쌀 단백질 유래의 감칠맛 소재를 개발하기 위해 도정 부산물인 미강과 쌀 단백질을 원료로 효소분해물을 제조하고 품질 특성을 평가하였다. 미강과 쌀 단백질의 비율을 4:0, 3:1, 2:2, 1:3(w/w)으로 달리하여 효소분해한 후 분해물의 특성을 분석한 결과, 3:1의 비율에서 질소분해율 및 감칠맛과 종합 기호도가 우수하였다. 효소분해 원료로 미강과 쌀 단백질을 3:1의 비율로 선정하여 13일 동안 효소분해를 진행하면서 시간에 따른 분해물의 특성을 분석하였다. 총질소, 아미노태 질소, 질소분해율은 분해 10일에서 최대값을 나타내었으며, 단백질 전기영동 결과 효소분해 시간이 길어질수록 펩타이드의 저분자화가 진행되는 것으로 추정되었다. 유리 아미노산 분석 결과 분해 시간에 따른 모든 효소분해물에서 감칠맛 성분인 glutamic acid 함량이 가장 높게 나타났으며, 효소분해 시간에 따라 쓴맛 성분은 감소했지만 단맛 성분은 증가하는 경향을 나타내었다. 관능적 특성(색, 향, 감칠맛, 종합기호도)은 분해 10일의 효소분해물에서 가장 우수한 기호도를 나타내었다. 따라서 미강과 쌀 단백질을 3:1의 비율로 하여 효소분해를 10일 동안 진행하였을 때 효소분해물은 쌀 유래의 감칠맛 소재로서 품질 특성이 우수하며, 영 유아식과 건강식에 다양하게 활용이 가능할 것으로 생각된다.
수산가공공장에서 원료어 처리시 대량으로 발생하는 비가식부의 하나인 대구의 고니부분을 효율적으로 이용하기 위하여 단백질을 효소로 가수분해시킨 후 한외여과막을 사용하여 분자량별로 분획하였으며, 이들 가수분해물 중 항산화활성이 뛰어난 펩타이드를 이온교환 크로마토그래피, 겔크로마토그래피 및 HPLC로 분리${\cdot}$정제하여 그 아미노산 서열을 결정하였다. 여러 가지 단백질 분해효소로 분해시켜 얻은 가수분해물 중에서 항산화활성이 가장 우수한 것은 Alcalase로 천연 항산화제인 ${\alpha}-tocopherol$보다 $5{\%}$정도 뛰어난 효과를 나타내었으며, 이 가수분해물을 한외여과막으로 분자량 10 kDa, 5 kDa 및 1 kDa의 세 종류로 분리하여 항산화활성을 측정한 결과, 1 kDa의 막을 통과하여 분리된 가수분해물이 가장 높은 활성을 나타내었으며, 이는 천연항산화제인 ${\alpha}-tocopherol$보다 $10{\%}$정도 높았다. 이 획분으로 Spsephadex C-25를 사용하여 이온교환 크로마토그래피를 한 결과, $0.5{\~}1.0 M$ NaCl 용액으로 용출시 킨 분획물에 서 ${\alpha}-tocopherol$보다 약 $17{\%}$ 활성이 높게 나타났으며, 이것을 다시 Sephadex G-15로 겔여과하여 3개의 획분을 얻었으며 이 중 획분 II에서 ${\alpha}-tocopherol$보다 약 $45{\%}$가 높은 항산화활성을 보인 획분을 얻었다. 이것을 역상 HPLC를 이용하여 5차의 획분을 얻었으며, 항산화활성은 획분 A에서 ${\alpha}-tocopherol$보다 약 $53{\%}$정도 높게 나타나 가장 우수하였다. 이 획분을 capillary electrophoresis로 순도를 확인하여 아미노산 서열을 결정한 결과 Ser-Asn-Pro-Glu-Trp-Ser-Trp-Asn였다.
Seahorse Hippocampus abdominalis a marine teleost fish, has long been used as one of the essential materials in traditional Chinese medicine. However, the uses of seahorse have been limited due to its high cost, despite its beneficial biological activities. Seahorse has not been widely explored for its biofunctional properties and active components. In the present study, the enzymatic hydrolysates of seahorse were prepared by using two digestive enzymes (trypsin and pepsin) and five food grade enzymes (neutrase, protamex, alcalase, kojizyme, and flavourzyme). The enzymatic hydrolysates indicated higher hydrolysis yields than its water extract. Among them, the distilled water-pepsin hydrolysate (DP) which was obtained by distilled water extraction followed by pepsin hydrolysis, showed the highest yield and protein content as well as the highest alkyl radical scavenging activity. Also, it provided protective effects against oxidative stress induced by AAPH in vero cell and zebrafish. Further fractionation based on the molecular weight was carried out to identify it’s active components, and < 5 kDa (less than 5 kDa) molecular weight fraction was confirmed to have the highest antioxidant activity. In conclusion, this study suggests that DP of seahorse has antioxidant properties, and might be a novel and useful material from the marine origin for healthy functional foods and cosmetics.
본 연구는 열수추출법에 의하여 추출한 세리신을 이용하여 단독 또는 2종의 효소를 이용하여 가수분해하고 그 가수분해물의 항산화 및 미백효과를 살펴본 것이다. 여러 산업용효소 중 세리신에 대한 분해효과가 우수한 alcalase, flavourzyme 및 protamex를 이용하여 분해한 결과 세리신의 분자량은 20 ${\sim}$ 30 kDa의 범위로 감소하였으며 사용한 효소별로 특이적 가수분해물이 나타났다. 세리신 가수분해물의 항산화능을 살펴본 결과 원래 세리신에 비하여 DPPH 소거율이 높게 나타났으며 flavourzyme과 protamex를 같이 사용한 경우 약 85 %의 소거율을 나타냈다. 티로시나아제의 활성억제 효과를 살펴본 경우에는 세리신 가수분해물이 오히려 더 낮은 억제효과를 나타내었으나 세리신 가수분해물의 분획을 실시하고 활성억제 효과를 살펴본 결과 F2와 P3의 분획이 상대적으로 우수한 억제 효과를 나타내었다.
An active ingredient with hyaluronidase (HAse) inhibitory effect is one of the anti-aging approaches in cosmeceuticals. Here, red sea cucumbers (RSCs), Stichopus japonicus, from Jeju Island were evaluated to examine their HAse inhibitory and antioxidant activity effect. In this study, RSCs were extracted by six enzymatic hydrolysis (Alcalase; Al, Trypsin; Try, Neutrase; Neu, Pepsin; Pep, Alpha-chymotrypsin; Chy and Protamex; Pro). Alcalase hydrolysate (AlH) showed the highest antioxidant capacities for both of oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) methods, compared to those of other hydrolysates, at $66.59{\pm}0.78{\mu}M\;TE/mg$ and $135.78{\pm}3.24{\mu}M\;TE/mg$, respectively. Furthermore, AlH performed the highest capacity of HAse inhibitory with $IC_{50}$ value of 3.21 mg/ml. Thus, RSCs hydrolyzed by Al were chosen to determine the cellular antioxidant activity and hyaluronic acid (HA) production effect on Human immortalized keratinocyte cell line (HaCaT). The results showed that AlH improved the cell viabilities and intracellular reactive oxygen species (ROS) induced by 2,2'-Azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) were significantly decreased. In addition, AlH increased HA amount by regulating HYAL2 and HAS2 expressions in the HaCaT cells. Taken together, AlH of RSCs collected from Jeju Island showed HAse inhibitory and antioxidant activities against skin-aging which shows its potentials can be an optional natural bioactive ingredient for novel cosmeceuticals.
Volatile components of whole sardine sauce which was prepared with $7\%$ of complex enzyme-2000($2.18{\cdot}10^4\;U/g solid$), mixed with $6\%$ of invert sugar and heated at $90^{\circ}C$ for 2 hours were compared with those of without invert sugar. Thirty seven kinds were identified from the whole volatile components of hydrolysate heated without invert sugar and fourty three kinds were identified from the hydrolysate heated with $6\%$ of invert sugar. Amines were not detected from the whole volatile components of the chopped whole sardine hydrolysate. Considerable amount of 2,3-dihydrobenzofuran and 2-acetylpyrrole, a little amount of 2,5-hydrofuran, 2-ethylbutanol, 2-pyrone, 2-acetylfuran, 2,6-dimethylpyrazine, 2-acetylpyrazine, 5-methyl-2-furfural, furfuryl acetate, butylpyrrole and 2-methyl-3-hydroxypyrone were detected in the hydrolysate thermally treated with $6\%$ of invert sugar while these were not found in the hydrolysate heated without invert sugar. But the amount of 2-methyt-1-propa-not, hexane, butyl acetate and butyl alcohol were decreased, and acetic acid and butanoic acid were detected as volatile fatty acids.
This study was conducted to investigate the hypotensive effect of egg white protein (EWP) hydrolysate (EWH) in spontaneously hypertensive rats (SHRs). The hydrolysis of EWP was effectively performed with a combination of 0.5% bromelain and 1% papain at 50℃ for 60 min. The resulting hydrolysate did not elicit an allergic reaction as confirmed by human mast cell activation test. The systolic and diastolic blood pressures of the SHRs fed the EWH diet were observed to be significantly or numerically lower than those of the other groups during the experimental period of 28 d. EWH treatment significantly (p<0.05) upregulated the nitric oxide levels in hCMEC/D3 cells and the plasma of the SHRs compared to those in the control. Moreover, EWH ingestion significantly (p<0.01) reduced the plasma angiotensin II level of the SHRs compared with that in the control. In conclusion, beyond its basic nutritional value, EWH prevents and manages hypertension, and thus can be an invaluable resource for functional food development.
Seahorses have long been used as ornamental and medicinal products. The sea horse Hippocampus abdominalis has a beautiful color and unique shape and is also used for ornamental purposes and as a traditional medicine in China. This study examined the value of H. abdominalis as a health functional food or food additive. H. abdominalis was hydrolyzed using seven proteases: flavourzyme, neutrase, alcalase, trypsin, kojizyme, pepsin and protamex. The yields of all of the enzyme hydrolysates were higher than that of the aqueous extract. Of the enzymatic hydrolysates, seahorse Protamex hydrolysate (SHP) gave the highest yield and had excellent antioxidant and angiotensin-I converting enzyme inhibitory activities. It protected Vero cells against oxidative by 2,2-azobis-(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) and antihypertension in Spontaneously Hypertensive Rats. This study attempted to demonstrate H. abdominalis as a health functional food or food additive in the future.
This study was conducted to compare the anti-allergic effects of a whey protein concentrate (WPC) and WPC hydrolysate. WPC hydrolysate was prepared using enzymatic digestion for 8 h with trypsin and ${\alpha}$-chymotrypsin, after which it was freeze-dried. The allergic parameters assessed in rat basophilic leukemia (RBL)-2H3 cells were degranulation and release of ${\beta}$-hexosaminidase, release of tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$, and changes in the expression of $IL-1{\beta}$, IL-4, and IL-10 by real time polymerase chain reaction (PCR). During preparation of the WPC hydrolysate, hydrolysis increased rapidly from 0 to 10 min and then gradually increased slowly from 1 h onwards, achieving a final degree of hydrolysis of 78.50%. The SDS-PAGE analysis revealed a reduction in the intensity of several protein bands in the WPC hydrolysate compared to the WPC. IgE-induced ${\beta}$-hexosaminidase release from RBL-2H3 cells was decreased to a higher degree following treatment with the hydrolysate compared to WPC treatment. W500 ($500{\mu}g/mL$ WPC) showed the least inhibition of ${\beta}$-hexosaminidase release, but there was no significant difference between W500 and W1000 ($1,000{\mu}g/mL$) (p<0.05). H1000 ($1,000{\mu}g/mL$ WPC hydrolysate) inhibited ${\beta}$-hexosaminidase release by 39%. Compared to the control, treatment with H1000 decreased $TNF-{\alpha}$ secretion to 11.87 pg/mL. The gene expression levels of IL-1${\beta}$, IL-4, and IL-13 were all significantly decreased in hydrolysate (p<0.05). In the case of $IL-1{\beta}$ and IL-4, the expression levels in W1000 treated cells were decreased by 73.67% and 65%, respectively, and that of IL-13 was decreased by 66.43% compared to the control.
Citrus 펙틴을 효소로 가수분해시켜 얻은 펙틴 분해물이 35%가 되면서부터 항균력이 서서히 나타나기 시작하여 75% 이상에서는 급격히 증가하였으며 완전분해(100)%)된 펙틴 분해물을 배지에 2.0% 첨가하면 $35^{\circ}C$에서 24시간까지 Escherichia coli ATCC 11229의 생육을 완전히 억제하였다. 펙틴분해물의 항균력은 pH 4.9~5.5 범위에서 가장 좋았으며 균종별로는 젖산균을 제외한 대부분의 세균에 대하여 강한 항균력을 나타내었고 젖산균과 곰팡이류에 대해서는 항균효과가 약하였으며 효모에 대하여는 전혀 영향을 미치지 않았다. 즉, 대부분의 세균은 펙틴 분해물을 2.0~3.0% 첨가하므로써 $35^{\circ}C$에서 48시간까지 생육이 완전히 억제되었으나 Lactococcus Lactis ATCC 19435, Lactobacillus Bulgaricus, Pencillium funiculosum ATCC 11797은 대조구에 비하여 30~40% 만이 억제되었으며 Saccharomyces formosensis와 Saccharomyces cerevisiae는 전혀 영향을 받지 않았다. 한편, glycine, ethanol, sodium ascorbate, sodium chloride 또는 sodium acetate 등의 화학보존료를 병용하면 펙틴 분해물을 단독으로 사용하였을 때 보다 항균력이 상승하였다. 김치에 펙틴 분해물을 1.0% 첨가하여 $4^{\circ}C$에 저장하면 섭취하기에 알맞은 김치를 pH를 유지하는 기간이 대조군에 비하여 적어도 15일 이상 연장되었다. 또한 빵속에 펙틴분해물을 1.5% 첨가하면 $25^{\circ}C$에서 저장 4일째 대조구에 비하여 4 log cycles 그리고 저장 10일까지도 2 log cylces 정도 균의 성장이 억제되었다. 따라서, 펙틴 분해물은 천연식품보존제로 이용가능하며 특히, 젖산균이나 효모에 대해서는 항균작용이 미약하거나 없으므로 젖산균이나 효모를 이용하는 발효식품의 품질보존제로서 아주 유용할 것으로 생각된다. 또한 기존의 화학 보존료와 병용하므로써 화학 보존료의 첨가량을 감소시킬 수 있다는 점에서도 유용하다고 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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