본 연구에서는 마늘 착즙액이 어병세균으로 질병에 인위 감염시킨 넙치의 비특이적 면역 반응에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 건강한 넙치를 어류 병원성 세균인 Streptococcus iniae BS10과 Edwardsiella tarda KE-1으로 공격 주사한 후 1일 뒤에 마늘 착즙액을 0.25, 0.5 및 1.0 g/L의 농도로 해수에 현탁하여 2일 간격으로 3회 침지하였다. 공격 주사한 넙치의 면역 반응을 알아보기 위해 체표 점액 lysozyme의 활성, 조직 내 균수의 변화, 혈액 내 세포수의 변화, SOD 활성 및 생존율을 조사하였다. 그 결과, S. iniae BS10으로 공격 주사 후 0.25와 0.5 g/L의 침지 시험구에서 대조구에 비해 lysozyme의 활성이 유의적인 증가를 나타내었고, E. tarda KE-1으로 공격 주사 후 모든 침지 시험구에서 대조구에 비해 lysozyme의 활성이 유의적인 증가를 나타내었다. 조직 내 균수에 있어서는 모든 시험구에서 유의적인 감소를 나타내었다. 혈액 내 세포 수의 변화를 관찰한 결과, S. iniae BS10으로 공격 주사 후 마늘 착즙액 0.25와 0.5 g/L의 침지 시험구에서 림프구와 호중구의 유의적인 증가와 함께 모든 시험구에서 호중구의 유의적인 증가가 나타났다. E. tarda KE-1으로 공격 주사 후 0.25와 1.0 g/L의 침지 시험구에서 림프구의 유의적인 증가, E. tarda KE-1으로 공격 주사 후 마늘 착즙액 0.25와 1.0 g/L의 침지 시험구에서 림프구의 유의적인 증가와 함께 모든 시험구에서 호중구의 유의적인 증가가 나타났다. 침지 시험구 시험어의 혈액, 신장 및 간에서 SOD 활성을 측정한 결과, S. iniae BS10으로 공격 주사 후 침지 시험구에서 혈액과 신장에서 유의적인 증가가 나타났고, E. tarda KE-1으로 공격 주사 후 침지 시험구에서 신장과 간에서 유의적인 증가가 나타났다. 생존율 시험 결과, S. iniae BS10와 E. tarda KE-1으로 공격 주사 후 0.25 g/L 침지 시험구에서 모두 58% 의 상대생존율을 나타내어 마늘 착즙액 침지가 넙치의 방어능에 기여하는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 마늘 착즙액의 유효 성분이 건강한 넙치뿐만 아니라 질병에 걸린 넙치에 대해서도 면역증강제로서의 효과가 있을 것으로 사료되었다.
본 연구에서는 구기자의 투여가 나일틸라피아의 면역 반응에 미치는 영향을 알기 위하여, 나일틸라피아에 구기자 3% 첨가 사료를 14주일간 투여하면서 어병 세균인 Edwardsiella tarda 유래의 FKC와 ECP를 복강 주사 또는 침지법으로 FKC와 ECP를 단독 또는 혼합 처리하였을 때의 비특이적 및 특이적 면역 반응에 대하여 조사하였다. 비특이적 면역 반응의 지표로서 보체의 용혈능과 lysozyme의 활성을, 특이적 면역 반응의 지표로서 로젯 형성 세포 수의 변화와 응집 항체가를 조사하었으며, 어병 세균인 E. tanla로 생균 공격 실험하여 상대 생존률을 구하였다. 구기자 첨가 사료를 투여하였을 때, 조사한 모든 비특이적 면역 반응 지표들이 활성화되었으며, 백신 처리 후에도 무첨가 사료 투여구에 비하여 높은 면역 활성을 보였다. 백신 처리구의 응집 항체가는 FKC와 ECP의 혼합 처리구가 가장 높았고 FKC 주사구, FKC 침지구의 순으로 응집 항체가가 낫게 나타났으며, 로젯 형성 세포 수도 같은 경향을 보였다. E. tarda로 생균 공격 실험한 결과, 구기자 투여만으로도 방어력이 증가되었다. 그리고 백신 처리하였을 때에는 혼합 처리구가 가장 높은 방어력을 보였으므로, 본 실험에서 사용한 구기라는 기존의 adjuvant와 같이 면역 반응의 증강 효과가 있는 것으로 판단되며, FKC와 ECP로 혼합 백신 처리하는 방법은 효과가 기대되는 백신 방법으로 사료된다.
In this study, we carried out the rapid diagnostic system based on indirect fluorescent anti-body technique (IFAT) for detection of bacterial diseases in cultured freshwater fishes. 1. When the fishes were tested with graded dilution of Edwardsiella tarda FPC 470 bacteria detection from ten fishes Injected with $4.1{\times}10^3$colony forming unit(CFU) /ml, all of them were detected by IFAT but only two fishes were recognizable by the culture method in the tested fishes injected with $4.1{\times}10^3$CFU /ml. 2. The bacteria E. tarda could be detected by IFAT method from 1 to 48hrs after Injection in the tissues tested such as kidney, liver and spleen of the fishes, whereas detection by culture method could be recognized from 1 to 48hrs after injection In the kidney and spleen but it was not possible from preinjection to 1 hr in the liver. 3. Thus, IFAT proved to be more useful technique than plate culture method in the diagnosis of Edwardsiellosis in the freshwater fishes.
$\beta$-Glucan을 경구 혹은 침지투여하여 조피볼락(Sebastes schlegeli)의 비특이적 방어기작을 향상시켜 세균성 질병에 대한 저항성을 증가시키는 면역자극제로서의 효과를 알아보고자 하였다. $\beta$-Glucan을 사료에 섞어 경구투여하거나 혹은 사육수에 현탁시켜 침지투여한 후 Vibrio ordalii, Staphylococcus epidermidis 및 Edwardsiella tarda를 주사하여 인위감염으로 $\beta$-glucan의 효능을 시험하였다. V. ordalii를 주사한 결과, 1% $\beta$-glucan을 30일 동안 경구투여한 시험구는 25%의 생존율을 보였으나 $\beta$-glucan을 투여하지 않은 대조구는 3일 이내에 모두 폐사하였다. S. epidermidis를 주사한 결과, 20 및 30일 경구투여구는 95%의 높은 생존율을 보였다. 그러나 E. tarda의 인위감염시 전혀 방어효과가 없었다. V. ordalii 사균혼합구 혹은 단독 침지 시험구는 주사 후 10일 동안 전혀 방어효과가 관찰되지 않았다. 이러한 결과로 볼 때 $\beta$-glucan의 경구투여는 S. epidermidis와 V. ordalii에 효과적이나 E. tarda에는 방어효과가 없는 것으로 나타났다.
양식 넙치에 Edwardsiella tarda 또는 Streptococcus iniae를 단독 또는 혼합감염하여 넙치에서 병원성을 비교하였다. 넙치에 단독 또는 혼합감염 후 혈액생화학적 성상으로 alanine aminotransferase (ALT), aspatate aminotransferase (AST), glucose 농도, total protein 농도를 조사하였으며, 라이소자임 활성, 신장과 비장 조직 중의 세균수, 조직병리학적 변화와 누적폐사율을 조사하였다. 혼합감염구는 다른 시험구에 비하여 누적폐사율, 신장과 비장 조직 중의 세균수, AST활성과 병리조직학적 변화가 크게 나타났으나, 라이소자임 활성에서는 유의적인 차이가 보이지 않았다. 따라서 E. tarda와 S. iniae의 혼합감염은 신장과 비장 조직 중의 세균수 증가와 내부 장기의 손상으로 숙주에 높은 병원성을 나타낸 것으로 판단된다.
We determined the resistance rates of pathogenic bacteria isolated from cultured olive flounder Paralichthys olivaceus to erythromycin (Em), antibiotic typically used in aquaculture and analyzed the genotypes of resistant bacteria using polymerase chain reaction (PCR). We isolated and utilized 160 isolates of Streptococcus parauberis, 1 of S. iniae, 66 of Edwardsiella tarda, 56 of Vibrio sp. and 23 of unidentified bacteria from presumed infected olive flounder from Jeju Island from March 2016 to October 2017. Of the 306 isolated strains, Em-resistant strains included 33 of S. parauberis, 39 of E. tarda and 2 of Vibrio sp. We conducted PCR to assess the resistance determination of Em-resistant strains. Five different types of Em-resistance genes were detected in the 74 Em-resistant strains: erm (A), erm (B), erm (C), mef (A) and mef (E); erm (A) and erm (B) were detected in 1 (3%) and 24 (72.7%) S. parauberis isolates, respectively. In E. tarda, erm (B) was detected in five isolates (12.8 %) and no Em-resistance genes were detected in the two Vibrio sp. isolates.
Fish pathogenic bacteria are a considerable danger of farmed fish and a source of economic loss in the fish farming industry. In this study, $Nanoxil^{(R)}$ was compared to hydrogen peroxide and a silver colloid in terms of disinfection efficacy against E. tarda, V. anguillarum and S. iniae. A bactericidal efficacy test conducted by a broth dilution method was used to determine the lowest effective dilution of the disinfectant following exposure to test bacteria for 30 min at $4^{\circ}C$. $Nanoxil^{(R)}$ and test bacteria were diluted with distilled water (DW), hard water (HW) or an organic matter suspension (OM) according to the treatment condition. Under the OM condition, the bactericidal activity of $Nanoxil^{(R)}$ against E. tarda exhibited a lowered efficacy compared to that under the DW and HW conditions. $Nanoxil^{(R)}$ at 500 fold (dilutions on) under all of the conditions demonstrated a high bactericidal efficacy against S. iniae. As $Nanoxil^{(R)}$ possess bactericidal efficacy against fish pathogenic bacteria such as E. tarda, V. anguillarum and S. iniae, this disinfectant solution can be used to limit the spread of fish bacterial diseases.
1987년(年) 3(월)月 부산수산대학(釜山水産大學) 어병학(魚病學) 실험실(實驗室)에서 사육중(飼育中)이던 틸라피아 (Oreochromis niloticus)에 세균성(細菌性) 질병(疾病)이 발생(發生)하여 만성적(慢性的)으로 몇마리씩 폐사(斃死)하였다. 본(本) 연구(硏究)는 이러한 질병(疾病)의 원인(原因)을 밝히기 위하여 원인균(原因菌)을 분리(分離)하였으며, 형태적(型態的), 생화학적(生化學的) 성상(性狀)을 관찰(觀察)하고 병원성(病原性), 약제감수성(藥劑感受性) 실험(實驗)을 하였으며 시험항원(試驗抗原)을 제작(制作)하여 그 항원성(抗原性)을 조사하였는바, 그 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 병어(病魚)에서 분리(分離)된 원인균(原因菌)은 Edwardsiella tarda로 동정(同定)되었다. 2. 분리균(分離菌)을 틸라피아에 접종하여 재현성실험(再現性實驗)을 한 결과(結果) 전형적인 E. tarda의 감염증상을 나타내고 사망(死亡)했으며, 어류(魚類)로부터 동일균(同一菌)을 얻을 수 있었다. 3. 분리균(分離菌)은 oxytetracycline에서 감수성(感受性)이 높았고, MIC는 6.9로 나타났다. 4. 분리균(分離菌)은 병원성(病原性)이 강한 균(菌)이었으며, 48-LD50은 $10^{6.4}cell$/fish 이었다. 5. 시험항균(試驗抗原)으로, 포르말린사균항원, 초음파처리항원, 균여과액항원을 사용하였으며, 이 세가지를 사용한 항원성시험(抗原性試驗) 결과 포르말린사균항원의 시험구에서 높은 응집가와 방어력을 나타내었다.
Lee Ju Suk;Choi Jae Young;Sim Doo Saing;Kim Hyeung Rak;Jung Tae Sung;Kim Jae Ho;Oh Myung Joo
Fisheries and Aquatic Sciences
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제3권1호
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pp.64-70
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2000
DNA probes for the l6S rRNA have been designed for the detection of Edwardsiella tarda. In order to accomplish this purpose, the l6S rRNA gene from E. tarda has been cloned and sequenced. Two highly feasible oligonucleotide probe sites have been determined by the database analysis programs presented by PCGENE and BLAST. These two probes have been evaluated by slot blot hybridization analysis. Hetero- and homo-trimeric templates have been synthesized using these two probe sites. The templates have been further multimerized by PCR to generate between 150 and 300 bp long DIG-11-dUTP labeled probes. Unlike 3' end labeled oligonucleotide probes or templates, multimerized probes showed no crosshybridization in the given experimental condition. Furthermore, a significant increase in sensitivity has been observed with these probes. This method, we presented here, may be useful for the designing of probes for the detection of other fish pathogenic microorganisms also.
Hwang, Yo-Sep;Bang, Seok Jin;Kang, Tae Yun;Choi, Jae Hyeok;Jung, Sang Mok;Kang, In Sung;Jeon, Se young;Park, Kwan Ha;Choi, Sanghoon
한국어병학회지
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제32권1호
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pp.9-20
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2019
The study investigated the dietary effects of medicinal herbs extract and multiple probiotics mixture on the growth performance, innate immune response and antibacterial activity of nile tilapia Oreochromis niloticus. Tilapia were divided in four groups. The first is a fish group fed a basal diet added with 40% medicinal herbs extract (MHE). The second is a fish group fed a basal diet supplied with $2{\times}10^8CFU/g$ of 2 Bacillus sp, 2 Lactobacillus sp and 2 Yeast sp, respectively (PB). The third group was fed with a mixture of probiotics (2 Bacillus sp, 2 Lactobacillus sp and 2 Yeast sp) with the medicinal herbs extract added in basal diet (MHE+PB). The fourth group was fed only a basal diet (C). In a non-specific immune parameters analysis, respiratory burst activity, lysozyme activity, phagocytic activity (PA), alternative complement pathway activity ($ACH_{50}$) and superoxide dismutase (SOD) activity were significantly (p<0.05) increased in the group MHE+PB compared to other groups. Both PB and MHE groups showed a significant (p<0.05) increase in respiratory burst activity, lysozyme activity compared to the control C group, whereas no significant differences were observed in PA, $ACH_{50}$ and SOD activity compared to the control group. In challenging test, fish were administered with Edwardsiella tarda (E. tarda) on 30 days after feeding with each experimental diet and viable E. tarda cell reduction was checked over 21 days post injection. MHE+PB group showed a significantly (p<0.05) reduced E. tarda cells compared to other groups. No significant antibacterial difference (p>0.05) was observed between PB and MHE only treated group. Compared to the control, a significant antibacterial difference (p<0.05) appeared in PB but not in MHE (p>0.05). The results suggest that the probiotics and MHE mixture could be utilized as an alternative to antibiotics in the control of fish diseases caused by E. tarda.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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