Bacteria causing fermentation in Oriental melon were identified as three independent groups on the basis of 16S rDNA sequence analysis. The 16S rDNA sequence of the strain CM2105 showed the highest identity (99.6%) with that of Microbacterium phyllosphaerae, and also indicated high sequence identity to that of M. holiorum (99.5%). The 16S rDNA sequences of the strain CM2101 and CM2121 matched at the high sequence similarity (98.9%, 98.8, respectively), to that of Pseudomonas pavonacea, and the DNA sequence of CM2126 showed high sequence identity to that of P. costantinii (99.5%), and P. grimontii (99.0%). The 16S rDNA sequence of the strain CM2113 showed the highest identity (99.7%) with that of Enterobacter cloacae. The 16S rDNA sequences, the physiological and biochemical analysis suggested that the strain CM2105 belonged to Microbacterium phyllosphaerae, CM2101, CM2121 and CM2126 to Pseudomonas spp., CM2113 to Enterobacter cloacae.
A total of 136 coliform bacteria isolated from spring water (112 strains) and ground water (24 strains), submitted to Seoul Health and Environmental Research Institute from June to July in 1997, were characterized biochemically and microbiologically. Colonical characteristics of each isolate were also noted, including color and texture on EMB agar. Among the 136 isolates, 50.7% were greenish metallic sheen color, 44.2% were pink and 5.1% were violet. The sixty four percent were smooth, 34.6% were mucoid and 0.7%. were rough. Twenty three bacterial species were identified by IMViC and API 20E test. Among the 136 coliform bacteria known to species, 39 isolates (28.6%) were Escherichia spp., 32 isolates (23.5%) were Klebsiella ssp., 30 isolates (22.1%) were Enterobacter spp., 19 isolates (14.0%) were Serratia spp., 6 isolates (4.4%) were Citrobacter spp., 4 isolates (3.0%) were Kluyvera spp. and 7 isolates (5.1%) were other bacterial species. Strains, which were gas-positive in lactose broth but gas-negative in Kligler Iron Agar were Ent. intermedium, Ser. liquefaciens, Ser. marcescenes and Salmonella arizoae. Strains, which were H2S production were also Kleb. pneumoniae, Kleb. oxytoca, Kleb. ornithinolytica, Ent. sahazahii, Ent. cloacae, Ser. liquefaciens, Ser. fica ria, Cit. freundii and Sal. arizoae. In the present study, most of coliform isolated from spring and ground water were E. coli, Klebsiella spp. and Enterobacter spp. Since coliform with pink colony in EMB agar was isolated as frequent as coliform with greenish metallic sheen colony, coliform with pink colony should be considered as important colony. Our results suggested that new coliform strains may be emerging on the basis of biochemical and microbiological testes.
The present study was to investigate the source of contamination during semen processing for in vitro uses. In the present study, frozen semen was prepared from liquid semen in our laboratory for in vitro fertilization (IVF) experiments due to lack of fresh semen. Antibiotics were added in the frozen semen extender (kanamycin and gentamicin) and in vitro culture (IVC) medium (gentamicin) for further inhibiting growth of microorganisms. Nevertheless, proliferations of microorganisms were observed in IVC culture drop during culturing of IVF embryos using frozen semen. Randomly 3 samples were taken from the liquid semen, frozen semen and egg yolk. Contaminated IVC medium, frozen-thawed semen, liquid semen and egg yolk were cultured in de Man, Rogosa and Sharpe (MRS) agar medium. Whitish colonies were detected in contaminated IVC drop, frozen-thawed semen samples and egg yolk but no colonies were formed in liquid semen samples. Gram-negative and rod-shaped identical bacteria were found in both frozen-thawed semen sample and contaminated IVC drop and egg yolk samples. Enterobacter cloacae were confirmed by API 20E kit according to manufacturer's instruction with identification value (% ID) 94.3% and T index 0.88. Antibiotic susceptibility tests were done according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) by using ampicillin, amikacin, cephalothin, gentamicin, kanamycin, tetracycline, oxytetracycline, sulfamethoxazole trimethoprim, norfloxacin and ciprofloxacin test. Among them Enterobacter cloacae were resistant to ampicillin, amikacin, cephalothin, gentamicin, kanamycin but susceptible to tetracycline, oxytetracycline, sulfamethoxazole trimethoprim, norfloxacin and ciprofloxacin. From these findings it could be suggested that this contamination sources might be from egg yolk.
This experiment was carried out to obtain the basic information on processing for product of high quality goods in Artemisia capillaris. We investigated antioxidant and antimicrobial activities by harvesting date and plant parts in Artemisia capillaris. Contents of total polyphenol compounds and flavonoids were the highest in leaf, followed by capitulum and stem. Leaf on June 30 contained 76.7 mg/g DW total phenolic compounds and 78.2 mg/g DW flavonoids. As $RC_{50}$ value, that was, the concentration of sample required for 50% reduction of DPPH (2,2-diphenyl-l-picrylhydrazyl) absorbance, was very low as $5.42\;{\mu}g$ in leaf on June 30, antioxidant activity was the highest. In addition, $RC_{50}$ of BHA, BHT and ${\alpha}-tocopherol$ were $3.09\;{\mu}g$, $24.30{\mu}g$ and $2.87{\mu}g$, respectively. And capitulum had antimicrobial activities against Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii, Vibrio vulnificus, Pseudomonas aeruginosa, Saccharomyces cerevisiae. By the way, leaf and stem rarely had antimicrobial activity. Antimicrobial activities of capitulum according to harvesting date were very various. Capitulum on August 30 had the highest antimicrobial activities against Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Vibrio vulnificus, Saccharomyces cerevisiae and on July 30 against Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii, Pseudomonas aeruginosa.
The effects of carbon sources for exopolysaccharide production during batch cultivation of an Enterobacter sp. isolated from the composter were investigated. The highest amount of exopolysaccharide was obtained when lactose was used as carbon source. Lactose in medium was converted into glucose and galactose. Glucose was metabolized fast and was completely consumed, but about $20\%$ of lactose was accumulated as galactose. On the other hand, enzyme activity was about $350\~450$ unit with the increase of lactose concentration. Thus, it was considered that the exopolysaccharide might be produced in the course of that lactose was hydrolyzed into glucose and galactose by $\beta-galactosidase$ with respect to that enzyme activity on lactose hydrolysis was accorded to the exopolysaccharide production. When glucose and galactose were added to lactose medium, respectively, it could be considered that glucose was as a repressor and galactose was as a inducer for $\beta-galactosidase$ synthesis even though the mechanisms were not elucidated. The increase of lactose concentration was almost ineffective to the specific growth rate $(0.133\~0.151\;hr^[-1})$ but showed the difference in the biomass content. The higher carbon source concentration, the more residual sugar remained. It was assumed that the optimum lactose concentration for exopolysaccharide production was $30\~70g/L.$ On the other hand, it was considered that the nitrogen acted as growth limiting nutrients to the cell growth. In the cases of 30 and 70 g/L of the fixed carbon concentrations, the increase of the nitrogen sources concentration caused a remarkable increase within the range of $0.059\~0.225\;hr^{-1}$ and $0.141\~0.237hr^{-1}$ of the specific growth rate, respectively, while there was no significant difference in biomass.
Enterobacteriaceae is one of the major families responsible for public health threats. Due to the emergence of pathogens with antibiotic resistance, great concern has been raised regarding the prevalence of antibiotic resistant bacteria in natural environments. Therefore, the diversity of Gram negative Enterobacteriaceae was investigated in water samples collected from five streams in Korea using the cultivation method. Profiling of multi-drug resistance was conducted with isolates via disk diffusion assay. The results indicated that the Gram negative Enterobacteriaceae consisted of the following genus; Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, Klebsiella, Kluyvera, Pantoea, Plesiomonas, Raoultella, Shigella and Enterobacter. These latter strains represented 49% of identified isolates. In addition, 78.3% of the identified genus exhibited resistance against more than seven out of thirteen tested antibiotics, suggesting a high prevalence of multi-drug resistant bacteria in natural environments.
Park Hee-Kyung;Shim Sung-Sub;Kim Su-Yung;Park Jae-Hong;Park Su-Eun;Kim Hak-Jung;Kang Byeong-Chul;Kim Cheol-Min
Journal of Microbiology
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v.43
no.4
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pp.345-353
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2005
The complex ecosystem of intestinal micro flora is estimated to harbor approximately 400 different microbial species, mostly bacteria. However, studies on bacterial colonization have mostly been based on culturing methods, which only detect a small fraction of the whole microbiotic ecosystem of the gut. To clarify the initial acquisition and subsequent colonization of bacteria in an infant within the few days after birth, phylogenetic analysis was performed using 16S rDNA sequences from the DNA iso-lated from feces on the 1st, 3rd, and 6th day. 16S rDNA libraries were constructed with the amplicons of PCR conditions at 30 cycles and $50^{\circ}C$ annealing temperature. Nine independent libraries were produced by the application of three sets of primers (set A, set B, and set C) combined with three fecal samples for day 1, day 3, and day 6 of life. Approximately 220 clones ($76.7\%$) of all 325 isolated clones were characterized as known species, while other 105 clones ($32.3\%$) were characterized as unknown species. The library clone with set A universal primers amplifying 350 bp displayed increased diversity by days. Thus, set A primers were better suited for this type of molecular ecological analysis. On the first day of the life of the infant, Enterobacter, Lactococcus lactis, Leuconostoc citreum, and Streptococcus mitis were present. The largest taxonomic group was L. lactis. On the third day of the life of the infant, Enterobacter, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, S. mitis, and Streptococcus salivarius were present. On the sixth day of the life of the infant, Citrobacter, Clostridium difficile, Enterobacter sp., Enterobacter cloacae, and E. coli were present. The largest taxonomic group was E. coli. These results showed that microbiotic diversity changes very rapidly in the few days after birth, and the acquisition of unculturable bacteria expanded rapidly after the third day.
The rapid increase and dissemination of carbapene mases, such as Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC), has become a major problem within the field of healthcare-related infection. There are few antibiotics to treat carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) infections, so the identification of resistant bacterial mechanisms is critical to initiate infection control and conduct epidemiological research. A rapid and effective method for detecting KPC-producing bacteria is needed to avoid therapeutic failures and introduce measures to prevent and control the dissemination of these multi-resistant bacteria. During the study period, 31 isolates (seven isolates of Acinetobacter spp., six isolates of Morganella morganii, five isolates of Pseudomonas aeruginosa, five isolates of Proteus mirabilis, one isolate of Proteus vulgaris, two isolates of Enterobacter cloacae, one isolate of Enterobacter aerogenes, one isolate of Klebsiella pneumoniae, one isolate of Klebsiella oxytoca, one isolate of Serratia marcescens and one isolate of Escherichia coli) were identified by the VITEK. Gram negative rod bacteria were the most frequently isolated from urine (35.5%), blood (19.4%), sputum (16.1%), pus (9.7%), ascitic fluid (9.7%), tracheal aspirates (6.5%) and bile juice (3.2%). Analysis using the PCR method identified the blaKPC gene in the K. oxytoca1 strain, but the blaIMP, blaVIM and blaOXA-48 genes are not amplified. In conclusion, diagnosis using the PCR method can accurately and quickly diagnose KPC, thus establishing quick preventive measures to prevent the spread of KPC in hospitals.
Kim, Sun-Ae;Lee, Yu-Mi;Oh, Se-Wook;Gwak, Hyo-Sun;Hwang, In-Gyun;Kang, Dong-Hyun;Woo, Gun-Jo;Rhee, Min-Suk
Food Science of Animal Resources
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v.29
no.6
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pp.702-708
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2009
We investigated biofilm formation in various media, growth in low pH, and the hemolytic activity of 14 strains of Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) isolated from a variety of foods including powdered infant formula (n=75), infant cereal (n=100), honey (n=30), and other infant foods (n=100) in Korea. The Cronobacter spp. adhered and formed biofilms on polyethylene, and a greater extent of biofilm was observed in nutrient-rich media. No clear difference in biofilm-forming ability was noted among the media constituents and the pattern of biofilm formation was strain-dependent. Seven strains out of 14 strains (50%) grew at pH 4.1, indicating that the acid resistance of these Cronobacter spp. isolated in Korea was relatively low. Hemolytic activity was not observed in any of the strains. This study provides basic information for the physiological and biochemical characteristics of Cronobacter spp. isolated from a variety of infant foods in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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