An endoparasitoid wasp, Cotesia plutellae, has been used for a biological control agent against the diamondback moth, Plutellae xylostella. It has a symbiotic polydnavirus in their reproductive tract, which is required for its successful parasitization. Here, we measured a specific replication time of the polydnavirus during female development of C. plutellae. We, also, analyzed the reproductive potentials of female C. plutellae under mating or different host conditions. At $25^{\circ}C$, pupal C. plutellae began to develop adult tissues such as compound eyes and wings since day 2. At day 5, all adult tissues including antennae were developed and were ready to emerge. With polyclonal antibody raised against C. plutellae polydnavirus, an immunobloting could confirm virus replication at day 4 during pupal stage. Virus particles could be visualized by transmission electron microscope in the oviduct lumen of day 5 pupae. After adult eclosion, venom gland and ovarian calyx increased in size, though ovarioles did not. Mated females layed large number of eggs (over $60\%$) at first 4 days during their mean longevity of ca. 8 days at $25^{\circ}C$. Unmated females showed less active ovipositional behavior, where all the eggs developed into males. C. Plutellae parasitized both P. xylostella and fall webworm, Hyphantria cunea. However, C. Plutellae developed faster and showed higher successful paarasitization in P. xylostella than in H. cunea.
Pathogenicity of Korean entomopathogenic nematodes against local insect pests was different depending on strains or target-insect pests. Mortalities of diamondback moth, Plutella xylostella larvae were 51.8%, 77.8%, 96.3% or 100% in Hanrim Steinernema sp. and 50.0%, 74.1%, 96.3% or 98.1% in Hamyang Heterorhabditis sp. on filter paper when larvae were exposed to 3, 6, 12, or 24 nematodes per larva. Mortalities of them on kale leaves at the same concentration were 44.4%, 63.0%, 76.1%, or 94.5% in Hanrim Steinernema sp. and 79.7%, 81.6%, 94.4%, or 100% in Hamyang Heterorhabditis sp., respectively. In field test, control value of Hanrim Steinernema sp. was 72.0% and that of Hamyang Heterorhabditis sp. was 84.1% in 14 days when 300,000 nematodes were sprayed to each plot ($13.27\m^2$). Although mortalities of rice stem borer, Chilo suppressalis larvae showed no difference at high concentration, Hamyang Heterorhabditis sp. (47.3~100%) was more effective than Hanrim Steinernema sp. (34.3~83.3%) at low concentration, 50~200 nematodes/ml. When chestnut curculio, Curculio sikkimensis larvae were treated with Sancheong Steinernema sp. and Hamyang Heterorhabditis sp., respectively. When pellucid zygaenid, Pryeria sinica larvae were exposed to nematodes, Pocheon Steinernema sp. was effective ranging from 96.7% to 100% but mortalities of them were 63.3~76.7% in Dongrae Steinernema sp..
A solitary endoparasitoid, Cotesia plutellae, parasitizes diamondback moth, Plutellae xylostella. It has been suggested that its antennae are a major sensory organ to search host and recognize host developmental and other physiological condition during parasitization. This research was performed to understand the parasitic behavior of C. plutellae by analyzing sensory types and their numbers on the antennae using scanning electron microscope. There was no significant difference in antennal length in both male and female C. plutellae, in which both sexes had 16 flagellomeres. Three different types of sensilla (trichoid, seta, and placodea sensilla) were located mostly on flagella and analyzed in their density on the different antennomeres. Trichoid sensillum was the major sensory type and showed about 87% density among all sensilla. Both trichoid and placodea types of sensilla exhibited even numbers on all flagellomeres with some decrease at terminal segments. In contrast, seta form of sensilla showed drastic increase in its density at distal part after 9th flagellomere. When distal half of flagellomeres were cut off, the C. plutellae could not parasitize host larvae. Even when only four distal flagellomeres were removed, the parasitism showed only 30%. These results indicate that C. plutellae antennae are required for parasitism and suggest that seta form of sensilla may play significant roles in recognizing host for parasitization.
Kim, Yeongtae;Eom, Seonghyun;Park, Jiyeong;Kim, Yonggyun
Korean journal of applied entomology
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v.53
no.4
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pp.331-338
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2014
Cystatins (CSTs) are reversible and competitive inhibitors of C1A cysteine proteases, corresponding to papain-like cathepsins in plants and animals. A viral CST (CpBV-CST1) was identified from a polydnavirus, Cotesia plutellae bracovirus (CpBV). Our previous study indicated that a transient expression of CpBV-CST1 interfered with immune response and development of Plutella xylostella larvae. To directly demonstrate the protein function, this study produced a recombinant CpBV-CST1 protein (rCpBV-CST1) using bacterial expression system to determine its inhibitory activity against cysteine protease and to assess its physiological alteration in insect immune and development. The open reading frame of CpBV-CST1 encodes a polypeptide of 138 amino acids (${\approx}15kDa$). rCpBV-cystatin protein in BL21 STAR (DE3) competent cells containing a recombinant pGEX4T-3:CpBV-CST1 was over-expressed by 0.5 mM IPTG for 4 h. In biological activity assay, the purified rCpBV-CST1 showed a significant inhibition against papain activity. It inhibited a cellular immune response of hemocyte nodule formation in the beet armyworm, Spodoptera exigua. Moreover, its oral administration retarded larval development of the diamondback moth, Plutella xylostella in a dose-dependent manner. These results suggest that CpBV-CST1 may be applied to control insect pest populations.
Kim, Do-Ik;Kim, Seon-Gon;Ko, Suk-Ju;Kang, Beom-Ryong;Choi, Duck-Soo;Kim, Sang-Soo;Hwang, In-Cheon
Korean Journal of Organic Agriculture
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v.18
no.4
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pp.559-571
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2010
This study carried out to evaluate toxicology of Chrysanthemum cinerariaefolium and Melia azedarach against natural enemies in the laboratory, and the diamond backmoth, Plutella xylostella, on chinese cabbage. In the evaluation of the toxicity on predatory mite of phytoseiid Phytoseiulus persimilis, Hypoaspis aculeifer, Amblyseius cucumeris, A. wormersleyi, A. swirskii, the two plant extracts were classified into moderate selective toxicity as recommended by international organization of biocontrol (IOBC). The mummies parasitic natural enemies, Trichogramma evanescens, Aphidius ervi, Aphidius colemani, Eretmocerus eremicus, Encarsia formosa were found to be relatively safe to the plant extracts except Eretemocerus eremicus. In the field study for the control of diamondback moth, Plutella xylostella, single spray of C. cinerariefolium indicated that the control effect dropped from 21th days after the spraying. In the 3 times of spray with 7 says intervals, the mortality effect low at the beginning, but increased to 91.1 at 21 days after spraying. Single spray of M. azedarach showed a 96.7% mortality on P. xylostella at 14 days after spraying, and thereafter decreased. In the three times of spray with 7 days intervals of M. azedarach, the mortality of P. xylostella was 100% at 14 days and its effect was maintained to 28 days after treatment. Consequently, it was suggested that M. azedarach be sprayed before C. cinerariaefolium application.
Seo, Sam-Yeol;Ahn, Haet-Nim;Eom, Seong-Hyeon;Im, Eun-Yeong;Park, Ji-Young;Kim, Yong-Gyun
Korean journal of applied entomology
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v.51
no.1
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pp.39-45
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2012
The entomopathogenic bacterium, $Xenorhabdus$ sp., was isolated from an entomopathogenic nematode, $Steinernema$$monticolum$. When these bacteria were injected into the hemocoel of the diamondback moth, $Plutella$$xylostella$, they caused significant mortality. However, the bacterium was not pathogenic when it was administered orally. This study showed that $Xenorhabdus$ sp. significantly enhanced oral pathogenicity of $Bacillus$$thuringiensis$ (Bt) against the last instar larvae of $P.$$xylostella$. Different ratios of culture broth of $Xenorhabdus$ sp. and Bt showed significantly different pathogenicities against $P.$$xylostella$. In field tests, the optimal bacterial mixture significantly enhanced control efficacy against $P.$$xylostella$ compared to Bt treatment alone. These results demonstrated that $Xenorhabdus$ sp. culture broth can be developed as a potent biopesticide by enhancing the insecticidal efficacy of Bt.
Kim, A-Young;Kwon, Deok Ho;Jeong, In Hong;Thuc, Ahn Phan;Tran, Vi Ngan;Lee, Si Hyeock;Koh, Young Ho
Korean journal of applied entomology
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v.55
no.4
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pp.413-419
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2016
Ryanodine receptors (RyRs) regulate the contractions of insect muscles by altering intracellular $Ca^{2+}$ concentration and are the targets of chlorantraniliprole. Recently, a chlorantraniliprole-resistant strain was reported in the diamondback moth Plutella xylostella by obtaining point mutations on the RyRs. In the present study, we established two resistant strains from Drosophila melanogaster, which were treated with low or high concentrations of chlorantraniliprole, and their resistance levels were determined on the basis of contact and ingestion toxicities. Compared with the control strain, the two resistant strains did not show any significant differences in contact toxicity. However, they showed significantly increased resistance ratios in ingestion toxicity than that by the control strain. The low and high concentration resistant strains exhibited 2.1- and 8.1-fold increased resistance ratios, respectively, compared with that by the control strain. Moreover, we found that the resistant strains had altered expression levels of RyRs and more enhanced Acetylcholinesterase and Glutathione-S-transferase activities than that by the non-selected strain. These results suggested that the resistance development of chlorantraniliprole in the two strains might be mediated by the activation of detoxification pathways in D. melanogaster.
These studies were conducted to investigate overwintering forms and adult population fluctuation in field condition, and life cycle in field-cage condition of diamondback moth, Plutella xylostella (L.). Plutella xylostella overwintered as all the stages of eggs, larvae, pupae and adults in southern region of Korea. The occurrence which adult moths were attracted by light trap at 5-day intervals, reached their peaks in May, mid-June to mid-July, and late September to early November, and fell in late July to mid-September. Under field-cage condition, they occurred 10-11 generations a year and the period of adult emergence from egg was 11-18 days in July and August, 19-23 days in June and September, 28-34 days in April, May and October, and about 50-100 days in other months. And the longevities of adults were 4-11 days in summer, 7-17 days in spring and fall. A number of eggs laid by individual female ranged from 50 to 240. The females laid more eggs in spring and fall than they did in summer. The period of developmental stages under field-cage conditions was 2-3 days for eggs, 7-8 days for larvae and 4-6 days for pupae in July and August; 4-5 days for eggs, 3-12 days for larvae and 6-8 days for pupae in June and September; 6-18 days for eggs, 13-20 days for larvae and 8-14 days for pupae in March, April, May and October; and 12-40 days for eggs, 50-100 days for larvae, and about 20 days for pupae in winter.
Seo, Sam-Yeol;Jang, Ho-Jin;Kim, Kun-Woo;Kim, Yong-Gyun
Korean journal of applied entomology
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v.49
no.4
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pp.409-416
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2010
An entomopathogenic bacterium, Photorhabdus temperata ssp. temperata (Ptt), suppresses insect immune responses and facilitates its symbiotic nematode development in target insects. The immunosuppressive activity of Ptt enhances pathogenicity of various microbial pesticides including Bacillus thuringiensis (Bt). This study was performed to select a cheap and efficient bacterial culture medium for large scale culturing of the bacteria. Relatively cheap industrial bacterial culture media (MY and M2) were compared to two research media, Luria-Bertani (LB) and tryptic soy broth (TSB). In all tested media, a constant initial population of Ptt multiplied and reached a stationary phase at 48 h. However, more bacterial colony densities were detected in LB and TSB at the stationary phase compared to two industrial media. All bacterial culture broth gave significant synergism to Bt pathogenicity against third instars of the diamondback moth, Plutella xylostella. Production of bacterial metabolites extracted by either hexane or ethyl acetate did not show any significant difference in total mass among four culture media. Reverse phase HPLC separated the four bacterial metabolites, which were not much different in quantities among four bacterial culture broths. This study suggests that two industrial bacterial culture media can be used to economically culture Ptt in a large scale.
A microbial insecticide "Bt-Plus" has been developed to enhance an insecticidal efficacy of an entomopathogenic bacterium, Bacillus thuringiensis (Bt). However, its wettable powder formulation is not preferred by farmers and industry producers due to relatively high cost. This study aimed to develop a soluble concentrate formulation of Bt-Plus. To this end, an optimal mixture ratio of two bacterial culture broths was determined to be 5:4 (v/v) of Bt and Xenorhabdus nematophila (Xn) along with 10% ethanol preservative. In addition, Bt broth was concentrated by 10 times to apply the mixture at 1,000 times fold dilution. The resulting liquid formulation was sprayed on cabbage crop field infested by late instar larvae of the diamondback moth, Plutella xylostella. The field assay showed about 77% control efficacy at 7 days after treatment, which was comparable to those of current commercial biopesticides targeting P. xylostella. For storage test in both low and room temperatures, the liquid formation showed a relatively stable control efficacy at least for a month. To develop a quality control technique to exhibit a stable control efficacy of Bt-Plus, Bt spore density ($5{\times}10^{11}$ spores/mL) and eight active component concentrations of Xn bacterial metabolites in the formulation products have been proposed in this study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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