This study was carried out to investigate the appropriate medium and constitutionof growth regulators for somatic embryogenesis for development of rapid mass propagation system via somatic embrygenesis in Rehmennia glutinosa. Embryogenic callus formation from leaf explant was more effective when 4mg / l BA with 0.5mg / l NAA than that of treated with only auxins or cytokinins. LS medium was suitable for embryogenic callus formation. LS medium with 4mg / l BA with 0.5mg / l NAA was effective for the maintenance and proliferation of embryogenic callus. In suspension culture, addition of 1mg / l BA to LS medium was proper for somatic embryogenesis. The highest rate of shoot developement form cotyledon stage embryo was obtained in 1/2 LS medium and plantlet survived by 75% after transplanted to the soil. after 4 weeks.
This study was carried out to select the appropriate medium(especially, carbon and nitrogen source ) for somatic embryogenesis in order to develop the rapid mass production system in suspension culture of chuanxiang Hort. Suitable medium for somatic embryo formation was MS medium. The half strength MS medium was effective for somatic embryo development. Sucrose was the most effective carbon source for somatic embryo formation, however, production of somatic embryos was reduced at higher concentration of sucrose. Effects of suger was the same as sucrose. Somatic embryo formation was higher as the decrease of $NH_{4}NO_3$, and optimum ratio of $KNO_3\;:\;NH_4NO_3$ was 825 : 238mg /1. Regenerated plant was obtained in MS basal medium and survival late of plantlet was 60-70% after transplanted directly to the vermiculite.
This study was carried out to elucidate the effect of cadmium on somatic embryogenesis and plant regeneration from cultured cells of Daucus carota L. Embryogenic calli were induced from cotyledon explants of carrot seedlings cultured on MS solid medium supplemente with 1 mg/L 2,4-D Embryogenic cells proliferated on medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D were also cultured in liquid MS medium containing various concentrations (50, 100, 200, 500, 1000 $\mu$M) of cadmium for one week and then transferred to MS basal medium. Somatic embryogenesis occurred in suspension culture treated with 50 $\mu$M and 100 $\mu$M cadmium or untreated with cadmium. When cadmium was treated in suspension culture, production of two and four cotyledonary somatic embryos was reduced, but that of three cotyledonary somatic embryo was increased. Two cotyledonary embryos showed higher regeneration frequency than abnormal somatic embryo with one, three and four cotyledon. Regardless of cotyledonary variation, germination frequency of somatic embryos treated with cadmium was decreased in compared with that of embryos in basal medium.
Young Hee Kwon;Joung Kwan Lee;Hee Kyu Kim;Kyung Ok Kim;Ju Hyoung Kim
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2020.08a
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pp.19-19
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2020
The Cassava(Manihot esculenta Crantz) is a tropical root crop, originally from Amazonia, that provides the staple food of an estimated 800 million people worldwide. It belongs to the family Euphorbiaceae which also includes rubber (Hevea brasiliensis) and castor bean (Ricinus communis). Among tropical crops, rice, sugarcane, maize and cassava are the most important sources of calories for human consumption. Problems in the propagation of cassava are virus diseases and low rates of seed germination. So we tried to optimize protocols for mass production of somatic embryo amenable to large-scale vegetative propagation of Cassava. After in vitro eight-week culture of leaves of Cassava, the medium which contained the 2,4-D, BAP and IBA showed the highest callus induction rate, embryogenesis callus formation rate and somatic embryo formation in Cassava culture. In the medium with GA3 and myo-inositol, shoots were most vigorously regenerated from somatic embryos of Cassava. Our experiments confirmed that in vitro growth and multiplication of plantlets could depend on its reaction to the different medium composition, and this micropropagation techniques could be a useful system for healthy and vigorous plant production.
Toxic assessment of antifouling agents (diuron and irgarol) was conducted using the fertilization and the normal embryogenesis rates of the sea urchin, Mesocentrotus nudus. Bioassessment began with male and female reproductive cell induction. White or cream-colored male gametes(sperm) and yellow or orange-colored female gametes (eggs) were acquired and fully washed, separately. Then, the fertilization and normal embryogenesis rates were measured after 10 min and 48 h of exposure to the toxicants, respectively. The fertilization and embryo development rates were greater than 90% in the control, validating the suitability of both endpoints. The normal embryogenesis rates were significantly decreased with increasing concentrations of diuron and irgarol, but no changes in the fertilization rates were observed in concentrations ranging from 0 to 40 mg L-1. The EC50 values of diuron and irgarol for the normal embryogenesis rates were 20.07 mg L-1 and 22.45 mg L-1, respectively. The no observed effect concentrations (NOEC) were <1.25 mg L-1 and the lowest observed effect concentrations (LOEC) were 1.25 mg L-1 and 2.5 mg L-1, respectively. From these results, concentrations of diuron and irgarol over 1.25 mg L-1 and 2.5 mg L-1, respectively, can be considered to have toxic effects on invertebrates, including M. nudus. The ecotoxicological bioassay in this study using the noted fertilization and normal embryogenesis rates of M. nudus can be used as baseline data for the continued establishment of environmental quality standards for the effects of antifouling agents(especially diuron and irgarol) in a marine environment.
Immature embryogenesis is a useful process in wheat tissue culture, including transgenic technology, because of its high regeneration efficiency compared to that in other tissues. However, it is a very labor-intensive and time-restrictive method, because the preparation of immature embryos is limited to the optimal time after flowering. In this experiment, 'Speed Breeding', a breeding technique that accelerates breeding generation advancement by extending the photoperiod, was applied to the wheat variety 'Bobwhite'. A controlled growth room was constructed by adjusting the photoperiod (22-hour light/2-hour dark) using LED lights at temperature of 22℃. After vernalization of the Bobwhite seeds at 4℃ for 4 weeks, the seedlings were grown in a controlled growth room and a greenhouse to compare the heading date. In both conditions, calli were induced from immature embryos on the 11th day after flowering. After 4 weeks, the calli were transferred to a regeneration medium. Regeneration efficiencies under greenhouse conditions and Speed Breeding conditions were determined as 45.05% and 43.18%, respectively. Antioxidant enzyme activity and reference gene expression analysis were performed to confirm the presence of stress due to an extremely long-day photoperiod. As a result, the antioxidant enzyme activity was not distinguished from that of the greenhouse condition. The reference gene expression analysis revealed that the PsaA and CDC genes were highly expressed under the Speed Breeding condition. However, expression of PsbA was similar expression in both conditions. These results will provide useful information for the application of immature embryogenesis to the wheat transformation system.
The objective of this study is to establish an efficient celll culture system for somatic embryogenesis in Ostericum koreanum and Angelica purpuraefolia. The highest frequency of embryogenic callus on immature seeds of O. konanum and A, purpuraefolia. was obtained when seeds were cultured on MS medium containing 0.1 mg/L 2,4-D and 0.1 mg/L BA. However somatic embryos were formed directly from the edge of cotyledon and hypocotyl of plant which regenerated on medium supplemented with 0.1-3.0 mg/L NAA. Immature seed explane cultured at 25$\pm$2$^{\circ}C$ after 10 days treatment at 5$^{\circ}C$ produced embryogenic callus and somatic embryos, and these differentiated into whole plane. Addition of glutamine and coconut milk to media did not enhance the frequency of somatic embryogenesis in immature seed cultures of A. purpuraefolia. However in immature seed culture of O. koreanum, the frequency of somatic embryogenesis were increased on media supplemented with glutamine and 10% coconut milk. Especially addition of glutamine to the medium substituted effect of NH$_4$N0$_3$ in constast to coconut milk. The highest frequency of conversion somatic embryos into plantlet was 89.1% on MS basal medium Embryogenic calli were grown vigorously when maintained on medium with 0.01 mg/L 2,4-D and 0.01 mg/L BA.
Choi, Han;Lee, Seung Youn;Ryu, Sun Hee;Yoon, Sae Mi;Kim, Sang Yong;Lee, Jong Suk;Yang, Jong Cheol
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.80-80
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2018
Hosta is a genus of the family Asparagaceae and distributed in East Asia. There are six Hosta species (Hosta capitata (Koidz.) Nakai, H. clausa Nakai, H. jonesii M.G.Chung, H. minor (Baker) Nakai, H. venusta F.Maek., and H. yingeri S.B.Jones) native to Korea and among them, four species (H. minor, H. jonesii, H. venusta and H. yingeri) are endemic to the Korea peninsula. Hosta is generally propagated by seed, crown division or tissue culture. However, tissue culture is a more efficient method to mass proliferation, a new cultivar development and disease-free plantlet production in a limit time. Hence, we conducted this study to evaluate the influence of various plant growth regulators (PGRs) treatments on the induction of callus and somatic embryo of the six Hosta species. Leaf, petiole and root were used to select optimum tissue culture explants. Petiole explants thus only were used for callus induction and somatic embryogenesis with TDZ (0.1, 0.5 or 1.0mg/L) and NAA (0.1 or 0.5 mg/L) combinations. After 12 weeks of culture, the highest rate of somatic embryogenesis was achieved on modificated MS medium containing 1.0 mg/L TDZ and 0.1 mg/L NAA in H. capitata and H. minor (15.5%, respectively), 0.1 or 0.5 mg/L TDZ and 0.1 mg/L NAA in H. jonesii (22.2%), 1.0 mg/L TDZ and 0.5 mg/L NAA in H. yingeri (26.7%), and 0.1 mg/L TDZ and 0.5 mg/L NAA in H. venusta (53.3%). H. clausa showed very low effect on somatic embryogenesis by PGRs; 2.2%. There was interspecies difference to PGRs respond for callus and somatic embryo induction. Regenerated multiple shoots and plantlet of H. minor, H. jonesii, H. venusta and H. yingeri were obtained via somatic embryogenesis.
Culture conditions for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from embryogenic cell suspension cultures of Hovenia dulcis are described. Germinated somatic embryos were selected for induction of secondary embryogenesis. Friable embryogenic cells were induced directly from somatic embryos when transfer to 1/3 MS solid or liquid medium lacking plant growth regulators. The temperature strongly effected on induction of secondary embryognesis than other conditions in culture. All somatic embryos produced friable embryogenic cell clumps within 10 days when germinated somatic embryos cultured in 1/3 MS medium at $30^{\circ}C$ in suspension culture. No somatic embryos formed from embryogenic cell suspension cultures at $18^{\circ}C$. Numerous somatic embryos were induced and subsequently developed uniformly into germination stage from suspended cell clumps after 4 weeks of culture on $18^{\circ}C$. Plantlets conversion were observed on $18^{\circ}C$ when germinated somatic embryos were transferred to 1/3 MS solid medium without plant growth regulators or supplemented with 0.1-0.5 mg/l benzyladenine.
This study was carried out to develop reliable systems for somatic embryogenesis in oil palm tree (Elaeis guineensis Jacq.), and to verify the somaclonal variants by RAPD analysis. Embryogenic callus was induced successfully on modified half-strength MS medium containing $NaH_2PO_4{\cdot}2H_2O$ and casein. Embryogenic callus was further developed to somatic embryo mass (SEM), which is very hard and bonded tightly each other. Plantlets were proliferated when SEM was cultured on modified MS medium containing half strength $NH_4NO_3$, casein and L-ascorbic acid. Plantlets were transplanted into pots containing artificial soils. When RAPD analysis was conducted using randomly selected 95 in vitro plantlets and 19 random primers, somaclonal variation was detected using BNR35 primer. There was missing band around 1 kb in #22, #28, #35, and #77 plantlets. In addition, bands obtained from #28, #35, and #77 was much stronger than other normal bands. The blast results at NCBI revealed that somaclonal variation observed in this study was related to chloroplast genome of oil palm. The results also revealed that oil palm reproduction system through somatic embryogenesis is quite reliable and early detection of somaclonal variants seem to be possible at in vitro stage by RAPD analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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