l일 때 CD생성량과 수율은 각각 54g/l와 0.54였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제23권4호
• /
• pp.489-498
• /
• 2013

A new Bacillus strain degrading starch, named Bacillus sp. UEB-S, was isolated from a southern Tunisian area. Amylase production using solid-state fermentation on millet, an inexpensive and available agro-resource, was investigated. Response surface methodology was applied to establish the relationship between enzyme production and four variables: inoculum size, moisture-to-millet ratio, temperature, and fermentation duration. The maximum enzyme activity recovered was 680 U/g of dry substrate when using $1.38{\times}10^9$ CFU/g as inoculation level, 5.6:1 (ml/g) as moisture ratio (86%), for 4 days of cultivation at $37^{\circ}C$, which was in perfect agreement with the predicted model value. Amylase was purified by Q-Sepharose anion-exchange and Sephacryl S-200 gel filtration chromatography with a 14-fold increase in specific activity. Its molecular mass was estimated at 130 kDa. The enzyme showed maximal activity at pH 5 and $70^{\circ}C$, and efficiently hydrolyzed starch to yield glucose and maltose as end products. The enzyme proved its efficiency for digesting raw cereal below gelatinization temperature and, hence, its potentiality to be used in industrial processes.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제24권1호
• /
• pp.7-14
• /
• 1981

몇개의 담자균류(擔子菌類)중 볏짚배지(培地)에서 효소생산(酵素生産)이 양호(良好)하고 균사생육(菌絲生育)이 빠른 균주(菌株)로 P. ostreatus 301과 L. edodes 3-1을 선정(選定)하여 이들 균주(菌株)의 효소생산(酵素生産)에 대한 최적배양조건(最適培養條件) 및 배지(培地)에 부원료(副原料)와 무기염류(無機鹽類)를 첨가(添加)했을때 효소생산(酵素生産)에 미치는 영향(影響)을 검토(檢討)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1) Cellulase와 xylanase의 생산(生産)은 L. edodes 3-1이 protease는 P. ostreatus 301이 우수하였다. 2) 효소생산(酵素生産)의 최적조건(最適條件)은 배양온도(培養溫度)가 cellulase는 $30^{\circ}C$, xylanase와 protease는 $25^{\circ}C$, 수분함량(水分含量)은 75%, $pH\;5.0{\sim}6.0$이었다. 3) 배양기간(培養期間)은 P. ostreatus 301이 30일(30日) L. edodes 3-1은 35일(35日) 배양(培養)했을때가 효소생산(酵素生産)이 양호(良好)하였다. 4) 부원료(副原料)중에서는 대두박(大豆粕), 유채박(油菜粕), 참깻묵을 첨가(添加)했을때가 효소생산(酵素生産)은 양호(良好)하였으나 균사생육(菌絲生育)은 오히려 불량(不良)하였으며 미강첨가량(米糠添加量)은 30%첨가(添加)에서 좋았다. 5) 무기염류(無機鹽類)의 첨가(添加)는 대체적으로 효소생산(酵素生産)에 효과적(效果的)이었으며 $CaCO_3$는 5%, $CaSO_4$는 2% 첨가구(添加區)에서 좋았다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제41권2호
• /
• pp.145-152
• /
• 2013

소나무잔나비버섯(Fomitopsis pinicola MKACC 54347)의 균사체로부터 endoglucanase를 생산하기 위한 최적 배양조건을 조사하였다. 복합배지 중 MSM이 가장 높은 endoglucanase 활성을 나타내었으며, MSM의 성분과 농도를 각각 2.0% CMC, 2.0% yeast extract, 0.2% $KH_2PO_4$, 0.03% $MnSO_4$ 및 0.3% trace metal 용액으로 첨가하였을 때 효소활성이 가장 우수하였다. 따라서 F. pinicola로부터 endoglucanase를 생산하기 위한 최적 배지조건은 2.0% CMC, 2.0% yeast extract, 0.2% $KH_2PO_4$, 0.03% $MnSO_4$ 및 0.3% trace metal 용액이다. 이상의 배지를 사용하여 배양온도 $25^{\circ}C$에서 8일 동안 배양하였을 때 최대로 효소 활성이 나타내는 것을 확인하였다. CMC를 기질로 사용한 activity staining의 결과를 통해 F. pinicola 균사체의 endoglucanase 활성여부를 확인할 수 있었으며 그 분자량이 43-70 kDa 임을 확인하였고, 배양액 중의 효소활성의 최적 pH와 온도는 각각 pH 5.0과 $55^{\circ}C$인 것으로 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제8권4호
• /
• pp.353-360
• /
• 1998

A bacterial strain PN33 producing large amounts of extracellular pectin lyase (PNL, EC 4.2.2.10) was isolated from soil. The isolated bacterium was identified as a strain of Bacillus sp. Production of PNL by the strain was induced only by pectins, with a higher degree of esterification, which had been added to the culture medium as a sole carbon source. The optimal medium for PNL production was determined to consist of 10 g pectin, 2 g yeast extract, 4 g $K_2HPO_4{\cdot}3H_2O$, 0.6 g $MgSO_4$, and 0.11 g $CaCl_2$ per liter (pH 7.0). The PNL activity in the culture supernatant reached the highest level of 132 mU/ml after 32 h cultivation at $37^{\circ}C$ in the optimal medium. The PNL produced was purified to homogeneity by ammonium sulfate fractionation (50~80%), and cation exchange and size exclusion chromatographies. The molecular mass of the enzyme was estimated to be approximately 52 kDa by SDS-PAGE. Almost the same mass was determined by nondenaturing PAGE, indicating that the functional enzyme had a monomeric structure. As expected, the PNL exhibited higher activities on the highly esterified pectins whereas it gave no detectable activity on polygalacturonic acid. The enzyme showed the highest activity at the acidic pH of 6.0, exceptional for a bacterial PNL. Maximum activity was measured at $40^{\circ}C$, although the stability f the purified enzyme was poor at this temperature. alcium (1 mM) was found to activate the PNL activity by $50\%$, and also remarkably increased the thermal stability f the enzyme. Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) and iethylpyrocarbonate (DEPC) inhibited the PNL activity lmost completely at the concentration of 5 mM. This result ndicates that some serine and histidine residues of the nzyme may play an essential role for catalytic function of he enzyme.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제19권5호
• /
• pp.456-463
• /
• 1991

Bif. longum KCTC 3215에 의한 Beta-galactosidase의 최적생성조건은 탄소원으로 lactose 1.0, 초기 pH 7.0, 배양온도 $37^{\circ}C$ 및 배양시간 17시간 후였다. 이 효소는 protamine sulfate, ammonium sulfate, DEAE-Sephadex A-50 ion exchange chromatography 및 Sephadex G-150 gel filtration 등 4단계 정제과정을 거쳐 9.25배 정제되었다.

• Korean Chemical Engineering Research
• /
• 제50권2호
• /
• pp.257-263
• /
• 2012

바이오디젤은 화석연료인 경유의 대체에너지로써 비독성이고 재생 가능한 에너지이다. 바이오디젤생산방법은 크게 산 염기 초임계 효소방법으로 분류되는데 본 연구에서 친환경적으로 바이오디젤을 생산할 수 있는 초임계공정과 효소고정화공정에 대해 연구하였다. 연간 10,000톤의 바이오디젤을 생산하는 공정을 대상으로 PRO II 공정모사기를 통해 전환률과 에너지소비량을 알아보기 위한 공정모사를 실시하였다. 그 결과 초임계공정에서의 전환률은 91.17%(0.9% 글리세롤 포함), 효소고정화공정에서는 93.58%(1.0% 글리세롤 포함)로 나타났다. 이 결과는 효소고정화공정이 높은 전환률을 보였지만 바이오디젤의 순도는 초임계공정에서 높게 나타났음을 보여준다. 한편, 에너지소비량 측면에서 초임계공정과 효소고정화공정이 각각 8.9, 3.9MW를 나타났다. 즉, 초임계 공정이 효소고정화공정에 비하여 2.3배 많은 에너지를 소모한다는 것을 확인할 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제49권2호
• /
• pp.181-191
• /
• 2021

The present study addresses isolation, optimization, partial purification, and characterization of a haloalkaline serine protease from a newly isolated haloarchaeal strain isolated from Wadi El Natrun in Egypt. We expected that a two-step sequential statistical approach (one variable at a time, followed by response surface methodology) might maximize the production of the haloalkaline serine protease. The enzyme was partially purified using Hiprep 16/60 sephacryl S-100 HR gel filtration column. Molecular identification revealed the newly isolated haloarchaeon to be Natrialba hulunbeirensis strain WNHS14. Among several tested physicochemical determinants, casamino acids, KCl, and NaCl showed the most significant effects on enzyme production as determined from results of the One-Variable-At-A-time (OVAT) study. The BoxBehnken design localized the optimal levels of the three key determinants; casamino acids, KCl, and NaCl to be 0.5% (w/v), 0.02% (w/v), and 15% (w/v), respectively, obtaining 62.9 U/ml as the maximal amount of protease produced after treatment at 40℃, and pH 9 for 9 days with 6-fold enhancement in yield. The enzyme was partially purified after size exclusion chromatography with specific activity, purification fold, and yield of 1282.63 U/mg, 8.9, and 23%, respectively. The enzyme showed its maximal activity at pH, temperature, and NaCl concentration optima of 10, 75℃, and 2 M, respectively. Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF, 5 mM) completely inhibited enzyme activity.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제9권1호
• /
• pp.29-34
• /
• 1981

대장균으로부터 페니실린 아미다제의 생산을 최적화하기 위하여 배지조성 및 발효 중 효소생산에 미치는 제반영향들에 대하여 연구하였다. 최적배지조성은 3.5% 트립톤, 1.5% 글루타민산 소듐, 0.5% 이스트추출물 그리고 0.15%의 페닐초산이었다. 효소생산 유도물질로서 0.15%의 페닐초산을 발효초기에 가해줄 때 효소생산성이 약5배 증가하였다. 최적화된 배지 및 발효조건에서 발효 16시간만에 최대의 효소생산을 나타내었고 이때의 생산성은 약 102.5 units/l 발효액이었다. 이러한 최적조건에서 발효할 때 현재까지 보고된 효소생산성과 비교하여 상당한 생산능력의 향상을 보였다.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제39권2호
• /
• pp.99-103
• /
• 1996

토양으로부터 inulin을 기질로 하여 중합도가 큰 oligo당으로 가수분해하는 새로운 endo형 Inulinase 생산균주로, Arthrobacter sp. S37를 분리, 선발하였다. 본 효소의 생산은 inulin과 돼지감자 추출물에 의해 유도되었으며, 탄소원으로 1.5% 돼지감자 추출물, 유기질소원으로 1.0% yeast extract, 무기 질소원으로 0.5% $NaNO_3$를 사용하였을 때 효소 생산이 가장 많았다. 또한 최적 배양 pH와 온도는 각각 pH 8.0과 $30^{\circ}C$로 나타났다. 최적 배지와 최적 배양 조건하에서 배양한 결과 배양 24시간에 10.8 units/ml로 최대효소생산을 보였다.