In our studies on the role of $\beta$-galactosidase in fruit softening, significant difficulty, was encountered in our attempts to extract RNA from persimmon(Diospyros kaki L. cv. Fuyu) fruit due to astringency and tannin content. Initial, unsuccessful RNA extractions involved methods using guanidinium isothiocyanate/CsCl with and without polyvinylpyrrolidone(PVP), phenol/sodium lauryl sulfate(SDS), guanidinium hydrochloride, as well as polysomal RNA purification method that used 0.2 M Tris-HCI (pH 9.0) containing KCI, Mg-acetate, EDTA, $\beta$-mercaptoethanol, and sucrose. A method was devised which employed treatment of fruit with CO2 gas to diminish astringency prior to RNA extraction, followed by extraction of tissue powders with Proteinase K extraction buffer containing PVP and ascorbate at an alkaline pH. This procedure resulted in the removal of tannins and other polyphenolics and extraction of relatively large amount of high-quality RNA suitable for cDNA library construction and polymerase chain reaction(PCR). Futhermore, the procedure does not use the toxic and corrosive chemical guanidinium isothiocyanate or require ultracentrifugation.
Salinity stress limits plant cultivation in many areas worldwide; however, persimmon (Diospyros spp.) has high tolerance to salt. Five accessions of Diospyros [three of Diospyros lotus (accession numbers 824, 846, and 847); one of Diospyros kaki var. sylvestris (869); and one of Diospyros virginiana (844)] were chosen for analysis of salinity stress. We compared the effects of salt stress on plant growth, relative water content (RWC), malondialdehyde (MDA), electrolyte leakage (EL), hydrogen peroxide content ($H_2O_2$), and antioxidative enzyme activities (superoxide dismutase, SOD; catalase, CAT; peroxidase, POD; and ascorbate peroxidase, APX) in leaves of healthy potted seedlings from each of the five accessions after salt treatment for 25 days. Salt stress affected the growth of plants in all five accessions, with all three D. lotus accessions showing the most severe effect. Salt stress increased membrane lipid peroxidation in all accessions, but a stronger increase was observed in the three D. lotus accessions. Moreover, accumulation of $H_2O_2$ was faster in salt-sensitive D. lotus compared to salt-tolerant D. virginiana 844. The activities of all antioxidant enzymes increased in D. virginiana 844 and in D. kaki var. sylvestris 869; the activities of SOD, CAT, and APX were at similar levels in D. virginiana 844 and D. kaki var. sylvestris 869, but POD activity was stimulated to a greater extent in D. virginiana 844. The activities of all antioxidant enzymes (except POD) decreased in D. lotus 824 and increased (except for SOD) in D.lotus 846. The activities of SOD and APX decreased in D. lotus 847, whereas POD and CAT activities both increased. Relative water content decreased significantly in D. lotus. No significant changes in lipid peroxidation or relevant antioxidant parameters were detected in any of the accessions in controls treated with 0.0% NaCl. D. virginiana 844 had higher antioxidant capacity in response to salinity compared to other persimmon rootstocks. These results indicate that changes of these key physiological variables are related to salinity resistance in different accessions of persimmon.
청도반시 추출물로부터 라디칼 소거활성, T-bet promoter 활성, IL-4 발현 활성의 상관관계를 분석하고자 7월부터 10월까지 감을 시기별로 수확하여 분자염증 활성 여부를 확인하였다. 감의 무게는 시기가 경과할수록 무거워지면서 항산화 활성에 있어서는 감이 미숙과일수록 항산화활성이 우수하였다. 4가지의 용매로 추출한 감의 항산화 활성도 유사한 양상을 보였다. T-bet promoter 활성은 추숙이 될 수록 억제되는 양상을 보였는데, 이에 반하여 IL-4의 발현 정도는 숙성함에 따라 증가하는 것을 알 수 있었다. 이로 미루어 보아 수확시기에 따라 이러한 분자염증에 관련한 일련의 활성의 억제 효과는 감이 미숙과일수록 활성이 상승하였다.
2020년 경상북도 상주시 감 과수원에서 갈색고약병이 발생하였다. 병징은 처음에 자갈색 내지 암갈색의 균사체가 가지 표면 일부분에 들러붙어 있다가 점차 균사체들이 자라면서 큰 덩어리로 합쳐져 결국엔 가지를 완전히 둘러싸였다. 균총의 색깔은 처음에 흰색이고 배양기간이 경과됨에 따라 배지 표면에 갈색의 균사가 많이 형성되었다. 균사생육 적온은 30℃이었다. rDNA의 complete internal transcribed spacer 영역의 염기서열을 분석하였고, 분석된 염기서열(564 bp)을 BLASTN 프로그램으로 확인한 결과, Septobasidium속(GenBank accession nos. HQ267951, HQ267959)과 99%의 상동성을 나타내었다. 또한, Septobasidium broussonetiae (HM209416)와 92%, Septobasidium bogoriense (HM209414)와 91%의 상동성을 나타내었다. 이와 같이 감에서 발생한 병징과 병원균의 균학적 특징을 기초로 하여 이 병을 Septobasidium속에 의한 감 갈색고약병으로 명명하고자 제안한다.
This study was conducted to verify the availability of immature persimmon ethanol extract (IPEE) as a natural and functional ingredient in protecting inflammation and allergy of skin based on the mechanism. The major content analysis, antioxidant activities, anti-allergic activity, anti-inflammatory effect, and safety related to irritation of IPEE were evaluated. The gallic acid content per 10 mg/mL of IPEE was 0.522% (5.22 mg/g). The total polyphenol and flavonoid contents were 428.3 mg/g and 31.1 mg/g, respectively. In ABTS+ activity, DPPH ability and SOD-like activity, it showed a concentration-dependent increase, which indicated IPEE has excellent antioxidant activities. As for the anti-allergy test in RBL-2H3 cells, the IPEE showed a decrease in β-hexosaminidase secretion as the concentration increases, and IPEE tended to decrease IL-4 secretion in all RBL-2H3 cells compared to the IgE + HSA group. IPEE showed good anti-inflammatory effect in RAW 264.7 cells by decrease of NO production and inflammation cytokines (TNF-α and IL-6). Also IPEE showed non-irritant in BCOP assay. By the results of this study, the IPEE containing high tannins, had good antioxidant, anti-allergic, and anti-inflammatory effects, which indicated that the immature persimmon is considered to be a useful for the development of related functional ingredients.
This study has been conducted to investigate the developmental changes of cambial initials and their derivatives in relation to the growing girth of tree in Diosypros kaki and Firmiana simplex. In D. Kaki and F. simplex with typical storeyed cambium, increase in the girth of camium occurred by radial anticlinal division in general, however occasionally the increase was companied by pseudotransverse division. The length of fusiform initials, vessel member, and sieve tube member remained relatively constant throughout the secondary growth but that of fiber showed general tendancy to increase with growing girth of tree. During the girth increase of tree, height and number of ray remained constant in D. kaki, however in F. simplex, height of ray markedly decreased while the number of ray per unit area more or less increased. The secondary ray was originated from the segmentation or division of the side or end of fusiform initials.
총 20개의 감 SSR primer set을 사용하여 완전단감(PCNA) 12품종, 불완전단감(PVNA) 13품종, 불완전 떫은감(PVA) 15품종, 완전 떫은감(PCA) 8품종 등, 총 48개 유전자원의 유전적 연관성을 분석하였다. 획득된 114개의 다형성 밴드를 이용하여 UPGMA 방식으로 유사도 및 집괴분석을 수행한 결과 48개 품종들은 크게 2개의 그룹(cluster)으로 나뉘어졌으며, 제 1 cluster는 다시 4개의 subcluster를 형성하였다. 이는 탈삽의 특성을 기준으로 분류한 품종군과 대체로 일치 함을 알 수 있고, 품종군간의 유연관계에 있어서는 완전단감군은 불완전 단감군과, 그리고 완전 떫은감은 불완전 떫은감군과 유연관계가 더욱 높은 것으로 관찰되었다. 평균 유사도의 값은 0.499였고 품종간 가장 높은 유사도 값(0.954)를 나타낸 것은 '청도반시'와 '함안반시'였고, 가장 낮은 유사도 값(0.192)를 나타낸 것은 '대마반'과 '애탕'이었다. 본 연구에 사용된 2SSR primer 들은 유럽 감품종으로부터 개발되어 보고되었지만, 일본 및 국내 품종의 연구에서도 효과적으로 사용될 수 있었고, 이들 마커들을 통해, 48개 품종 중 청도반시(Cheongdo-Bansi)와 경산반시(Gyeongsan-Bansi)를 제외한 모든 품종간 구별이 가능하였다. 이는 향후 신품종 개발시 품종보호를 위한 품종 특이적 마커로 효율적으로 사용될 수 있음을 보여준다.
저장 및 유통중인 과실이 약간 함몰되면서 부패되고 그위에 푸른곰팡이가 심하게 발생하였다. MEA배지에서 균총의 색깔은 처음 흰색에서 푸른색을 띄며 분생포자를 아주 많이 형성하였다. 분생포자의 모양은 타원형 또는 아구형이고 크기가 2.6${\sim}$3.8${\times}$2.4${\sim}$3.8 ${\mu}m$이었다. 분생포자병은 균사표면으로부터 형성되고, Stipes의 크기가 86${\sim}$320${\times}$2.8${\sim}$4.3 ${\mu}m$로 가늘고 길며, Rami의 크기가 7.5${\sim}$32.6${\times}$2.6${\sim}$4.2 ${\mu}m$, Ramuli의 크기가 12.4${\sim}$14.8${\times}$3.2${\sim}$3.8 ${\mu}m$, Matulae의 크기는 8.9${\sim}$13.6${\times}$2.8${\sim}$4.6 ${\mu}m$이고, Phialide는 침상이고 크기가 8.2${\sim}$12.4${\times}$2.3${\sim}$3.6 ${\mu}m$이었다. 균사생육적온은 $25^{\circ}C$였다. 분리된 병원균을 건전한 감에 접종한 결과 동일한 병원성을 나타내었다. 이상의 결과로 이 병을 Penicillium crustosum에 의한 감 푸른곰팡이 병으로 명명할 것을 제안한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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