The results that the effect of 6 detergents on the structural changes and biochemical composition of bacterial membrane of Escherichia coli and Bacillus cereus are as follows ; 1. Population growth of the bacteria was increased in case of the treatment with palmitoyl carnitine and sodium deoxy cholate but was increased in case of the treatment with palmitoyl carnitine and sodium deoxy cholate but was decreased by sodium dodecyl sulfate and palmitoyl choline, in E.coli and was decreased by palmitoyl carnitine and palmitoyl choline at the low concentration, in B. cereus. 2. The electron micrograph showed that cell wall lysis or cell collapse were observed in the treatment of sodium dodecyl sulfate and palmitoyl choline, and also cell wall was condensed by triton X-100 and sodium deoxy cholate, in E.coli. And in B. cereus, endospore formation of the bacteria was stimulated by palmitoyl choline, and cell lysis or structural changes of the membrane were observed in the treatment of sodium dodecyl sulfate, sodium cholate, and triton X-100, respectively. 3. As to the effect of detergent on the biochemical composition of biomembrane, the content of carnitine, in E.coli, and B.cereus, the content of structural protein and phospholipid were decreased by treatment of sodium dodecyl sulfate and structural protein was denatured by palmitoyl choline. 4. The profile of membrane protein revealed that the bacterial membrane were composed of various proteins. By dint of this result, some of membrane proteins were solubilized or changed to small molecules by the treatment of sodium dodecyl sulfate and palmitoyl choline, in E.coli and membrane protein of the biomembrane by treatment of sodium dodecyl sulfate, sodium deoxy cholate, palmitoyl choline, and palmitoyl carnitine were confirmed to be different profile as compared with those of the control, in B. cereus. Therefore, it is suggested that sodium dfodecyl sulfate and palmitoyl choline soulbilized biomembranes or inhibited membrane transport and that palmitoyl carnitine and sodium deoxy cholate were used as an energy source or stimulating the membrane transport, in E.coli. And, it is suggested that all of detergents were inhibited biomembrane synthesis, expet saponin, in B.cereus.
Bacillus pasteurii의 urease gene이 Escherichia coli HB101에서 발현된 Bacillus성 recombinant urease를 단일단백질으로 정제하고 그 효소학적 특성을, 별도로 정제한 B.pasteurii urease의 그것과 비교검토하였다. B.pasteurii urease gene이 cloning 된 E.coli HB101(pBU11)의 균체파쇄액으로 부터 TEAE-cellulose, DEAE-Sephadex A-50, Sephadex G-150, sephadex G-200 등의 이온교환 크로마토그래피와 gel filtration을 이용하여 E.coli내에서 발현된 B. pasteurii성제하였으며, 또한 B.pasteurii로부타 비활성도 185.2배의 urease를 정제하여 disc gel electrophoresis로 단일 단백으로 정제되었음을 확인하였다. 정제된 두 urease 들의 native 상태의 분자량은 공히 280,000$pm$10,000 정도로 확인되었고, SDS-electrophoresis에의 해 subunit 유무와 분자량을 확인한 결과도 67,000정도의 subunit 4개와 20,000의 subunit 1개로 된 $\alpha$$\beta$ 구조의 동일한 효소단백으로 추정할 수 있었다. Gene donor인 B. pasteurii와 cloning 된 균주 E. coli(pBU11)이 생산한 두 urease의 효소학적 특성을 비교 조사해본 결과 두 urease의 최적반응 pH는 공히 7.5로 나타났으며, pH에 대한 안정성도 두 ureaserk 공히 pH 5.5에서 10.5 사이에서 50% 이하로 활성이 떨어지지 않는 강한 pH 안정성을 보였다. 두 urese의 최적반응의 온도는 $60^{\circ}C$였으며, 비교적 온도에 대한 저항이 강한 효소임을 알았다. 두 urease의 활성에 미치는 금속이온의 영향은 $Ag^{2+}$, $Hg^{2+}$ 등에서 양효소가 모두 강한 저해현상을 받는 반면, $Mn^{2+}$, $Mg^{2+}$ 에서는 다소 촉진되는 현상을 보였다. 효소반응 저해제들의 영향을 조사해 본 결과 p-CMB, acetohydroxamic acid에 두 urease가 모두 강한 저해를 받았다. 두 urease의 $K_m$ 값과 $V_{max}$ 값은 E. coli(pBU11)의 urease는 $4.21{\times}10^{-2}mol/\ell$, $86.96\ell$mol/min 이었고, B. pasteurii urease는 $4.04{\times}10^{-2}mol/\ell$, $160\ell$mol/min이었다. 따라서 B. pasteurii의 urease나 그 urease gene으로 cloning되어 E. coliso에서 발현된 recombinant urease는 분자량이나 효소학적 특서에서 거의 동일한 효소단백임을 알 수 있었다.
The ethanol extract from the root bark of Morus alba showed the strongest antimicrobial activity on the growth of almost all the tested microorganisms which were food-borne pathogens and food-related microorganisms. Therefore, fatty acid composition, amino acid composition and shape change of microorganisms treated with the ethanol extract from the root bark of Morus alba were examined. In effects of treatment with the ethanol extract on the fatty acid compositions of B. subtilis, S. aureus and E. coli, fatty aicd compositions such as hexadecanoic acid (16:0) and octadecanoic acid (18:2) of the tested strains were increased but pentadecanoic acid (15:0) heptadecanoic acid (17:0) and acid (16:1) and octadecenoic acid (18:1) of E. coli were decreased. The ethanol extract did not significantly affect the aminn acid composition of the tested strains. Transmission electron micrographs of microorgani는 treated with the ethanol extract exhibited morphological changes that irregularly contracted cell surface in S. aureus and destructed cell walls in B. subtilis and E. coli.
Sung, Su-Jin;Huh, Jung-Bo;Yun, Mi-Jung;Chang, Brian Myung W.;Jeong, Chang-Mo;Jeon, Young-Chan
The Journal of Advanced Prosthodontics
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제5권1호
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pp.2-8
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2013
PURPOSE. Autoclaves and UV sterilizers have been commonly used to prevent cross-infections between dental patients and dental instruments or materials contaminated by saliva and blood. To develop a dental sterilizer which can sterilize most materials, such as metals, rubbers, and plastics, the sterilization effect of an atmospheric pressure non-thermal air plasma device was evaluated. MATERIALS AND METHODS. After inoculating E. coli and B. subtilis the diamond burs and polyvinyl siloxane materials were sterilized by exposing them to the plasma for different lengths of time (30, 60, 90, 120, 180 and, 240 seconds). The diamond burs and polyvinyl siloxane materials were immersed in PBS solutions, cultured on agar plates and quantified by counting the colony forming units. The data were analyzed using one-way ANOVA and significance was assessed by the LSD post hoc test (${\alpha}$=0.05). RESULTS. The device was effective in killing E. coli contained in the plasma device compared with the UV sterilizer. The atmospheric pressure non-thermal air plasma device contributed greatly to the sterilization of diamond burs and polyvinyl siloxane materials inoculated with E. coli and B. subtilis. Diamond burs and polyvinyl siloxane materials inoculated with E. coli was effective after 60 and 90 seconds. The diamond burs and polyvinyl siloxane materials inoculated with B. subtilis was effective after 120 and 180 seconds. CONCLUSION. The atmospheric pressure non-thermal air plasma device was effective in killing both E. coli and B. subtilis, and was more effective in killing E. coli than the UV sterilizer.
세균이 외부stress에 대한 자가저항으로 biofilm형성을 하는 것은 식품 뿐만아니라 식품기기등의 세척, 소독등의 식품안전 확보에 많은 어려움을 주게 된다. 본 연구에서는 glass wool과 mlcrotiter plate assay를 이용하여 주요 식중독 세균인 Salmonella, E. coli, B. cereus, S. aureus를 여러가지 식품보존하에서 상해와 biofilm형성 정도를 비교하였다. 이들 세균은 외부의 stress없는 조건하에서도 상해를 받지 않았고 모두 biofilm이 형성되어 glass wool에 부착되었다. Microtiter plate assay에서의 상해별 biofilm형성은 acid stress에서 10%이내의 상해를 받은 E. coli와 약 40%의 상해를 받은 S. aureus에서 높게 나타났다. $4^{\circ}C$의 cold temperature에서는 30-50% 상해를 나타낸 B. cereus와 E. coli가 높은 biofilm 형성을 보였고 cold starvation에서는 다른 stress에 비해 전체적으로 biofilm형성도가 낮은 값으로 측정되었다. 그리고 6% sodium chlorine solution에서 30-55%의 상해를 입은 Salmonella가 높은 biofilm 형성도를 보였다. 그러나 같은 종의 식중독 세균이라도 외부의 stress 대하여 다양한 정도의 biofilm을 생성하는 것으로 보인다. 따라서 식품으로부터 이들 식중독 세균을 제어하기 위해서는 대상식품의 보존환경에 따른 biofilm 형성특성을 고려해야 할 것으로 사료된다.
The MICs of various macrolide, lincosamide and streptogramin B antibiotics against highly erythromycin-resistant Escherichia coli 209K strain were evaluated. E. coli 209K showed high MICs against 14-membered macrolides and the relatively weaker resistance to 16-membered macrolides, lincosamides and streptogramin B. The macrolide-phosphotransferase K from E. coli 209K showed greater substrate specificity to the 14-membered macrolide antibiotics than to the 16-membered macrolide antibiotics, lincosamide and streptogramin B. Therefore, it was considered that the high resistance was due to the macrolide-phosphotransferase K.
Expression in the periplasm of Escherichia coli of cloned heavy and light chain cDNAs for Fab fragment of a murine monoclonal antibody MabB9 (${\gamma}2b$, K), specific for human plasma apolipoprotein B-100 of LDL, was studied. For the purpose, a vector for two-cistronic expression of the heavy chain cDNA, at the 5' terminus, and light chain cDNA, at the 3' terminus, was constructed using the signal sequences, pelB (for heavy chain) and ompA (for light chain) in a pET vector system. The constructed vector was transformed into E. coli BL21(DE3). The expressed heavy chain (25 kDa) and light chain (23 kDa) of the antibody molecule were detected in total cell extracts as well as in the periplasmic extracts of E. coli.
Belaynehe, Kuastros Mekonnen;Won, Ho Geun;Yoon, In Joong;Yoo, Han Sang
대한수의학회지
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제59권3호
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pp.157-160
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2019
The production of rmtB-encoded 16S rRNA methylases has emerged as a novel mechanism promoting high-level resistance toward aminoglycosides in Gram-negative bacteria. Between 2015 and 2017, 636 distinct commensal Escherichia (E.) coli isolates were collected from different farms in South Korea to determine the prevalence and molecular characteristics of rmtB. The positive rates of rmtB between all the isolates and amikacin-resistant isolates were 1.1 and 100%, respectively. High-level aminoglycoside resistance could be transferred by conjugation from rmtB-positive donors to higher amikacin-resistance efficacies. This is the first report of 16S rRNA methylase-encoding genes in E. coli isolated from food-producing animals in Korea.
목 적:E. coli UTI의 임상양상과 UPEC의 미생물학적 특징을 확인하여 연령별, 계통군별 연관성을 평가하고자 하였다. 방 법: 2008년 9월부터 2009년 8월까지 요로감염으로 입원하여 배양검사에서 E. coli가 검출된 환아를 대상으로 하였다. 환자의 임상양상과 검사소견을 확인하였고, 검출된 E. coli를 계통학적으로 분류하고 독성유전자의 분포와 항생제 내성률을 조사하였다. 결 과:총 47명의 E. coli UTI 환아가 연구에 참여하였다. 연령군별로 6개월 미만 30명(63.8%), 6-12개월은 8명(17.0 %), 12개월 이상 9명(19.1%)이었다. 6개월 미만 연령군에는 남아(70.0%)가 많았고 6개월 이상연령군에는 여아(76.5%)가 많았다(P =0.002). 계통학적 분석에서 UPEC의 대부분(80.8%)은 B2 혹은 D군에 속하였다. 연령군별로는 6개월 미만 연령군에는 B2군(80.0%)가 많았고 6개월이상연령군에는non-B2군(52.9%)가 많았다(P=0.020). 계통군별로는 B2군에는 몇몇 독성유전자의 높은 분포가 확인되었고(P <0.05), D군에는 TMP/SMX에 내성을 보이는 균주들이 높은 빈도로 포함되었다(P =0.031). 결 론:E. coli UTI 환아 중 6개월 미만과 6개월 이상 연령군은 남녀비와 계통군의 분포 차이를 보였다. 즉, 6개월 미만 연령군에는 남아와 B2군의 분포가 높았고, 6개월 이상 연령군에는 여아와 non-B2군의 분포가 높았다. 연령별 계통군의 분포 차이는 향후 연구를 통해 검증이 필요할 것이다.
전 세계적으로 fluoroquinolone (FQ) 내성 그람음성균이 출현하고 있는 가운데, 최근 우리나라에서 FQ 내성 E. coli의 증가 추세는 심각한 우려를 낳고 있다. 이에 본 연구에서는 2018년 6월부터 12월까지 대전지역의 3차 병원에서 분리된 ciprofloxacin 내성 E. coli 56균주를 대상으로, 역학관계와 FQ 내성 결정인자의 양상을 조사하였다. 역학관계를 확인하기 위해 multilocus sequence typing (MLST)을 실시하였다. PCR과 염기서열 분석은 gyrA, gyrB, parC, parE 유전자의 QRDR에서 염색체상의 돌연변이와 aac(6)-Ib-cr, qepA, qnrA, qnrB, qnrC, qnrD 및 qnrS와 같은 PMQR 유전자의 빈도를 확인하였다. MLST 분석 결과, 12개의 ST를 확인하였으며, 이 중 가장 우세한 ST는 ST131 (31/56, 55.4%)이었고, 순차적으로 ST1193 (13/56, 23.2%), ST405 (3/56, 5.4%)의 결과를 보였다. ciprofloxacin 내성 E. coli 56균주 중 gyrA 유전자에서 83번째 아미노산인 serine (S)이 leucine (L)으로, 87번째 아미노산인 aspartic acid (D)가 asparagine (N)으로 치환되고, parC 유전자에서 80번째 아미노산인 serine (S)이 isoleucine (I)으로, 84번째 아미노산인 glutamic acid (E)가 valine (V)으로 치환된 결과(29/56, 51.8%)가 가장 빈번하게 확인되었고, aac(6)-Ib-cr (19/56, 33.9%)은 가장 흔한 PMQR 유전자로 확인되었다. 이러한 FQ 내성 결정인자의 결과는 다른 클론과 비교하여 ST131에서 더 빈번하게 확인되었다. ciprofloxacin 내성 E. coli 균주에 대한 역학적 특성의 지속적인 모니터링과 FQ 내성 결정인자에 대한 추가 연구가 필요할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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