본 연구는 후추출물, 클로브버드, 로즈마리 및 오리가늄오일의 친환경 살충소재의 활용가능성을 탐색하고자 급성경구독성, 급성경피독성, 피부자극성 및 안점막자극성시험을 수행하였다. 랫드를 이용한 급성경구독성시험결과 후추추출물, 클로브버드, 로즈마리 및 오리가늄오일의 $LD_{50}$은 2,000 mg/kg bw이상이었고, 급성경피독성시험결과 모든 사험물질의 $LD_{50}$이 4,000 mg/kg bw으로 나타났다. 피부자극성시험결과 후추추출물, 클로브버드 및 로즈마리오일은 자극성이 없었고, 오리가늄오일은 중도의 자극성을 나타냈다. 안점막자극성시험결과 후추추출물과 로즈마리오일은 자극성이 없고, 클로브버드오일은 경도의 자극성을 나타냈으며, 오리가늄오일은 중도의 자극성을 나타냈다. 따라서, 후추와 로즈마리오열은 독성이 낮았으나, 클로브버드오일은 경도의 안점막자극성을 갖고, 오리가늄오일은 중도의 피부자극성과 안점막자극성이 있는 것으로 구분되었다.
Kim, Kwang-Mi;Noh, Min-Soo;Kim, Soo-Hyun;Park, Mi-Kyung;Lee, Hye-Ja;Kim, Soo-Youl;Lee, Chang-Hoon
Biomolecules & Therapeutics
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제18권1호
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pp.71-76
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2010
Skin irritation caused by retinol and retinoic acid results in mild erythema called as retinoid dermatitis. To develop compounds modulating the retinoid dermatitis, we tried to establish the screening method for retinoid dermatitis. At first we examined the inflammatory cytokine profile in neonatal human dermal fibroblasts which are known to be one of main site of retinoid action. As a result, interleukin-8 (IL-8) and monocytes chemoattractant protein-1 (MCP-1) were significantly produced by all trans retinoic acid (ATRA) and all trans retinol (ATROL) in dermal fibroblasts. Especially the production of MCP-1 was more than that of IL-8. The production of MCP-1 by retinoid was dose-dependently increased, continuing up to 24 hrs. After then using ethacrynic acid (ECA) known to reduce mouse ear edema induced by ATRA, we checked whether ECA suppressed the production of MCP-1. As a result, ECA effectively suppressed the production of MCP-1 in the ATRA- or ATROL-treated-fibroblasts. These results suggested that screening method effectively reflects the in vivo anti-inflammatory activity of ECA. It was reported that citral inhibited the enzyme involved in the conversion of ATROL to ATRA. We showed that citral suppressed the production of MCP-1 in ATROL-treated fibroblasts. We expect these finding might be helpful to find useful compounds modulating the side effects of retinoid or retinoid dermatitis.
Objectives: In this study, we analyze statistics on industrial accidents caused by chemical skin contact and provide skin toxicity hazard information on the related domestic system and circulation volumes. Methods and Results: We analyzed occupational fatalities and skin diseases caused by chemical leaks and contact from 2007 to 2016(10 years) and surveyed data on occupational skin diseases using the 2014 work environment survey data. The NIOSH Skin Notation Profiles for 57 chemical substances, which are provided to prevent occupational skin diseases, were searched and hazard information on skin contact with chemical substances was classified. In order to identify skin toxicity information among domestically distributed and legally regulated substances and to investigate skin-toxic substances, MSDS basic data on 19,740 chemical substances provided on the homepage of Korea Occupational Safety & Health Agency were searched. Acute toxicity(dermal) category 1-4 substances totaled 1,020, and the number of chemical substances classified as category 1 and 2 substances were 135 and 137, respectively. In the chemical substances prescribed by the Ministry of Employment and Labor, 173 substances were classified into acute toxicity(dermal) categories 1-4, 58 of which correspond to category 1 or 2. Conclusions: Within the present range of industrial accidents, the proportion of skin diseases due to contact with chemicals is not high. However, there is always a risk of occupational skin diseases due to increasing chemicals and due to the use of new chemicals. It is hoped that this information will be used by workplace safety and health officials and health and safety experts to prevent acute toxity(dermal) due to chemical skin contact.
A novel retinol derivative, polyethoxylated retinamide (Medimin A) was synthesized, as an anti-aging agent. Collagen synthesis, skin permeation, stability, and toxicity of Medimin A were evaluated and compared with those of retinol and retinyl palmitate. In vitro collagen synthesis was evaluated by quantitative assay of [$^3H$]-proline incorporation into collagenase sensitive protein in fibroblast cultures. For in vitro skin permeation experiments, Franz diffusion cells (effective diffusion area: $1, 766{\;}\textrm{cm}^2$) and the excised skin of female hairless mouse aged 8 weeks were used The stabilities of retlnoids were evaluated at two different temperature ($25{\;}^{\circ}C$ and $40{\;}^{\circ}C$) and under UV in solubilized state and in OW emulsion. To estimate the safety, acute oral toxicity, acute dermal toxicity, primary skin irritation, acute eye irritation and human patch test were performed The effect of Medimin A on collagen synthesis was similar to that of retinol. The skin permeability of Medimin A was higher than those of retinol and retinyl palmitate. The Medimin A was more stable than retinol and retinyl palmitate. Medimin A was nontoxic in various toxicological tests. These results suggest that Medimin A would be a good anti-aging agent for enhancing bioavailability and stability.
It has been indicated that problems associated with insulin iontophoresis are low bioavailability, slow absorption rate and the use of high dosage. Pretreatment of skin as a method of solving these problems was used in alloxan-induced diabetic white rabbits. Skins were treated with skin needle, electric razor, knife razor and scotch tape. Transport data shows that insulin delivery was enhanced significantly by the treatment which disrupt the barrier properties of stratum corneum. The data also shows that insulin absorption lasted for several hours after the cessation of iontophoresis. The degree of skin treatment was estimated by measuring the electrical resistance of skin. When the skins were treated with skin needle and electric razor, the standard deviations of resistance were small, which suggests the possibility of uniform delivery of insulin. The dermal responses after the invasive delivery were evaluated in accordance with OECD Guideline. It seems that electrical resistance of the skin correlate well with the dermal irritation.
Cytotoxicity assays using artificial skins have been proposed as in vitro alternatives to minimize animal ocular and dermal irritation testing. Accordingly, the responses of artificial skins to the well-characterized chemical irritants toluene, glutaraldehyde, and sodium lauryl sulfate (SLS), and the nonirritant polyethylene glycol were studied. The evaluation of the irritating and non-irritating test chemicals was also compared with the responses observed in human dermal fibroblasts and human epidermal keratinocytes grown in a monolayer culture. The responses monitored included an MTT mitochondrial functionality assay. In order to better understand the local mechanisms involved in skin damage and repair, the production of several mitogenic proinflammatory mediators, interleukin-l$\alpha$, 12-HETE, and 15-HETE, was also investigated. Dose-dependent increases in the levels of かIn and the HETEs were observed in the underlying medium of the skin systems exposed to the two skin irritants, glutaraldehyde and SLS. The results of the present study show that both human artificial skins can be used as efficient in vitro testing models for the evaluation of skin toxicity and for screening contact skin irritancy.
국내 문화재 생물피해 방제는 농약에서 유래한 화학적 약제를 사용하여 왔다. 그러나 인체와 환경에 대한 유해성 문제로 인하여 사용이 점차 제한되고 있으며, 새로운 방제약제의 탐색과 안전성 연구에 대한 관심이 지속적으로 증가되고 있다. 개발된 천연 생물방제제의 안전성은 동물실험을 통한 독성평가로 확인하고 있으며, 치사량과 자극성 평가를 위하여 경구독성, 경피독성, 안점막자극 및 피부자극 시험법을 이용하여 안전성을 평가한다. 독성평가를 위해 실험용 쥐와 토끼를 이용하며, 쥐에 대해 단회 경구독성과 경피독성 시험을 실시하고, 토끼에 대해 안점막자극시험 및 피부자극 시험을 시행한다. 본 시험에 이용한 천연 생물방제물질은 목재부후균과 흰개미에 대한 항진균활성 및 살충활성이 조사된 족두리풀 추출물을 적용하였다. 쥐에 대한 단회 경구투여한 결과 $LD_{50}$ 값이 수컷 4,000 mg/kg 이상, 암컷 2,000 mg/kg 이상으로 판정되었으며, 단회 경피 투여한 결과 $LD_{50}$ 값이 암수 모두 10,000 mg/kg 이상으로 판정되었다. 토끼의 눈에 대한 자극시험에서는 무자극성으로 판정되었으며, 피부에 대해서는 약한 자극성이 있는 물질로 판단되었다. 본 연구를 통해 천연 생물방제물질인 족두리풀 추출물의 안전성을 동물실험으로 확인함으로써 화학 물질의 안전성 검증을 위한 기본적인 유해성 평가 방법으로 제시하고자 한다.
The stimulatory effect of recombinant human basic fibroblast growth factor (bFGF) on wound healing was evaluated in healing-impaired animal models. Full-thickness wounds were made in prednisolone-treated mice, streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats and mitomycin C (MMC)-treated rats. Saline or bFGF at a dose of 1, 5, or $25\mu\textrm{g}$ per wound was applied to the open wound once a day for three to five days. The degree of wound healing was assessed using wound size and histological parameters such as degree of epidermal and dermal regeneration. Local application of bFGF accelerated wound closure significantly in a dose-dependent manner in all healing-impaired wounds (p<0.05). The wound healing effect of bFGF was further confirmed by histological examination in MMC-treated rats. Epidermal and dermal regeneration were enhanced in bFGF-treated wounds with a dose-related response. Dermal regeneration parameters such as collagen matrix formation and angiogenesis were significantly increased in $5\mu\textrm{g}$, or $\25mu\textrm{g}$ of bFGF-treated wounds when compared to saline-treated wounds (p<0.05). pectin immunostaining on day 8 for vascular endothelium showed an increased number of neovessels in bFGF-treated wounds. These results suggest that topical application of bFGF has beneficial effects on wound healing by angiogenesis and granulation tissue formation in healing-impaired wounds.
단회경구독성시험에서 미더덕 및 멍게 유래 crude콘드로이틴황산의 LD$_{50}$는 2g/kg 이상으로서 판명되어, 단회경구독성 측면에서 는 안전한 원료로 판단되었다. 비록 기니픽을 이용한 감작성시험은 미더덕 유래 crude 콘드로이틴황산만을 사용하여 실시하였고, 시험 농도는 GAGs의 임상 사용 예정량이 0.03∼0.15%임을 고려하여 inductiuon 농도는 임상사용 예정량의 10배인 3.0%, challenge 적용 농도를 0.3% 이하로 잠정 설정하여 3.0%, 0.3%, 0.03%농도에서 실시하였다. 그 결과 0.03% 및 0.15% 농도에서는 반응을 나타낸 개체가 없었으나, 양성대조군과 비교할 때 0.3% 농도에서는 24시간 후에는 10% 그리고 48시간 후에는 5%의 반응율을 나타냈지만 사용가능범위에 해당되어 미더덕의 GAGs은 감작성 측면에서 안전성이 높은 원료로 0.3%이하 농도에서는 사용 가능하다고 판단되었다. 토끼를 이용한 안점막 자극시험에서는 미더덕과 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산 및 bovine trachea 콘드로이틴황산의 3.0% 적용 시 모두 A.O.I.가 기준치 이하로 나타나 실제 사용 시 눈에 자극성이 없음이 판명되었다. 토끼를 이용한 피부일차자극 시험에서는 미더덕 및 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산을 3.0% 및 1.5%는 무자극을 보였지만, 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산에서는 미약하게 보이던 피부반응이 미더덕 유래 crude 콘드로이틴황산에서는 3.0% 적용에서 다소 강한 반응을 보였다. 광독성 및 광감작성을 위한 UV 흡광 실험결과 미더덕 및 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산과 대조군으로서 사용한 표품 콘드로이틴황산 모두 자외선영역(280∼420 nm)에서 흡광을 보이지 않아서 광독성 및 광감작성 시험을 시행하지 않았다. 실험동물을 사용하여 조사한 결과 화장품 원료로서의 미더덕 및 멍게 유래 crude 콘드로이틴황산은 3.0% 이내에서는 사용이 안전함이 증명되었고, 멍게가 미더덕 유래의 콘드로이틴황산에 비교하여 생체반응에 나은 것으로 나타났다.다.
파슬리추출물이 피부에 미치는 개선효과를 조사하기 위하여, 배양 인체 섬유아세포에서 total Collagen, type I procollagen을 각질형성세포주인 HaCaT 세포에서 prostaglandin E$_2$(PGE$_2$), interleukin l$\alpha$ (IL-l$\alpha$)와 tumor necrosis factor $\alpha$ (TNF$\alpha$)를 무모생쥐(Female albino hairless mice, Skh:hr-1)에서는 진피의 두께와 밀도를 측정하였다. 그 결과, 1 $\mu\textrm{g}$/mL 농도의 파슬리 추출물은 total collagen은 23%, type I procollagen은 18% 증가시켰고, 자외선 B에 의한 PGE$_2$의 생합성은 약 60% 정도 감소시켰다. 10uM RA, 100 $\mu\textrm{g}$/mL SLS와 자외선 B 30 mJ/$\textrm{cm}^2$로 조사했을 때, IL-1$\alpha$ 및 TNF $\alpha$의 생합성 역시 1 $\mu\textrm{g}$/mL 파슬리추출물 처리 시 감소되었다. 4일 동안 1% 파슬리추출물로 폐쇄첩포한 무모생쥐의 진피 두께는 대조군에 비해 약 1.5배 정도 두꺼워지고, 밀도도 훨씬 촘촘해졌다. 본 연구의 결과는 파슬리추출물이 피부에서 노화방지 효과 및 자극완화 효과가 있음을 시사하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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