To evaluate the feasibility of mucosal delivery of thyrotropin releasing hormone (TRH) through various mucosae, enzymatic degradation and stabilization of TRH in the nasal, rectal and duodenal extracts of rabbits were studied. TRH in the extracts was assayed by HPLC and its degradation was found to follow apparent first-order kinetics. The residual concentrations of TRH in the mucosal extracts of nasal, rectal and duodenal segments after 24 hr of incubation were found to be $65.1({\pm}1.1),\;19.7({\pm}2.7)$ and 0%, and in the serosal extracts, $65.6({\pm}5.5),\;75.2({\pm}1.1)$ and $68.7({\pm}1.4)%$, respectively. This result suggests that there is a significant difference in the activity of TRH-degrading enzymes among the sites of administration. The inhibition of TRH degradation in the mucosa extracts was kinetically investigated using various additives such as thimerosal, benzalkonium chloride, disodium edetate, ${\sigma}-phenanthroline$, dithiothreitol and dithioerythritol, and $IC_{50}$ values of inhibitors were calculated. The results obtained showed that thimerosal (0.5 mM) and benzalkonium chloride (0.141 mM) protected TRH from the enzymatic degradation in all the mucosa extracts more than 95% after 24 hr of incubation.
The antioxidative activity of various enzymatic extracts from leaves of Perilla frutescens var. japonica was evaluated by measuring 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl, and alkyl radical scavenging activity using an electron spin resonance (ESR) spectrometer. For this study, the leaves were enzymatically hydrolyzed by 8 carbohydrases (Dextrozyme, AMG, Promozyme, Maltogenase, Termamyl, Viscozyme, Celluclast, and BAN) and 9 proteases [Flavourzyme, Neutrase, Protamex, Alcalase, PP-trypsin (trypsin from porcine pancreas), papain, pepsin, $\alpha$-chymotrypsin, and BP-trypsin (trypsin from bovine pancreas)]. The DPPH radical scavenging activities of Promozyme and Alcalase extracts were the highest, and the $IC_{50}$ values were 77.25 and $109.66\;{\mu}g/mL$, respectively. All enzymatic extracts of the leaves scavenged hydroxyl radical, and the $IC_{50}$ values of Celluclast and pepsin extracts which were the highest activity were 243.34 and $241.86\;{\mu}g/mL$, respectively. The BAN and $\alpha$-chymotrypsin extracts showed the highest scavenging activities, and the $IC_{50}$ values were 21.13 and $33.23\;{\mu}g/mL$, respectively. The pepsin extracts from the leaves showed protective effect on $H_2O_2$-induced DNA damage. In addition, the pepsin extracts decreased cell death in PC-12 cells against $H_2O_2$-induced oxidative damage. The findings of the present study suggest that enzymatic extracts of the leaves possess antioxidative activity.
Oh, Min Hui;Jang, Hye Lim;Lim, Ye Jin;Yoon, Kyung Young
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.47
no.4
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pp.413-418
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2015
This study was conducted to analyze the functional component contents and antioxidant activities of Cedrela sinensis extracts hydrolyzed using four different enzymes. The yield of Viscozyme extract was the highest among the samples, and all enzymatic extracts, except for the commercial glucoamylase (AMG) extract, had significantly higher total polyphenol and flavonoids contents compared to the non-enzymatic extract (p<0.05). Viscozyme extract showed the highest 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and $Fe^{2+}$ chelating ability among the samples. All enzymatic extracts showed high>90% 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) radical scavenging activity, and there was no significant difference between the enzymatic and non-enzymatic extracts. The reducing power of the extracts using Shearzyme or Viscozyme was significantly higher than that of the other samples (p<0.05). Therefore, the results indicated that all enzymatic extracts (especially Viscozyme extract), except for the AMG extract, showed high antioxidant activity compared to the non-enzymatic extract. These result suggested that the enzymatic extracts of C. sinensis can be used in functional foods.
Pylaiella littoralis was collected in the Chuuk lagoon of the Federated States of Micronesia (FSM). The FSM has a variety of coral reef ecosystems, which provide essential materials, such as minerals, vitamins, essential amino acids, for marine organisms. In this study, the antioxidant activities of ethanol and enzymatic extracts of P. littoralis were evaluated by measuring their scavenging activities on DPPH free radical, Alkyl radical, hydroxyl radical and cell viability. The enzymatic extracts were hydrolyzed to prepare water soluble extracts by using five carbohydrate degrading enzymes (AMG, Celluclast, Termamyl, Ultraflo, and Viscozyme) and five proteases (Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase, and Protamex). As a result, the enzymatic extracts prepared by Flavourzyme, Ultraflo, and Kojizyme exhibited the greatest effects in DPPH free radical, alkyl radical scavenging activity and cell viability. Also, these enzymatic extracts had a higher antioxidant effect then commercial antioxidants in DPPH free radical and Alkyl radical scavenging activity. This study suggests that P. littoralis might be a useful source of natural antioxidants for the development of dietary supplements.
The antioxidative activity of various enzymatic extracts from Sarcodon aspratus (S. aspratus) was evaluated by measuring 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), and alkyl radical scavenging activity using an electron spin resonance (ESR) spectrometer. For this study, the S. aspratus were enzymatically hydrolyzed by seven carbohydrases (Viscozyme, Celluclast, Dextrozyme, AMG, Promozyme, Maltogenase, and Termamyl) and eight proteases (${\alpha}$-chymotrypsin, Alcalase, Flavourzyme, Neutrase, papain, pepsin, Protamax, and trypsin). The DPPH radical scavenging activities of Viscozyme and pepsin extracts were the highest, and the half maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) values were 0.896 and 0.734mg/mL, respectively. The Celluclast and trypsin extracts showed the highest scavenging activities on alkyl radical, and their $IC_{50}$ values were 0.278 and 0.575mg/mL, respectively. The Celluclast extracts was decreased cell apoptosis in PC-12 cells against $H_2O_2$-induced oxidative damage. The findings of the present study suggest that enzymatic extracts of S. aspratus exhibit antioxidative activity against oxidative stress on PC-12 cells.
Enzymatic extracts were prepared from the blueberry (Vaccinium corymbosum L.) collected in Jeju, Korea. Five carbohydrases namely AMG, Celluclast, Termamyl, Ultraflo and Viscozyme, and five proteases namely Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase and Protamex were used to prepare the enzymatic extracts. Antioxidant properties of each extracts were studied using stable 1,1-diphenyl 2-picrylhydrazyl (DPPH), reactive oxygen species (ROS), nitric oxide (NO) scavenging, metal chelating assays and lipid peroxidation inhibitory activity in hemoglobin-induced linoleic acid system. The phenolic content of all enzymatic extracts was in the range of 517.85-597.96 mg/100 g dried sample. DPPH and NO${\cdot}$scavenging, and metal chelating assays exhibited prominent activities. Viscozyme showed the highest DPPH activity $(0.046{\pm}0.002\;mg/mL)$ while AMG Showed the highest activity in NO${\cdot}$scavenging $(0.339{\pm}0.011\;mg/mL)$. All the extracts exhibited strong metal chelating activities. Blueberry enzymatic extracts also showed relatively good activity in hydrogen peroxide scavenging. AMG showed the highest lipid peroxidation inhibitory activity $(0.28{\pm}0.01\;mg/mL)$ in hemoglobin-induced linoleic acid system. In this results, the blueberry, which has potential antioxidant components, may be a good candidate as a natural antioxidant source.
Effects of enzymatic hydrolysis of polysaccharides with using three commercial mixed enzymes (Ultrazyme, Celluclast, Viscozyme) were investigated on supernatant ratio, solid yields and viscosity of sea mustard extracts. The result showed that enzymatic hydrolysis prior to extraction increased the solids concentration up to 27.3% and the solids yield up to 14.0%. However the supernatant ratio after centrifugation of the sea mustard suspension was rather reduced. The viscosity of the extracts was significantly increased during initial enzymatic hydrolysis.
Sejeong, Kim;Yun-Ho, Jo;Bi-Oh, Park;Dae-Seok, Yoo;Doo-Ho, Kim;Min-Jung, Kim;Youn-Gil, Kwak;Jin-Seong, Kim
Journal of Marine Bioscience and Biotechnology
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v.14
no.2
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pp.61-68
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2022
This study aimed to investigate the hepatoprotective activities of the sea cucumber products, including extracts and hydrolysates, in vitro and in vivo. Dried sea cucumber, produced on the western coast of Korea, was boiled in water or 70% ethanol at 85℃ or 100℃ for 18 or 24 h, respectively, to extract bioactive compounds. The enzymatic hydrolysates were prepared by reacting the dried sea cucumber with pepsin or neutral protease (PNL) under optimal enzyme conditions. The anti-inflammatory effect of the samples was investigated using RAW 264.7 cells treated with lipopolysaccharide (LPS). The amount of nitric oxide (NO) was produced from the cells treated with LPS and each sample was compared. Therefore, the pepsin hydrolysate treatment decreased NO production compared to LPS sole treatment. Furthermore, the effects of the samples on cell injury in the hepatic cell line and bisphenolA-induced hepatic injury mouse model were investigated. The water extracts and the pepsin hydrolysates of sea cucumber significantly inhibited cell injury generated in the hepatocytes without cytotoxicity (p < 0.05), whereas the ethanol extracts were cytotoxic. However, these results indicate that the extracts and the enzymatic hydrolysates derived from sea cucumber can be used as beneficial materials for inhibiting liver damage.
Allergen extracts from dust mites and cockroaches commonly found in Korean homes were used to evaluate their enzymatic activity as they are believed to influence allergenicity. Allergen extracts were prepared from 3 dust mite species (Dermatophagoides farinae, D. pteronyssinus, and Tyrophagus putrescentiae) and 3 cockroach species (Blattella germanica, Periplaneta americana, and P. fuliginosa) maintained in the Korea National Arthropods of Medical Importance Resource Bank. Proteins were extracted in PBS after homogenization using liquid nitrogen. The activities of various enzymes were investigated using the API Zym system. No significant difference in phosphatase, lipase, or glycosidase activity was observed among the 6 allergen extracts, but much difference was observed in protease activity. Protease activity was assessed in more detail by gelatin zymography and the EnzChek assay. Extract from T. putrescentiae showed the highest protease activity, followed by those of the cockroach extracts. Extracts from D. farinae and D. pteronyssinus showed only weak protease activity. Gelatinolytic activity was detected mainly in a 30-kDa protein in D. farinae, a 28-kDa protein in D. pteronyssinus, a > 26-kDa protein in T. putrescentiae, a > 20-kDa protein in B. germanica, and a > 23-kDa protein in P. americana and P. fuliginosa. The information on various enzymatic activities obtained in this study may be useful for future studies. In particular, the strong protease activity found in cockroach extracts could contribute to sensitization to cockroach allergens, which is known to be associated with the development of asthma.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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