지난 20여년 동안 항생제나 화학 요법의 문제점을 줄이고 외부 환경의 변화에 민감하게 반응하는 장내 미생물들의 균총을 유지시켜주기 위해 살아있는 미생물제제(direct-fed microbial agents, DFM)를 반추가축의 사료에 직접 첨가하고 있다. 반추동물 사료에도 생산성을 개선하기 위하여 여러 종류의 DFM이 널리 이용이 되고 있는데, DFM은 건물섭취량(dry matter intake, DMI)의 증가 및 반추위내에서의 영양소 분해율 향상 그리고 유생산량의 증가와 체온감소 등에 효과적이다(Piva 등, 1993; Higginb- otham 등, 1994; MacGilliard와 Stallings, 1998; Nocek와 Kautz, 2006). 대표적인 DFM으로는 효모균, 곰팡이, 박테리아 및 세포 구성물질 등이 이에 속한다(Beharka와 Nagaraja, 1993; Sullivan과 Martin 1999). 효모 및 효모배양물은 대표적인 DFM의 한 종류인데, 반추가축에게 효모(yeast) 및 효모 배양물(yeast culture)을 급여하였을 때 반추위 내 발효 특성을 변화시키고(Harrison 등, 1988; Martin과 Nisbet, 1990) 반추위 내에서 조단백질과 조섬유의 반추위내 분해율을 개선시키며(Gomez-Alarcon 등, 1990; Williams 등, 1991), 체내 전장소화율(Gomez-Alarcon 등, 1990; Wiede- mier 등, 1987)을 향상시키는 효과가 있다고 보고된 바 있다. 한편, 일반적으로 대부분의 Clostridium 균들은 독소를 생산하거나 인체에 유해한 물질들을 생산하여 사람과 가축에게 좋지 않은 영향을 주고 있으나, Clostridium butyricum은 장내 유익한 균으로서 유산균과의 공생이 가능하고 반추위 내에서 주요 VFA 생산에 관여하기도 하며(Araki 등, 2002a, 2002b) 많은 종류의 비타민 B군을 생산하여 유산균이 이용할 수 있게 한다. 또한 생산되어진 acetic acid와 butyric acid는 장관 상피세포를 흡수되어 상피세포에서 에너지원으로 사용되어진다고 하였다(김 등, 2001). 낙산균은 주로 단위동물에서 사용되어 왔는데, 일부 복합생균제의 형태로 사용하였을 경우 유해세균이 장 점막을 침입하는 것을 방지하고(Fuller와 Brooker, 1974), butyric acid를 생산하여 장내 pH를 저하시키며 항균작용(Under-dahl 등, 1982)을 하는 것으로 알려져 있다. S. cerevisiae는 가장 일반적으로 사용되는 균주로써 이의 효과와 효능에 관한 연구는 비육우와 착유우를 대상으로 많이 이루어져 왔지만, 낙산균은 일부 국내 젖소 사육농가에서 사용되고 있음에도 불구하고 이에 대한 연구는 단위동물 및 어린송아지의 경우(최 등, 1991)를 제외하고는 거의 이루어지지 않았다. 따라서 본 연구는 S. cerevisiae 및 C. butyricum을 단독으로 또는 혼합하여 급여할 때 면양에서의 반추위내 발효성상과 소화율, 그리고 젖소를 이용한 사양시험을 통해 산유량과 유조성에 미치는 효과를 비교하기 위하여 실시되었다.
3원 교잡종 (Landrace$\times$Yorkshire$\times$Duroc) 육성돈 72두를 공시하였으며, 시험 개시시 체중은 24.64$\pm$2.46kg이었다. 시험설계는 1)NC(basal diet; antibiotics free diet), 2) PC (NC diet + 0.1% antibiotics; chlortetracycline 0.05% + neomycin 0.05%), 3)DFM0.1(NC diet + 0.1% DFM)와 4)DFM0.3(NC diet + 0.3% DFM)의 4개 처리를 하여 처리당 6 반복, 반복당 3마리씩 완전임의 배치하였다. 총 사양시험 기간 동안, 일당증체량은 PC, DFM0.3, DFM0.1과 NC의 순으로 각각 806g, 781g, 774g및 753g으로 나타났으나, 유의적인 차이는 보이지 않았다(P>0.05). 사료효율에 있어서는 처리구간 유의적인 차이가 없었다(P>0.05). 혈액 내 IgG(Immunoglobulin G), WBC(White blood cell)함량에 있어서는 생균제를 0.3%첨가한 처리구에서 가장 높은 경향을 보였으나 유의적인 차이는 없었으며(P>0.05), RBC(Red blood cell)함량에 있어서는 처리구간 유의적인 차이를 보이지 않았다(P>0.05). 결론적으로 육성돈에 있어서 Lactic acid bacteria를 기초로한 복합생균제의 첨가, 급여 수준의 증가에 따라 성장 능력과 혈액성상이 개선시키는 영향을 주지 못하였다.
Objective: This meta-analysis was conducted to evaluate the overall effect of direct-fed microbial (DFM) or probiotic supplementation on the log concentrations of culturable gut microbiota in broiler chickens. Methods: Relevant studies were collected from PubMed, SCOPUS, Poultry Science Journal, and Google Scholar. The studies included controlled trials using DFM supplementation in broiler chickens and reporting log concentrations of the culturable gut microbiota. The overall effect of DFM supplementation was determined using standardized mean difference (SMD) with a random-effects model. Subgroups were analyzed to identify pre-specified characteristics possibly associated with the heterogeneity of the results. Risk of bias and publication bias were assessed. Results: Eighteen taxa of the culturable gut microbiota were identified from 42 studies. The overall effect of DFM supplementation on the log concentrations of all 18 taxa did not differ significantly from the controls (SMD = -0.06, 95% confidence interval [-0.16, 0.04], p = 0.228, $I^2=85%$, n = 699 comparisons), but the 18 taxa could be further classified into three categories by the direction of the effect size: taxa whose log concentrations did not differ significantly from the controls (category 1), taxa whose log concentrations increased significantly with DFM supplementation (category 2), and taxa whose log concentrations decreased significantly with DFM supplementation (category 3). Category 1 comprised nine taxa, including total bacterial counts. Category 2 comprised four taxa: Bacillus, Bifidobacterium, Clostridium butyricum, and Lactobacillus. Category 3 comprised five taxa: Clostridium perfringens, coliforms, Escherichia coli, Enterococcus, and Salmonella. Some characteristics identified by the subgroup analysis were associated with result heterogeneity. Most studies, however, were present with unclear risk of bias. Publication bias was also identified. Conclusion: DFM supplementation increased the concentrations of some beneficial bacteria (e.g. Bifidobacterium and Lactobacillus) and decreased those of some detrimental bacteria (e.g. Clostridium perfringens and Salmonella) in the guts of broiler chickens.
본 연구는 사료내 복합생균제의 첨가에 따른 육계의 성장률 및 영양소 소화율에 미치는 영향을 알아보고자 실시하였다. 사양시험은 2일령 Arbor Acre Broiler(♂) 288수를 공시하였고, 사양시험은 5주간 실시하였다. 시험설계는 옥수수-대두박 위주의 사료인 1) 대조구(CON, basal diet), 2) DFM-1(basal diet + 0.2% Enterococcus sp. & Lactobacillur reuteri), 3) DFM-2(basal diet + 0.2% Enterococcus sp. & Lactobacillus plantarum), 4) DFM-3(basal diet + 0.2% Enterococcus sp. & Lactobacillu reuteri & Lactobacillu plantarum), 5) DFM-4(basal diet + 0.2% Enterococcus sp. & Lactobacillus reuteri & Lactobacillus plantarum & Yeast), 6) DFM-5(basal diet + 0.2% Enterococcus sp. &Lactobacillus reuteri & Lactobacillus plantarum & Bacillus subtilis)로 6개 처리로 하였다. 처리당 4반복 12수씩 완전임의 배치하였다. 시작 후 1주까지 생균제 처리구에서 증체량과 사료효율 등에서 대조구보다 높은 결과를 보였으나 유의적인 차이는 없었다. 3∼5주의 기간에서는 생균제 첨가구에서 증체량이 대조구에 비해 개선된 효과를 보였으나 유의적인 차이는 없었다. 전 시험기간에 걸친 변화를 보면 생균제를 첨가한 처리구에서 유의적인 차이는 없었으나 대조구보다 증체량이 높은 경향을 보여 육계 사육기간의 초, 중반기에서 후반기로 갈수록 증체량과, 사료섭취량, 사료효율 등에서 대조구에 비해 개선된 결과를 보였다. DFM-3처리구는 DFM-1보다 성장능력이 낮았으며 DFM-2와 유사하였고, 효모와 Bacillus subtilis가 혼합된 DFM-4와 DFM-5처리구는 높은 성장능력을 보였으나 유의적인 차이는 없었으며 특정생균제의 효과도 발견할 수 없었다. 영양소 소화율은 질소 소화율에서 생균제 처리구가 향상되는 경향을 보였으나 통계적인 차이는 없었다. 결론적으로 복합생균제의 첨가가 복합생균제간 또는 생균제 처리구와 대조구간에는 육계의 생산성에 유의적 차이는 없었으나 후기에 있어서 증체량 및 사료효율을 향상시키는 경향이 있었다.
A balance trial experiment was carried out to evaluate the potential relationship between an enzymatically hydrolyzed yeast (EHY) and yeast culture combined with a live Bacillus subtilis (Bs) on the productive parameters, ileal digestibility, retention of nutrient and energy and villus morphology in broilers. Seventy two 28 d old, Ross B308 male broilers were assigned to a factorial combination of 2 levels of EHY (0 and 1 kg/ton of feed) and 2 levels of Bs (0 and 125 g/ton of feed). The experiment lasted 2 weeks. Several treatment interactions were observed. EHY-fed broilers showed the lowest feed intake and feed conversion ratio whereas Bs-fed broilers showed the highest feed intake and intermediate feed conversion ratio (EHY and BS interaction, p<0.05). Also, EHY-fed broilers had greater ileal digestibility of dry matter (EHY and BS interaction, p<0.01) and energy (EHY and BS interaction, p<0.05) but these responses were counterbalanced by the combination of EHY and Bs. The thickness of the mucosa was similar between the control and EHY-fed broilers, but was lowest when Bs was added alone (EHY and BS interaction, p<0.01). The thickness of the villus was greater in EHY plus Bs-fed broilers, intermediate for the control and lower for Bs or EHY-fed broilers (EHY and BS interaction, p<0.05). The area of the villus was greater in the control and EHY plus Bs-fed broilers (EHY and BS interaction, p<0.05). In addition, EHY-fed broilers showed greater breast yield and nitrogen retention (p<0.01) and ashes digestibility (p<0.05). On the other hand, Bs-fed broilers had greater carcass and breast weight, nitrogen retention, energy excretion and villus height (p<0.05). In summary, EHY and Bs enhanced some growth, carcass and nutrient retention responses, but did not show any synergic relationship in these responses. Opposite to this, the results suggest that the positive effect of EHY on the feed conversion and digestibility of nutrients were counterbalanced by the addition of Bs.
Seo, Ja-Kyeom;Kim, Seon-Woo;Kim, Myung-Hoo;Upadhaya, Santi D.;Kam, Dong-Keun;Ha, Jong-K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제23권12호
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pp.1657-1667
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2010
Direct-fed microbials (DFM) are dietary supplements that inhibit gastrointestinal infection and provide optimally regulated microbial environments in the digestive tract. As the use of antibiotics in ruminant feeds has been banned, DFM have been emphasized as antimicrobial replacements. Microorganisms that are used in DFM for ruminants may be classified as lactic acid producing bacteria (LAB), lactic acid utilizing bacteria (LUB), or other microorganisms including species of Lactobacillus, Bifidobacterium, Enterococcus, Streptococcus, Bacillus and Propionibacterium, strains of Megasphaera elsdenii and Prevotella bryantii and yeast products containing Saccharomyces and Aspergillus. LAB may have beneficial effects in the intestinal tract and rumen. Both LAB and LUB potentially moderate rumen conditions and improve feed efficiency. Yeast DFM may reduce harmful oxygen, prevent excess lactate production, increase feed digestibility, and improve fermentation in the rumen. DFM may also compete with and inhibit the growth of pathogens, stimulate immune function, and modulate microbial balance in the gastrointestinal tract. LAB may regulate the incidence of diarrhea, and improve weight gain and feed efficiency. LUB improved weight gain in calves. DFM has been reported to improve dry matter intake, milk yield, fat corrected milk yield and milk fat content in mature animals. However, contradictory reports about the effects of DFM, dosages, feeding times and frequencies, strains of DFM, and effects on different animal conditions are available. Cultivation and preparation of ready-to-use strict anaerobes as DFM may be cost-prohibitive, and dosing methods, such as drenching, that are required for anaerobic DFM are unlikely to be acceptable as general on-farm practice. Aero-tolerant rumen microorganisms are limited to only few species, although the potential isolation and utilization of aero-tolerant ruminal strains as DFM has been reported. Spore forming bacteria are characterized by convenience of preparation and effectiveness of DFM delivery to target organs and therefore have been proposed as DFM strains. Recent studies have supported the positive effects of DFM on ruminant performance.
This study screened for radio-resistant strains lactic acid bacteria (LAB) by evaluating their capability to survive exposure to ionizing radiation. Ten strains of LAB - Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus delbruekii, Lactococcus lactis, Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium breve, and Pediocuccos pentosaceus - were selected and subcultuted twice. The LAB was then further cultured for 3 d at $37^{\circ}C$ to reach 7-10 Log colony-forming units (CFU)/mL prior to irradiation and immediately exposed to gamma rays or electron beams with absorbed doses of 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, and 10 kGy. Gamma irradiation gradually decreased the number of the tested viable LAB, and the effect was irradiation dose dependent. A similar effect was found in electron beam-irradiated LAB. Radiation sensitivity of LAB was calculated as $D_{10}$ values, which ranged from 0.26 kGy to 0.9 kGy and 0.5 kGy to 1.44 kGy with exposure to gamma and electron beam irradiation, respectively, in all tested LAB. L. acidophilus was the most resistant to gamma and electron beam irradiation, with $D_{10}$ values of 0.9 kGy and 1.44 kGy, respectively. These results suggest that L. acidophilus might be suitable for the preparation of probiotics as direct-fed microbes for astronauts in extreme space environments.
Kim, Seon-Ho;Mamuad, Lovelia L.;Kim, Dong-Woon;Kim, Soo-Ki;Lee, Sang-Suk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권3호
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pp.558-566
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2016
Biotic agents such as fumarate-reducing bacteria can be used for controlling methane (CH4) production in the rumen. Fumarate-reducing bacteria convert fumarate to succinate by fumarate reductase, ultimately leading to the production of propionate. Fumarate-reducing bacteria in the genus Enterococcus were isolated from rumen fluid samples from slaughtered Korean native goats. The enterococci were identified as Enterococcus faecalis SROD5 and E. faecium SROD by phylogenetic analyses of 16S rRNA gene sequences. The fumarate reductase activities of the SROD5 and SROD strains were 42.13 and 37.05 mM NADH oxidized/min/mg of cellular nitrogen (N), respectively. Supplementation of rumen fermentation in vitro with the SROD5 and SROD strains produced significantly higher propionate, butyrate, and total volatile fatty acid (VFA) concentrations than controls at 12 h; VFA concentrations tended to increase after 24 h of incubation. The generated CH4 concentration was significantly lower in the SROD5 and SROD treatment groups after 24 h of incubation. These findings indicate that E. faecium SROD has potential as a direct-fed microbial additive for increasing total VFAs while decreasing CH4 production in rumen fermentation in vitro.
The effects of Lactobacillus mucosae (L. mucosae), a potential direct fed microbial previously isolated from the rumen of Korean native goat, on the rumen fermentation profile of brewers grain were evaluated. Fermentation was conducted in serum bottles each containing 1% dry matter (DM) of the test substrate and either no L. mucosae (control), 1% 24 h broth culture of L. mucosae (T1), or 1% inoculation with the cell-free culture supernatant (T2). Each serum bottle was filled anaerobically with 100 mL of buffered rumen fluid and sealed prior to incubation for 0, 6, 12, 24, and 48 h from which fermentation parameters were monitored and the microbial diversity was evaluated. The results revealed that T1 had higher total gas production (65.00 mL) than the control (61.33 mL) and T2 (62.00 mL) (p<0.05) at 48 h. Consequently, T1 had significantly lower pH values (p<0.05) than the other groups at 48 h. Ammonia nitrogen ($NH_3$-N), individual and total volatile fatty acids (VFA) concentration and acetate:propionate ratio were higher in T1 and T2 than the control, but T1 and T2 were comparable for these parameters. Total methane ($CH_4$) production and carbon dioxide ($CO_2$) were highest in T1. The percent DM and organic matter digestibilities were comparable between all groups at all times of incubation. The total bacterial population was significantly higher in T1 (p<0.05) at 24 h, but then decreased to levels comparable to the control and T2 at 48 h. The denaturing gradient gel electrophoresis profile of the total bacterial 16s rRNA showed higher similarity between T1 and T2 at 24 h and between the control and T1 at 48 h. Overall, these results suggest that addition of L. mucosae and cell-free supernatant during the in vitro fermentation of dried brewers grain increases the VFA production, but has no effect on digestibility. The addition of L. mucosae can also increase the total bacterial population, but has no significant effect on the total microbial diversity. However, inoculation of the bacterium may increase $CH_4$ and $CO_2$ in vitro.
Feedlot and in vitro ruminal experiments were conducted to assess the effects of saponin-containing surfactant applied during tempering of barley grain on cattle growth performance and on ruminal fermentation. In the feedlot experiment, treatments with three barley grain/barley silage based diets were prepared using barley grain at 7.7% moisture (dry, D), after tempering to 18% moisture (M), or after tempering with a saponin-based surfactant included at 60 ml/t (MS). Each treatment was rolled at settings determined previously to yield optimally processed barley. A total of 180 newly weaned British${\times}$Charolais steers were fed three diets in 18 pens for a 63-d backgrounding period and 91-d finishing period to determine feed intake, growth rate and feed efficiency. Cattle were slaughtered at the end of the experiment to measure the carcass characteristics. Tempering reduced (p<0.001) volume weight and processing index, but processing characteristics were similar between MS and M. Tempering increased (p<0.05) growth during backgrounding only, compared with D, but did not affect feed intake in either phase. During backgrounding, feed efficiency was improved with tempering, but during finishing and overall this response was only observed with the surfactant. Tempering did not affect carcass weight, fat content or meat yield. Surfactant doubled the proportion of carcasses grading AAA. In the in vitro experiment, barley (500 mg; ground to <1.0 mm or steam-rolled) was incubated in buffered ruminal fluid (40 ml) without or with surfactant up to 20 ${\mu}l/g$ DM substrate for 24 h. Surfactant increased (p<0.05) apparent DM disappearance and starch digestibility but reduced productions of gas and the volatile fatty acid and acetate:propionate ratio, irrespective of barley particle size. Compared with feeding diets prepared with non-tempered barley, tempering with surfactant increased the feed efficiency of feedlot steers. This may have arisen from alteration in processing characteristics of barley grain by surfactant rather than its direct effect on rumen microbial fermentation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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