To establish a definite diagnosis for pulmonary hydatid disease, combination of radiology and serology is useful. In this study, 19 preoperative sera from patients with surgically confirmed pulmonary hydatidosis, 40 sera from patients with other parasitosis and pulmonary diseases, and 20 sera from healthy donors were evaluated using 4 different serological tests, i.e., the commercial ELISA (ELISA-kit) test, the ELISA (ELISA-lab) test prepared in our laboratory, the commercial indirect hemagglutination assay kit (IHA-kit) test, and the IHA test using sensitized sheep red blood cells with tannic acid (IHA-TA). The ELISA-kit was the most sensitive (84.2%) and the most specific test (100.0%). The ELISA-kit also demonstrated the highest positive (100.0%) and negative (95.2%) predictive values. The sensitivity of the ELISA-lab test, that we prepared, was found to be 73.6%, whereas the IHA-kit test and the IHA-TA test were found to be 73.6% and 68.4%, respectively. The specificity of these tests was 96.6%, 98.3%, and 83.3%, respectively. When all 4 tests were assessed together, it was found that the sensitivity had risen to 94.7%. When the ELISA-kit was assessed with the IHA-kit and IHA-TA together, it was found that the sensitivity was 89.5% and 84.2%, respectively. Likewise, the combination of the ELISA-lab and IHA-kit or IHA-TA allowed us to achieve a sensitivity of 84.2% in cases of pulmonary echinococcosis. In conclusion, the diagnosis would be imminent if least 2 tests were applied together.
To control the maximum residue level (MRL) for sulfamethazine (SMZ) residues in pork tissue, a microbial inhibition method is a regulatory screening assay method in Korea. Microwell plate-based competitive enzyme immunoassay (ELISA) kit is avalable for routine screening of SMZ residues in pork tissue. One ELISA kit is evaluated. Phosphate buffer extracts of samples fortified with SMZ at 0, 1, 5, and 10 ng/g were used in a recovery test of the kit. Market pork samples were assayed by the kit. Recovery of sulfamethazine was 104% at 10 ng/g. Intraassay variations and interassay variations for the kit were 7.70% and 5.76%, respectively. Concentration causing 50% inhibition of color development compared with blanks was 16.4ng. The violative pork samples with over MRL (0.1 $\mu\textrm{g}$/g) was 4 of 32 cases (12.5%) by used ELISA kit. This result indicates a possibility of the ELISA kit for screening test of SMZ residues in pork tissue, and still needs a comfirmatory assay for mandatory purposes.
On the basis of the 2009 business plan, 20,394 Korean native cattle and beef cattle were carried examination of bovine tuberculosis by using ELISA technique from March to December. As a result, 66 cattle tested positive for tuberculosis and showed 0.32% positive ratio. Intradermal tuberculin test about 66 cases of ELISA positive cattle was carried out, and all of 66 cattle were confirmed as negative. However, when 7 PPD-positive cattle derived from slaughterhouse were tested by 20k ELISA kit and MS ELISA kit, 3 (2 suspect) cattle and 5 cattle showed positive results, respectively. As compared to the results of PPD test, the concordance rates were 43% (71% included suspect) with 20k ELISA kit and 71% with MS ELISA kit.
This study was carried out to investigate the effect, range of practice, and propriety for diagnosis of early non-pregnancies and reproductive disorders by dairy cows' milk progesterone analysis used EIA-kit of home products. The results were summarized as follows : 1. During 2 to 6 months after artificial insemination, the results of milk progesterone measurement by Home-kit and Auto ELISA reader-kit with pregnant dairy cows(152 heads) certified by rectal palpation were revealed, in Home-kit, 145 heads(95.4%) of positive reaction, 7 heads(4.6%) of quasi-positive, and 0 heads(0%) of negative among 152 heads and, in Auto ELISA reader-kit, 152 heads(100%) of positive reaction among 152 heads. 2. During 19 to 22 days after artificial insemination, the results of milk progesterone measurement by Home-kit, and thereafrer during 50 to 90 days after that, the results of pregnant test by rectal palpation were summarized as follows : 147 heads(82.1%) among 179 heads of positive reaction by Home-kit and 5 heads(31.3%) among 16 heads of quasi-positive were revealed pregnant cows by rectal palpation, and 42 heads(100%) among 42 heads of negative were non-pregnant. 3. During 19 to 22 days after artificial insemination, the results of milk progesterone measurement by Auto ELISA reader-kit, and thereafrer during 50 to 90 days after that, the results of pregnant test by rectal palpation were summarized as follows : 146 heads(86.9%) among 168 heads of positive reaction by Auto ELISA reader-kit and 6 heads(28.6%) among 21 heads of quasi-positive were revealed pregnant cows by rectal palpation, and 48 heads (100%) among 48 heads of negative were non-pregnant. 4. For the accuracy of the rectal palpation, Home-kit and Auto ELISA reader-kit were used in the cows of ovarian diseases. The results were following : in the cows of reproductive disorders expected negative milk progesterone, the accuracies of rectal palpation were the same 75.5%(40 heads among 53 heads) by Home-kit and Auto ELISA reader-kit, and in the cows of reproductive disorders expected positive milk progesterone, the accuracies of rectal palpation were 82.6%(19 heads among 23 heads) and 91.3%(21 heads among 23 heads) by Home-kit and Auto ELISA reader-kit, respectively, and the general accuracies of rectal palpation were 77.6%(59 heads among 76 heads) and 80.3%(61 heads among 76 heads) by Home-kit and Auto ELISA reader-kit, respectively.
본 연구에서는 상용화 되고 있는 PCR 및 ELISA kit를 사용하여 국내에서 유통되고 있는 소, 돼지, 닭, 오리, 칠면조, 염소, 양, 말 등 8종의 식육, 혼합육, 그리고 식육가공품에 대하여 축종 감별능력을 평가하였다. 신선육에 대한 RAW meat ELISA kit$^{(R)}$의 검출한계는 축종별 함유율 0.20%~0.05% 이었고, 열처리 혼합육에서는 열처리 온도 및 시간, 그리고 축종별로 검출한계는 함유율 1.0%~0.05% 이하까지 다양한 차이를 나타내었다. 8종의 식육에 대한 축종별 감별력은 소 94.5%, 돼지 93.3%, 양 90.0%, 오리, 염소, 말, 칠면조 모두에서 100%를 나타내었다. Powercheck Animal Species ID PCR kit$^{TM}$의 경우에는 함유율 0.05%의 검출한계를 나타내었고 8종의 모든 축종에서 100%의 특이도를 나타내어 축종별 감별력이 우수한 것으로 나타났다. 또한, 햄, 소시지, 분쇄가공품, 식육추출가공품 등 총 60개 식육가공품에 대한 Cooked meat ELISA kit$^{(R)}$의 감별력은 햄(35.3%), 소시지(13.6%), 분쇄가공육(12.5%)의 순으로 나타났으며, 2종 이상의 혼합육에서는 상대적으로 낮은 감별력을 보여 제조과정에서 식육간 교차오염에 의한 혼입가능성이 있는 것으로 확인되었다. 쇠고기 육포 54개 제품에 대하여 다른 고기 혼입여부를 PCR Kit로 검사한 결과 13개 제품에서 돼지고기 유전자가 검출되었지만 ELISA Kit에서는 모두 음성으로 나타났다. PCR 양성 시료의 제조공정 중 교차오염 여부를 조사한 결과, 텀블러, 채반, 절단기, 건조기가 쇠고기 및 돼지고기 육포 생산라인에 동일하게 사용되어 교차오염에 의한 혼입으로 추정되었다. 종교적 이유 및 일부 특정 육류에 대한 알러지 반응 등 식품안전 확보차원에서 제품의 원재료의 올바른 표시와 식육간 교차오염이 발생되지 않도록 철저한 품질관리가 되어야 할 것으로 판단된다.
Soluble antigens from an axenic culture of Entamoeba histolytica were used to develop a commercial ELISA kit to quantify anti-E. histolytica antibodies in sera of patients with extraintestinal amebiasis in non-endemic settings. The diagnostic specificity and sensitivity of the test were assessed retrospectively using 131 human serum samples with amoebic serologic status available. They were selected according to their results in immunofluorescence (IFAT) and were separated in 2 sample categories: 64 sera with positive results by IFAT and 67 with negative results by IFAT. The sensitivity and specificity of the ELISA kit were assessed at 95.0% and 94.0% compared to the IFAT. The test can be useful to exclude a potential diagnosis of amebiasis and could be used as a screening method since ELISA is an automated technique.
배경 : 현행 도말 및 배양 등의 미생물학적 검사법의 제한점을 보완할 수 있는 신속하고 간편한 결핵진단 방법의 하나로서 가장 많이 연구되어 온 분야가 혈청학적인 방법이다. 이 중 현재까지 결핵의 혈청학적 진단에 유용성이 높은 것을 평가되는 항원의 하나가 38-kDa으로 대표되는 결핵균 분비항원이다. 이 38-kDa을 주항원 성분으로 하여, 간편하게 실험할 수 있도록 kit화된 수입제품이 국내에서 널리 시판되고 있는 실정에서 국내의 회사에서 개발한 ELISA kit(Erum Biotech Co.)를 이용하여 폐결핵의 혈청학적 진단이 얼마나 유용한 지를 평가하고자 하였다. 방법 : 도말 및 배양검사장 균양성으로 진단된 후 항결핵치료를 받고 있는 폐결핵환자 333명(검사당시 균양성 환자 212명, 균음전된 환자 121명), 건강 성인 80명, 그리고 국립마산결핵병원에서 1년 이상 근무하며 환자와 접촉을 자주 하게되는 접촉군 61명 등 총 474명을 대상으로 하여 결핵의 혈청학적 진단용 ELISA kit를 이용하여 시험하였다. 결과 : 1) 균양성 활동성 폐결핵환자 212명에 대한 ELISA kit의 양성반응률은 82.1%, 균음성 활동성 폐결핵환자 121명에 대한 양성반응률은 73.6%로 이 두 군 사이에는 통계학적으로 유의한 차이가 없었다(p>0.05). 2) 접촉 대조군 61명에 대한 양성반응률은 14.8%, 건강 대조군 80명에 대한 양성반응률은 2.5%로 이 두 군 사이에는 통계적으로 유의한 차이가 있었다(plt;0.001). 3) 활동성 폐결핵환자 333명 모두에 대한 양성반응률은 78.90%, 대조군 141명 모두에 대한 양성반응률은 7.8%로 이 두 군 사이에는 통계적으로 유의한 차이가 있었다(p<0.001). 4) ELISA kit의 민감도는 78.9%, 특이도는 97.5%였으며, 유병율이 60.1% 수준일 때의 양성예측율은 96.1%, 음성예측율은 65.0%였다. 결론 : ELISA kit는 민감도나 특이도 면에서 수입시판되고 있는 ICT와 비교할 때 비슷한 결과를 보이며, 전통적으로 결핵을 진단하는 데 사용하던 흉부 X-선 사진, 항산균 염색 및 배양 등과 함께 보조적인 도구로 사용 할 수 있을 것으로 생각된다.
The indoor environment is an important source of exposure to various aeroallergens and pathogenic microorganism. It has been shown that exposure to aeroallergens enhances the risk of indoor inhabitants developing asthma. Since the skin prick test, a typical clinical method for identification of subjects positive to allergens, can rarely cause fatal or non-fatal reactions in susceptible persons, an in vitro assay such as ELISA using serum has been considered for testing positivity against various allergens. We evaluated the validity of a serum ELISA kit for screening positive subjects to major aeroallergens including Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronyssinus, cockroach, Alternaria, Cladosporium, Aspergillus, Penicillium, dog hair, cat fur, mugwort, and ragweed. The ELISA results were compared with the skin prick test results, and sensitivity, specificity, and overall accuracy were calculated to each allergen. Higher sensitivities were obtained from D. farinae, (77.8%) and D. pteronyssinus (69.2%), but sensitivities to Aspergillus, Penicillium, dog hair, cat fur, and ragweed were very low down to 0%. Specificity ranged from 88.7% (cat fur) to 100% (mugwort and ragweed). Overall the accuracy of the serum ELISA kit was relatively high, in that the lowest was 85.1% for cat fur and the highest was 98.6% for Alternaria, Cladosporium, and ragweed. Considering specificity and overall accuracy for the serum ELISA kit, it may be considered reliable. However, when the kit is used for screening purpose, positivity to aeroallergens should be carefully determined since sensitivity for the kit is low.
ELISA kit for cortisol was developed and then evaluated. Polyclonal antihydrocortisone-3-(o-carboxymethyl)oxime BSA rabbit serum was used to coat the 96-well microplates. The minimum detection limit of the kit was 250pg of cortisol per milliliter. The within-run variation and the day to day variation of the ELISA system were 2.0 and 5.9 at maximum, respectively. The kit was used to determine whether salivary cortisol concentration could replace blood cortisol concentration in dexamathasone suppression test of dogs. Changes of cortisol concentration were measured in serum or saliva after intravenous administration of 0.01mg of dexamethasone per kilogram of body weight. Blood alone, saliva alone or both were collected at 0, 30, 60, 120, 240, and 360 minutes after injection of dexamethasone. The change in blood cortisol concentration was found to be suitable in dexamathasone suppression test of dogs, but the change in salivary cortisol concentration was not. The kit was also used to determine whether salivary cortisol concentration could be a stress index as well as blood cortisol concentration in dogs. Two types of trial were performed to estimate the stress either by blood or salivary cortisol concentration. The first trial was stress experiment by intravenous injection of 0.2IU of PZI-insulin per kilogram body weight. Either blood alone or saliva alone was collected at 0, 30, 60, and 90 minutes after insulin administration. Both blood and salivary cortisol concentration were found to be suitable index in estimating stress from hypoglycemia by injection of insulin. The second trial was stress experiment by electrical irritation. The dogs were irritated with anti-bark device for 10 seconds. Blood was collected before and at 2 and 5 minutes after electrical irritation. Saliva was collected before and at 3 and 6 minutes after electrical irritation. The blood cortisol concentration, but not the salivary cortisol concentration was found to be suitable index in estimating stress from electrical irritation. Cushing syndrome in a dog was also successfully diagnosed with this kit.
An enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was developed to screen residues of sulfadimethoxine (SDM) in edible animal products. An indirect competitive ELISA was allowed to compete with rabbit anti-SDM for binding to a limited amount of SDM-gelatin conjugate and SDM in serum samples. Sera was diluted 20 times with phosphate buffered saline (PBS) and boiled for 5 minutes to destruct immunoglobulins of serum. Detection limit of this competitive ELISA for SDM was 0.1 ppb or less. Among eight sulfonamide analogues tested for specifity, only sulfamonomethoxine showed significant cross-reaction in the assay. The EC-50 value for sulfamonomethoxine was 3.5 ppm. Recovery of SDM in spiked serum samples between 100 ppb and 500 ppb ranged from 110.7% to 128.9%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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