• 한국식품위생안전성학회지
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• 제31권6호
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• pp.393-398
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• 2016

본 연구에서는 선택배지와 건조필름을 이용하여 신선편이 엽채류 3종(양상추, 양배추, 어린잎채소)에서 병원성 E. coli를 분리하였고, 의심집락 동정을 위해 생화학적 분석법을 사용하여 동정한 후 결과를 비교 분석하였다. 양상추 20 g, 양배추 20 g, 어린잎채소 10 g에 병원성 E. coli 혼합 균액(Enterohemorrhagic E. coli NCCP11142, Enterotoxigenic E. coli NCCP14037, Enteropathogenic E. coli NCCP14038, Enteroaggregative E. coli NCCP14039, Enteropathogenic E. coli NCCP15661)을 최종농도가 1, 2, 3 log CFU/g이 되도록 접종하였고, BPW (80~90 ml)을 넣은 후 60초 동안 균질화하여 분석하였다. 연구결과, 모든 시료에서 건조필름 시험 양성, 양상추 시료 일부(최종농도 3 log CFU/g 접종시료)를 제외한 모든 시료에서 증균배양법을 이용한 정성시험결과가 음성으로 나타났다. 증균배양과 건조필름 시험을 통해 분리한 병원성 E. coli를 이용하여 생화학적 분석을 실시한 결과, 양상추에서 분리한 병원성 E. coli의 경우, API 20E 100% (44/44), Microgen GNA 100% (44/44), Food System 66.7% (10/15)의 동정률이 나타났다. 양배추의 경우, API 20E 64.7% (22/34), Microgen GNA 50% (16/32), Food System 60% (9/15), 어린잎채소의 경우, API 20E 65.1% (28/43), Microgen GNA 62.3% (27/43), Food System 53.3% (8/15)가 병원성 E. coli로 동정되었다. 본 연구의 결과는 신선편이 엽채류에 대한 병원성 E. coli 검출법 선택에 유용하게 이용될 것으로 판단된다.

• 미생물학회지
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• 제32권1호
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• pp.47-52
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• 1994

Campylobacter jejuni에 48${\circ}C$의 열충격을 30분간 주었을 때, HSP90, HSP66, HSP60의 열충격 단백질들이 합성되었고, 이 단백질들은 각각 E. coli의 hsp87, HSP66 (DnaK), HSP58(GroEL)에 상응하는 단백질들이었다. 여러가지의 제한효소로 처리한 C. jejuni의 chromosomal DNA에 E. coli의 groEL(4.0kb)을 probe로 사용하여 Southern hybridization한 결과, 이들과 상동성을 가지는 유전자들이 있음을 확인하였다. C. jejuni의 groEL 유전자를 pWE15 cosmid를 이용하여 recombinant plasmid pLC1을 만들고, 이를 E. coli B178 groEL44 ts mutant에 형질전환시켜 E. coli LC1을 얻었다. 이 pLC1에는 groEL 유전자가 존재하는 5.7kb인 insert DNA가 포함되어 있었고, 그로부터 subcloning한 pLC101에는 groEL을 포함하는 4.0kb의 DNA가 삽입되어 있었다. 이 recombinant plasmid들이 형질전환된 E. coli LC1과 LC101 균주에서는 C. jejuni의 GroEL 단백질이 과다 생산되었다. C. jejuni의 groEL이 cloning된 E. coli LC1은 42${\circ}C$에서의 생장능력이 회복되었고, ${\lambda}$ vir phage에 대한 감수성도 회복되는 등의 chaperon 효과가 입증되었다.

• 한국축산식품학회지
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• 제38권4호
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• pp.829-834
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• 2018

The objective of this study was to determine the minimum enrichment time for different types of food matrix (pork, beef, and fresh-cut lettuce) in an effort to improve Escherichia coli detection efficiency. Fresh pork (20 g), beef (20 g), and fresh-cut lettuce (20 g) were inoculated at 1, 2, and 3 Log CFU/g of Escherichia coli. Samples were enriched in filter bags for 3 or 5 h at $44.5^{\circ}C$, depending on sample type. E. coli cell counts in the samples were enriched in E. coli (EC) broth at 3 or 5 h. One milliliter of the enriched culture medium was used for DNA extraction, and PCR assays were performed using primers specific for uidA gene. To detect E. coli (uidA) in the samples, a 3-4 Log CFU/mL cell concentration was required. However, E. coli was detected at 1 Log CFU/g in fresh pork, beef, and fresh-cut lettuce after 5, 5, and 3-h enrichment, respectively. In conclusion, 5-h enrichment for fresh meats and 3-h enrichment for fresh-cut lettuce in EC broth at $44.5^{\circ}C$, and PCR analysis using uidA gene-specific primers were appropriate to detect E. coli rapidly in food samples.

• 한국동물위생학회지
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• 제43권2호
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• pp.53-58
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• 2020

Enterovirulent Escherichia coli are among the most important causes of diarrhea in cattles. Between January and December, 2017, a total of 150 stool specimens from cattles were investigated for enterohaemorrhagic E. coli (EHEC), enteropathogenic E. coli (EPEC), enteroaggregative E. coli (EAEC), enterotoxigenic E. coli (ETEC) and enteroinvasive E. coli (EIEC) using real-time PCR. 131 E. coli were isolated from feces. The most frequently isolated pathotype in feces was EHEC (37 isolates). EPEC, ETEC and EAEC were detected in feces with 14, 7 and 3 respectively. EIEC was not detected. Antimicrobial resistance test was performed by agar disc diffusion method with 14 antimicrobials. Enterovirulent E. coli isolates showed the highest antimicrobial resistance to ampicillin 61.3%, followed by tetracycline 54.5% and streptomycin 45.5%. They had low resistance to amikacin 11.4%. Of 44 isolates, 37 (84.1%) were resistant to more than 2 antimicrobials. futher study a highest antimicrobial susceptibility to trimethoprim/sulfamethoxazole 50.0% and florofenicol 47.7%.

• 대한임상검사과학회지
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• 제47권2호
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• pp.71-77
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• 2015

최근 항균제의 광범위한 사용으로 인한 항균제 내성세균의 출현과 확산이 축산환경에서 빈번하게 일어나고 있고 이렇게 출현한 다제 내성세균은 사람에게 직접 전파될 수 있어 큰 문제가 되고 있다. 본 연구는 2013년 7월부터 2014년 7월까지 충청지역의 임상검체(n=44) 및 양계농장의 닭(n=34)에서 분리된 78주의 대장균을 대상으로 이루어졌다. PCR과 염기서열 분석을 통하여 MLST 분석과 class 1 integron의 유전형을 분석하였다. 항균제 감수성 검사는 디스크 확산법으로 시행하였다. 사람 유래 대장균의 경우 ST131 (n=20)과 ST38 (n=15)이 가장 많았고 닭 유래 대장균은 ST752 (n=7)이 가장 많았으며 ST117, ST189, ST69는 각각 4주였다. 사람에서 유래한 대장균은 총 44주 중 25주가 class 1 integron을 가지고 있었다. 반면 닭에서 유래한 대장균은 총 34주 중 11주가 class 1 integron을 가지고 있었다. 충청지역에 분포되어있는 사람 유래 대장균과 닭 유래 대장균의 유전형 및 항균제 내성 패턴에 차이를 보였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제27권12호
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• pp.2141-2150
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• 2017

This study was conducted to develop a screening method using Colilert-18 and a device for the detection of E. coli from agri-food production environments and fresh vegetables. The specificity and sensitivity of Colilert-18 by temperature ($37^{\circ}C$ and $44^{\circ}C$) were evaluated with 38 E. coli and 78 non-E. coli strains. The false-positive rate was 3.8% (3/78) and 0% (0/78) at $37^{\circ}C$ and $44^{\circ}C$, respectively. The detection limit of E. coli at $37^{\circ}C$ at <1.0 log CFU/250 ml was lower than that at $44^{\circ}C$. The efficiency of the developed device, which comprised an incubator equipped with a UV lamp to detect E. coli in the field, was evaluated by measuring the temperature and UV lamp brightness. The difference between the set temperature and actual temperature of the developed device was about $1.0^{\circ}C$. When applying the developed method and device to various samples, including utensils, gloves, irrigation water, seeds, and vegetables, there were no differences in detection rates of E. coli compared with the Korean Food Code method. For sanitary disposal of culture samples after experiments, the sterilization effect of sodium dichloroisocyanurate (NaDCC) tablets was assessed for use as a substitute for an autoclave. The addition of one tablet of NaDCC per 50 ml was sufficient to kill E. coli cultured in Colilert-18. These results show that the developed protocol and device can efficiently detect E. coli from agri-food production environments and vegetables.

• 한국식품영양학회지
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• 제11권4호
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• pp.416-419
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• 1998

Identification of escherchia coli K1 polysaccharide antigen isolated from urine specimens of urinary tract infections in children were performed from of 1992 to 1993 in Kyoto, Japan. The serotypes of E. coli were categorized that O1:H7, O2:H6, O2:H7, O16:H6, O18:H7, O18:H￣, and O135:H44 among 14 strains isolated from urine specimens of urinary tract infections in children by the serological test. And, one strain (O18:H￣, isolation rate: 7.1%) of E. coli K1 polysaccharide antigen among 14 strains were isolated from urine specimens of urinary tract infections in children by the bacteriophage test.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권6호
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• pp.722-725
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• 1999

Filamentation-suppressed recombinant Escherichia coli strain harboring the Alcaligenes latus polyhydroxyalkanoate (PHA) biosynthesis genes and the E. coli ftsZ gene was constructed and cultivated for the production of poly(3-hydroxybutyrate) [P(3HB)] with high concentration and high content. By the pH-stat fed-batch culture of this recombinant E. coli strain XL1-Blue(pJC5), the final cell concentration and P(3HB) concentration obtained in 44.25h were 172.2g cell dry weight/l and 141.9g P(3HB)/l, respectively, resulting in productivity of 3.21g P(3HB)/l-h. More importantly, the P(3HB) content obtained was 82.4 wt %, which was significantly higher than that obtained with the recombinant E. coli harboring only the PHA biosynthesis genes.

• 미생물학회지
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• 제44권2호
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• pp.93-97
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• 2008

최근 Escherichia coli에서 RNA의 분해와 가공과정에 중추적인 역할을 하는 리보핵산 내부분해효소인 RNase E의 효소활성을 조절하는 단백질 조절자인 RraA가 밝혀졌으며, 이 단백질은 E. coli RNase E의 효소활성 부위와 36%의 유사성을 가지는, Streptomyces coelicolor RNase ES의 효소활성을 조절하는 것으로 알려져 있다. S. coelicolor의 유전체에는 RraA와 아미노산 서열이 35.4% 이상 유사한 단백질을 코딩하는 유전자가 두 개 존재하는데, 그 중 하나인 rraAS2를 클로닝하여 E. coli RNase E의 효소활성을 조절하는지를 알아보았다. 그 결과 세포내에서 RraAS2를 발현시키면 RNase E의 과발현에 의해 저해된 세포의 생장을 RraA와 같이 효과적으로는 아니지만, 어느 정도 복원시키는 것을 확인하였다. 또한 RraAS2가 발현됨으로서 RNase E의 과발현에 의해 증가된 ColE1-타입 플라스미드의 복제 수를 14% 감소시키는 것을 관찰하였다. 이러한 결과는 RraAS2가 RNase E의 RNA I분자에 대한 효소 활성을 저해하는 능력을 가지고 있음을 시사한다. 동일한 배양조건에서 E. coli 세포내에서의 RNase E에 대한 RraAS2의 상대적인 발현양이 RraA에 비해 6.2배 낮은 것을 확인하였고, 이로 인해 RraAS2가 RNase E의 과발현에 의한 세포 생장의 저해를 복원하는데 필요한 모든 RNA의 가공과 분해속도를 효과적으로 조절하지는 못한다는 것을 추론할 수 있다.

• 대한수의학회지
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• 제48권3호
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• pp.295-303
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• 2008

One hundred and sixty nine Escherichia (E.) coli strains isolated from fecal samples of aquatic birds in Geumho river basin and Dalseong park were tested by agar dilution method to determine their susceptibility patterns to 14 antimicrobial agents. The distribution of tetracycline resistance determinants (tetA, tetB, tetC, tetD and tetE) were also examined by PCR in 76 tetracycline-resistant ($TC^r$) E. coli isolates. The high resistance was observed in tetracycline, cephalothin and ampicillin (45.0~36.7%). Resistance of E. coli isolates derived from Dalseong park to tetracycline, cephalothin, ampicillin and streptomycin (65.7~44.8%) were significantly higher than those isolated from Geumho river basin (31.4~14.7%). About seventy percent (70.4%) of the strains isolated were resistant to one or more drugs tested. Thirty (39.5%) of 76 $TC^r$ E. coli isolates which were resistant to one or more drugs transferred all or a part of their resistance patterns to the recipient strain of E.coli J53 by conjugation. All of $TC^r$ E. coli isolates contained at least one or more of 5 tet genes examined. The most common genes found in these isolates were tetA (60.6%) and followed by tetB (7.9%) and tetC (1.3%). However, tetD and tetE were not found in any of the isolates tested. Twenty one (27.6%) of $TC^r$ E. coli isolates had two determinants, tetA/tetB (20 strains), tetA/tetC (1 strain). And two strains (2.6%) contained three determinants (tetA/tetB/tetC).