Antimicrobial agents have been used in poultry for treatment of bacterial infections or additives over the past half century. However, increasing antimicrobial resistance has led to selective pressure for therapeutic use in humans and made treatment of bacterial infection more difficult. In this study, we examined the prevalence of plasmid mediated antimicrobial resistant determinants for resistance to ${\beta}-lactam$, quinolone, and aminoglycoside in Enterobacteriaceae isolates obtained from chickens in Gyeongsang provinces, and correlation between the resistant genes and antimicrobial resistance rate was also assessed. A total of 43 Enterobacteriaceae isolates were recovered from 40 chickens at Gyeongsang provinces in Korea. Antimicrobial susceptibility was determined by disk diffusion method. PCR and DNA sequencing were performed to characterize the antimicrobial resistant genes. Of the 43 Enterobacteriaceae isolates tested, 2 isolates harbored $bla_{CTX-M-14}$ gene, and 2 and 5 strains contained qnrS and aac(6')-Ib-cr genes, respectively. A total of 43 isolates displayed a relatively lower susceptible rate ranging between 0.0 and 23.3% to most of the antimicrobial agents, except cefepime, ceftazidime, and cefaclor. We confirmed that plasmid mediated antimicrobial resistant determinants were distributed in Enterobacteriaceae isolates from chickens. Investigation of the genes and monitoring of antimicrobial resistance rate is required to prevent further spreading of antimicrobial resistant genes among Enterobacteriaceae isolates.
The correct distinction of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) and ccarbapenemase producing Enterobacteriaceae (CPE) and the rapid detection of CPE are important for instituting the correct treatment and management of clinical infections. Screening protocols are mainly based on cultures of rectal swab specimens on selective media followed by phenotypic tests to confirm a carbapenem-hydrolyzing activity, the rapid carbapenem inactivation method, lateral flow immunoassay, the matrix-assisted laser desorption ionization-time-of-flight test and molecular methods. The CPE is accurate for detection, and is essential for the clinical treatment and prevention of infections. A variety of phenotypic methods and gene-based methods are available for the rapid detection of carbapenemases, and these are expected to be routinely used in clinical microbiology laboratories. Therefore, to control the spread of carbapenemase, many laboratories around the world will need to use reliable, fast, high efficiency, simple and low cost methods. Optimal effects in patient applications would require rapid testing of CRE to provide reproducible support for antimicrobial management interventions or the treatment by various types of clinicians. For the optimal test method, it is necessary to combine complementary test methods to discriminate between various resistant bacterial species and to discover the genetic diversity of various types of carbapenemase for arriving at the best infection control strategy.
Yoon, Eun-Jeong;Hong, Jun Sung;Yang, Ji Woo;Lee, Kwang Jun;Lee, Hyukmin;Jeong, Seok Hoon
Annals of Laboratory Medicine
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v.38
no.6
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pp.555-562
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2018
Background: The emerging mobile colistin resistance gene, mcr-1, is an ongoing worldwide concern and an evaluation of clinical isolates harboring this gene is required in Korea. We investigated mcr-1-possessing Enterobacteriaceae among Enterobacteriaceae strains isolated in Korea, and compared the genetic details of the plasmids with those in Escherichia coli isolates from livestock. Methods: Among 9,396 Enterobacteriaceae clinical isolates collected between 2010 and 2015, 1,347 (14.3%) strains were resistant to colistin and those were screened for mcr-1 by PCR. Colistin minimum inhibitory concentrations (MICs) were determined by microdilution, and conjugal transfer of the mcr-1-harboring plasmids was assessed by direct mating. Whole genomes of three mcr-1-positive Enterobacteriaceae clinical isolates and 11 livestock-origin mcr-1-positive E. coli isolates were sequenced. Results: Two E. coli and one Enterobacter aerogenes clinical isolates carried carried IncI2 plasmids harboring mcr-1, which conferred colistin resistance (E. coli MIC, 4 mg/L; E. aerogenes MIC, 32 mg/L). The strains possessed the complete conjugal machinery except for E. aerogenes harboring a truncated prepilin peptidase. The E. coli plasmid transferred more efficiently to E. coli than to Klebsiella pneumoniae or Enterobacter cloacae recipients. Among the three bacterial hosts, the colistin MIC was the highest for E. coli owing to the higher mcr-1-plasmid copy number and mcr-1 expression levels. Ten mcr-1-positive chicken-origin E. coli strains also possessed mcr-1-harboring IncI2 plasmids closely related to that in the clinical E. aerogenes isolate, and the remaining one porcine-origin E. coli possessed an mcr-1-harboring IncX4 plasmid. Conclusions: mcr-1-harboring IncI2 plasmids were identified in clinical Enterobacteriaceae isolates. These plasmids were closely associated with those in chicken-origin E. coli strains in Korea, supporting the concept of mcr-1 dissemination between humans and livestock.
Bacteria isolated from Cheonsu Bay at 4 seasons were analyzed by numerical taxonomic method. Results of 48 morphological, physiological and biochemical tests showed different adaptability of bacteria to temperature in consequence with sampling season and isolated bacteria were able to survive at various environmental conditions, Identification results revealed that Enterobacteriaceae, Aeromonas, Pseudomonas and Vibrio were dominant genera in geterotrophic bacterial community. For each season, Aeromonas was most dominant in spring and autumn, Pseudomonas and Enterobacteriaceae in summer and winter, respectively. Cluster ananlysis was performed and all vacteria were clustered into 29 phenetic groups. Seasonal characteristics were distict in each group. Different physiological characteristics and species compositions for each season contribute to the stability and diversity of environmental ecosystem.
This study was conducted to develop a real time reverse transcriptase-PCR (RT-PCR) method for the detection of viable Enterobacteriaceae in milk using primers based on the genes of ribosomal proteins S11 and S13 and to determine effects of heating and subsequent treatments on the threshold cycle (Ct) of the real time RT-PCR. Total RNA was isolated from 17 strains of bacteria including 11 strains of Enterobacteriaceae suspended in milk using a modified Tri reagent method. SYBR Green Master Mix was added to the RNA and the mixture was subjected to the real time RT-PCR. The Cts of eleven type strains of the Enterobacteriaceae in milk ($10^7$ cells) in the real time RT-PCR ranged from 21.5 to 24.6. However, the Cts of Pseudomonas fluorescens, Acinetobacter calcoaceticus, and three gram-positive bacteria were more than 40. The real time RT-PCR detected as low as $10^3$ cells in agarose gel electrophoresis. The Cts increased from 22.0 to 34.2 when milk samples contaminated with Escherichia coli ($10^7$ cells/mL) were heated at $65^{\circ}C$ for 30 min. In addition, subsequent incubation at $37^{\circ}C$ for 6 and 24 h increased the Cts further up to 36.2 and 37.2, respectively. Addition of RNase A to the bacterial suspension obtained from the heated milk and subsequent incubation at $37^{\circ}C$ for 1 h increased the Cts to more than 40. The results of this study suggests that pretreatment of bacterial cells heated in milk with RNase A before RNA extraction might enhance the ability to differentiate between viable and dead bacteria using real time RT-PCR.
Kim, Hyun-do;Yun, Chul-Won;Choi, Jong-il;Han, Se Jong
Korean Chemical Engineering Research
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v.53
no.4
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pp.524-529
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2015
This study was conducted to optimize the medium composition for cold-adaptive protease production of Enterobacteriaceae sp. by response surface methodology (RSM). Yeast extract, and TritonX-100 were identified as the significant factors affecting protease from one-factor-at-a-time method. RSM studies for optimizing protease production of Enterobacteriaceae sp. have been carried out for three parameters including yeast extract concentration, TritonX-100 concentration, and culture pH. These significant factors were optimized as 6.690 g/L yeast extract, 0.018 g/L Triton$^{TM}$ X-10, and pH 6.677. The experimentally obtained protease activity was 8.03 U /L, and it became 1.5-fold increase before optimization.
In vitro antimicrobial activities of hot water extracts of Camellia sinensis (L.) O. Kuntze, for carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) were compared to commonly used conventional antimicrobial agents. CRE was not only resistant to imipenem, meropenem or ertapenem, but also to various antimicrobial agents, such as amikacin (> $128{\mu}g/mL$). The hot water extracts of Camellia sinensis (L.) O. Kuntze had the lowest MIC ($0.06{\sim}0.5{\mu}L/mL$) of the carbapenem-resistant E. coli, K. pneumoniae, and Enterobacter spp. tested, and it was possible more potent than various conventional antimicrobial agents. Synergistic combinations of the extract with used commonly antimicrobial agents might even improve its antimicrobial chemotherapy property.
File fish fillets collected from markets were analyzed for their microbial load and microflora, resulting in the level of aerobic mesophiles ranged from $3.5{\times}10^3$ to $1.1{\times}10^8CFU/g$, total coliforms from less than 2.3 to $4.6{\times}10^5MPN/g$, fecal coliforms from 1ess than 2.3 to $1.1{\times}10^5MPN/g$, Enterobacteriaceae from $3{\times}10$ to $4.4{\times}10^5CFU/g$ and fecal Streptococci from $1.6{\times}10^2$ to $7.6{\times}10^6CFU/g$ having Staphylococcus hominis, Staphylococcus hemolyticus, Micrococcus varians, Micrococcus luteus and Streptococcus cremoris as constituent microorganisms of aerobic mesophiles, Escherichia coli and Proteus rettgeri of Family Enterobacteriaceae, and Streptococcus faecium and Streptococcus avium of fecal Streptococci.
Purpose: This study was aimed to evaluate the external validity of a carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) acquisition risk prediction model (the CREP-model) in a medium-sized hospital. Methods: This retrospective cohort study included 613 patients (CRE group: 69, no-CRE group: 544) admitted to the intensive care units of a 453-beds secondary referral general hospital from March 1, 2017 to September 30, 2019 in South Korea. The performance of the CREP-model was analyzed with calibration, discrimination, and clinical usefulness. Results: The results showed that those higher in age had lower presence of multidrug resistant organisms (MDROs), cephalosporin use ≥ 15 days, Acute Physiology and Chronic Health Evaluation II (APACHE II) score ≥ 21 points, and lower CRE acquisition rates than those of CREP-model development subjects. The calibration-in-the-large was 0.12 (95% CI: - 0.16~0.39), while the calibration slope was 0.87 (95% CI: 0.63~1.12), and the concordance statistic was .71 (95% CI: .63~.78). At the predicted risk of .10, the sensitivity, specificity, and correct classification rates were 43.5%, 84.2%, and 79.6%, respectively. The net true positive according to the CREP-model were 3 per 100 subjects. After adjusting the predictors' cutting points, the concordance statistic increased to .84 (95% CI: .79~.89), and the sensitivity and net true positive was improved to 75.4%. and 6 per 100 subjects, respectively. Conclusion: The CREP-model's discrimination and clinical usefulness are low in a medium sized general hospital but are improved after adjusting for the predictors. Therefore, we suggest that institutions should only use the CREP-model after assessing the distribution of the predictors and adjusting their cutting points.
Effects of 7.5% potassium sorbate and/or 1% ascorbic acid dip on she]f-life of chicken parts stored at $4^{\circ}C$ was investigated. There was no remarkable difference in the microbial growth between 1% ascorbic acid dipped chicken parts and untreated chicken parts. Off-odor developed after 8 days storage and bacterial spoilage was occurred after 12 days storage. 7.5% potassium sorbate dip significantly retarded mesophilic and psychrotrophic counts compared with untreated, markedly reduced growth rate of Enterobacteriaceae. Fecal coliforms were not detected and bacterial spoilage was not occurred until 21 days storage. off-odor developed after 19 days storage and color was not significantly deteriorated until 21 days storage. Additional effect of 7.5% potassium sorbate and 1% ascorbic acid dip was found on retarded mesophilic, psychrotrophic and Enterobacteriaceae counts compared with 7.5% potassium sorbate dip alone. Bacterial spoilage was not occurred until 21 days storage. off-odor developed after 21 days storage and color was not significantly deteriorated until 21 dayss storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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