• 미생물학회지
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• 제25권2호
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• pp.103-109
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• 1987

An ozone-sensitive mutant of Escherichia coli strain B, MQ 1844 is described. Its properties, including high sensitivity to ozone and radiation, inducible filamentation, extensive DNA degradation and impaired DNA synthesis following ozonation, are attributable to a mutation in ozrB, a gene which is cotransducible with malB. Based on differences in phenotypic expression as well as on the particular location of this gene on the bacterial chromosome, ozrB appears as distinct from the other ozone-or radiation-sensitivity genes previously described.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권2호
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• pp.155-160
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• 1986

E. coli-Yeast shuttle vector YEp 13에 B. amyloliquefaciens의 $\alpha$-amylase gene을 cloning하여 얻은 hybrid plasnidlasmid를 E. coli를 숙주세포로 하여 형질을 발현시켰다. 형질전환주의 $\alpha$-amylase 활성 측정 결과, B. amyloliquefaciens에 대해 20-30%의 상대 활성도를 나타내었다. 형질전환주의 경우 생성된 $\alpha$-amylase의 60-65%가 periplasm에 축적되었으며 세포 외부로의 분비는 없었다. Hybrid DNA를 agarose-gel 전기영동으로 조사한 결과 그 크기가 다른 다수의 hybrid DNA가 확인되었으며 pHA28의 plasmid (a)(Fig.3)에서만 $\alpha$-amylase 활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다 pHA28의 plasmid(a)의 크기가 YEp 13 plasmid DNA보다 작은 것은 YEp13 plasmid에서 yeast gene부분이 deletion된 결과로 추측되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제13권3호
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• pp.297-302
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• 1985

미생물중 urease생성능이 아주 강한 B. pasteurii의 Hind III partial digest 된 chromosomal DNA를 E. coli-B. subtilis bifunctional plasmid vector pGR 71으로 E. coli RR1 균주에 cloning 하므로써 그 urease gene을 expression시킬 수 있었다. 그러나 B. subtilis에서는 insertion DNA fragment의 deletion으로 expression되지 않았다. Cloning된 E.coli RR1 균주로부터 분리 정제한 urease gene함유 Plasmid(pGU66)의 restriction map을 작성하여 본 결과 7.1 Mdal의 insertion fragment가 삽입된 12.6Mdal의 plasmid에 Hind III, Bgl II, Xba I, Sal I등 몇 개의 cleavage site 위치를 찾을 수 있었다. Cloning된 E. coli의 urease는 periplasmic space에 많은 비율로 축적되며, 그 효소학적 성질은 donor인 B.pasteurii의 그것과 매우 유사하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제16권2호
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• pp.111-118
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• 1988

유기산 생산균인 L. casei Y, Str. faecium C, Str. faecalis, Cl. butyricum M, B. toyoi를 사료첨가제와 발효유로부터 분리 확인하여 이들 균주가 자돈의 대장균증 설사를 유발시키는 E. coli $A_2$, E. coli G$_7$에 대하여 in vitro에서는 어떤 항균효과를 나타내는지 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. L. casei Y, Str. faecium C, Str. faecalis, B. toyoi Cl. butyricum M을 각각 배양한 BL broth 3일 배양액은 모두 E. coli $A_2$와 E. coli G$_7$에 대하여 항균효과를 나타내었고, 이들 배양액을 E. coli $A_2$와 E. coli G$_7$에 대한 발육 Disc 확산시험 결과 그 저지환 직경은 각각 15mm와 17mm, 14mm와 15mm, 13mm와 14mm, 11mm와 13 mm, 10mm와 12mm 였다. 2. 유기산 생산 능력이 우수한 균일수록 E. coli $A_2$와 E. coli G$_7$에 대한 항균력이 높게 관찰되었으며, L. casei Y와 Str. faecium C가 이들 두 대장균에 대하여 높은 항균력을 나타내었다. 3. 유기산 생성균과 대장균(E. coli $A_2$, E. coli G$_7$)을 BL broth 에 혼합 배양할 때 E. coli $A_2$와 E. coli G$_7$은 배양액의 pH가 5.0 이하일 때 생육억제 되었고, pH 4.5 이하였을 때 사멸되었다. 4. 생성된 유기산은 배양액의 pH를 저하시킴과 동시에 항균성 물질로 직접 작용하여 E. coli $A_2$와 E. coli G$_7$의 생육저해 또는 사멸을 유도하였다. 5. E. coli $A_2$가 E. coli G$_7$보다 유기산 생산균의 대사산물에 대하여 더 높은 내성을 갖고 있었다.

• 대한수의학회지
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• 제48권3호
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• pp.295-303
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• 2008

One hundred and sixty nine Escherichia (E.) coli strains isolated from fecal samples of aquatic birds in Geumho river basin and Dalseong park were tested by agar dilution method to determine their susceptibility patterns to 14 antimicrobial agents. The distribution of tetracycline resistance determinants (tetA, tetB, tetC, tetD and tetE) were also examined by PCR in 76 tetracycline-resistant ($TC^r$) E. coli isolates. The high resistance was observed in tetracycline, cephalothin and ampicillin (45.0~36.7%). Resistance of E. coli isolates derived from Dalseong park to tetracycline, cephalothin, ampicillin and streptomycin (65.7~44.8%) were significantly higher than those isolated from Geumho river basin (31.4~14.7%). About seventy percent (70.4%) of the strains isolated were resistant to one or more drugs tested. Thirty (39.5%) of 76 $TC^r$ E. coli isolates which were resistant to one or more drugs transferred all or a part of their resistance patterns to the recipient strain of E.coli J53 by conjugation. All of $TC^r$ E. coli isolates contained at least one or more of 5 tet genes examined. The most common genes found in these isolates were tetA (60.6%) and followed by tetB (7.9%) and tetC (1.3%). However, tetD and tetE were not found in any of the isolates tested. Twenty one (27.6%) of $TC^r$ E. coli isolates had two determinants, tetA/tetB (20 strains), tetA/tetC (1 strain). And two strains (2.6%) contained three determinants (tetA/tetB/tetC).

• KSBB Journal
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• 제23권5호
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• pp.445-448
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• 2008

생명공학분야에서 매우 중요한 효소 중에 하나인 lipase는 여러 산업에 유용하게 사용되고 있다. lipase를 선별하기 위해서는 최적화된 발현 시스템이 필요하다. 많은 발현 시스템중에 E.coli 발현 시스템은 바람직한 특성을 갖는 효소를 스크리닝하거나, 선별된 변이체들의 특성을 확인하는 데에 소요되는 시간과 비용을 단축시켜 줄 것이다. 본 연구에서는 그 중에 BL21와 OrigamiB에서 CalB를 발현하였다. 그 결과 BL21 균주에서 발현된 CalB는 대부분이 불용성의 inclusion body를 형성하고, 전혀 활성을 나타내지 않았다. 이전의 타 연구와 더불어 이 결과에서 E.coli 균주에서 CalB의 기능적 발현이 상당히 어렵다는 것을 알 수 있다. 특히 불용성의 inclusion body형성과 lipase의 세포에 대한 유독성이 원인이 될 수 있다. 그러나 BL21와 비교해보면, OrigamiB에서 발현된 CalB 또한 많은 양의 inclusion body를 형성하지만, lipase의 주요 특성중의 하나인 가수분해 활성이 상당하게 나타나는 것을 알 수 있다. lipase의 구조 형성을 도와주는 변형된 OrigamiB와 저온유도시스템인 pCold 플라스미드를 사용했기 때문이다. 이처럼 균주나 플라스미드의 선택, 유도조건의 변경 등의 여러 연구를 통하여 유용한 효소를 선별할 수 있다.

• 한국축산식품학회지
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• 제23권3호
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• pp.278-283
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• 2003

식중독 세균 검출에 있어서 리포좀의 이용 가능성을 병원성 식중독 세균인 E. coli O157:H7을 대상으로 검토하였다. 리포좀의 표면에 E. coli O157:H7을 인식하는 항체를 공유결합시키고 리포좀의 내부 수용액상에는 형광 표지물질인 sulforhodamine B를 포집시켰다. 이렇게 합성된 면역리포좀이 진단시약으로써의 기능을 하는지 알아보기 위해 두 가지 분석 방법을 적용하였다. 첫번째 방법으로써, test-strip을 이용한 분석은 E. coli O157:H7의 존재 유무를 test-strip 상에 나타난 분석 신호을 육안으로 관찰하는 것으로써 E. coli O157:H7 존재시 분석 신호가 저하되는 것을 원리로하였다. 이 방법은 고가의 실험 장비가 필요하지 않아 현장적용성이 용이한 장점이 있다. 두번째 방법은, IMS 후 목표 세균에 결합되어 있는 리포좀을 파괴시켜 나오는 형광도의 세기를 측정하는 방법으로 이때는 형광도의 강도와 E. coli O157:H7 세균 수와 비례적 관계가 나타났다. 상기의 두 방법에서 얻은 결과는, 리포좀을 E. coli O157:H7 검출에 응용할 수 있는 가능성을 제시하며 추후에 식품 적용 실험이 요구된다.

• 한국동물위생학회지
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• 제44권4호
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• pp.209-216
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• 2021

This study was aimed to investigate occurrence and the antimicrobial resistance of Escherichia coli isolates obtained from the feces of wild birds in Daegu. In total, 98 E. coli isolates (17.9%) were obtained from 547 fecal samples of wild birds. The E. coli carried by the birds showed a relatively high rate of antimicrobial resistance to tetracycline (27.6%) and ampicillin (21.4%). Drug resistance of the isolates to the others (penicillins, cephems, carbapenems, aminoglycosides, quinolones, sulfonamides and phenicols) resulted in the rates less than 20%, and all isolates were susceptible to imipenem, ciprofloxacin, cefotetan, and amikacin. Approximately, 45% E. coli among the isolates were resistant to one or more drugs tested. The higher rate of tetracycline resistance led us to determine the prevalence of the tet genes (tetA, tetB, tetC, tetD and tetE) in the tetracycline-resistant E. coli isolates by using PCR. All isolates of the tetracycline-resistant E. coli contained at least one or more of these tet genes examined. The most prevalent one was tetA (59.3%), and followed by tetB (7.4%) when tested with the selected 5 tet genes. Except tetA and tetB, however, the remaining tet genes (tetC, tetD, and tetE) tested were not found in this study. Nine isolates among the tetracycline-resistant E. coli contained the two (tetA and tetB) determinants of tetracycline resistance, simultaneously.

• Journal of Microbiology
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• 제42권2호
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• pp.111-116
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• 2004

It is known that Bacillus subtilis glutamyl-tRNA synthetase (GluRS) mischarges E. coli $tRNA_{1}$$^{Gln}$ with glutamate in vitro. It has also been established that the expression of B. subtilis GluRS in Escherichia coli results in the death of the host cell. To ascertain whether E. coli growth inhibition caused by B. subtilis GluRS synthesis is a consequence of Glu-$tRNA_{1}$$^{Gln}$ formation, we constructed an in vivo test system, in which B. subtilis GluRS gene expression is controlled by IPTG. Such a system permits the investigation of factors affecting E. coli growth. Expression of E. coli glutaminyl-tRNA synthetase (GlnRS) also amelio-rated growth inhibition, presumably by competitively preventing $tRNA_{1}$$^{Gln}$ misacylation. However, when amounts of up to 10 mM L-glutamine, the cognate amino acid for acylation of $tRNA_{1}$$^{Gln}$, were added to the growth medium, cell growth was unaffected. Overexpression of the B. subtilis gatCAB gene encoding Glu-$tRNA^{Gln}$ amidotransferase (Glu-AdT) rescued cells from toxic effects caused by the formation of the mis-charging GluRS. This result indicates that B. subtilis Glu-AdT recognizes the mischarged E. coli Glu-$tRNA_{1}$$^{Gln}$, and converts it to the cognate Gln-$tRNA_{1}$$^{Gln}$ species. B. subtilis GluRS-dependent Glu-$tRNA_{1}$$^{Gln}$ formation may cause growth inhibition in the transformed E. coli strain, possibly due to abnormal protein synthesis.

• 미생물학회지
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• 제25권4호
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• pp.262-273
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• 1987

pBR 322와 pBD9을 이용하여 Staphylococcus aureus에서 분리된 chloramphenicol 저항성(Cmr) plasmid인 pSBK 203상의 ori 부위를 cloning하였다. 또한 E. coli 내에서도 발현하는 pSBK 203상의 Cm 저항성 부위 및 cloning 된 ori 부위를 pBR 322에 재조합시켜 E. coli와 그람양성균인 Bacillus subtilis 양쪽 모두에서 복제되고 또 항생물질에 대한 저항성도 각각 발현되는 shuttle vector 구성을 시도하였다.