The cyclic AMP (cAMP) pathway plays a major role in growth, sexual differentiation, and virulence factor synthesis of pathogenic fungi. In Cryptococcus neoformans, perturbation of the cAMP pathway, such as a deletion in the gene encoding adenylyl cyclase (CAC1), causes defects in the production of virulence factors, including capsule and melanin production, as well as mating. Previously, we performed a comparative transcriptome analysis of the Ras- and cAMP- pathway mutants, which revealed 163 potential cAMP-regulated genes (38 genes at a 2-fold cutoff). The present study characterized the role of one of the cAMP pathway-dependent genes (serotype A identification number CNAG_ 06576.2). The expression patterns were confirmed by Northern blot analysis and the gene was designated cAMP-regulated gene 1 (CAR1). Interestingly, deletion of CAR1 did not affect biosynthesis of any virulence factors and the mating process, unlike the cAMP-signaling deficient cac1$\Delta$ mutant. Furthermore, the car1$\Delta$ mutant exhibited wild-type levels of the stress-response phenotype against diverse environmental cues, indicating that Car1, albeit regulated by the cAMP-pathway, is not essential to confer a cAMP-dependent phenotype in C. neoformans.
Park, Se-Hoon;Choi, Jaydo;Kang, Ju-Il;Choi, Sang-Yun;Hwang, Soon-Bong;Kim, Jungsuh P.;Ahn, Byung-Yoon
Molecules and Cells
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제21권1호
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pp.21-28
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2006
The interferon-induced, double-stranded RNA (dsRNA)-dependent protein kinase PKR plays a key role in interferon-mediated host defense against viral infection, and is implicated in cellular transformation and apoptosis. We have isolated a cDNA of simian PKR encoding a product with 83% amino acid identity to the human homolog and showed that PKR expression is significantly attenuated in the Vero E6 African green monkey kidney cells devoid of type I interferon genes. A variant form of PKR lacking the exon 12 in the kinase domain is produced in these cells, presumably from an alternatively spliced transcript. Unlike wild type PKR, the variant protein named PKR-${\Delta}E12$ is incapable of auto-phosphorylation and phosphorylation of eIF2-${\alpha}$, indicating that the kinase sub-domains III and IV embedded in exon 12 are indispensable for catalytic function. PKR-${\Delta}E12$ had no dominant negative effect but was weakly phosphorylated in trans by wild type PKR.
Yu, Sung-Lim;Lim, Hyun-Sook;Kang, Mi-Sun;Kim, Mai Huynh;Kang, Dong-Chul;Lee, Sung-Keun
Molecular & Cellular Toxicology
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제4권4호
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pp.338-347
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2008
Yeast RAD2, a yeast homolog of human XPG gene, is an essential element of nucleotide excision repair (NER), and its deletion confers UV sensitivity and NER deficiency. 6-Azauracil (6AU) sensitivity of certain rad2 mutants revealed that RAD2 has transcription elongation function. However, the fundamental mechanism by which the rad2 mutations confer 6AU sensitivity was not clearly elucidated yet. Using an insertional mutagenesis, PUF4 gene encoding a yeast pumilio protein was identified as a deletion suppressor of rad2${\Delta}$ 6AU sensitivity. Microarray analysis followed by confirmatory RT-qPCR disclosed that RAD2 and PUF4 regulated expression of HPT1 and URA3. Overexpression of HPT1 and URA3 rescued the 6AU sensitivity of rad2${\Delta}$ and puf4${\Delta}$ mutants. These results indicate that 6AU sensitivity of rad2 mutants is in part ascribed to impaired expression regulation of genes in the nucleotide metabolism. Based on the results, the possible connection between impaired transcription elongation function of RAD2/XPG and Cockayne syndrome via PUF4 is discussed.
Vegetative growth signaling of the opportunistic human pathogenic fungus Aspergillus fumigatus is mediated by GpaA ($G{\alpha}$). FlbA is a regulator of G protein signaling, which attenuates GpaA-mediated growth signaling in this fungus. The flbA deletion (${\Delta}flbA$) and the constitutively active GpaA ($GpaA^{Q204L}$) mutants exhibit enhanced proliferation, precocious autolysis, and reduced asexual sporulation. In this study, we demonstrate that both mutants also show enhanced tolerance against $H_2O_2$ and their radial growth was approximately 1.6 fold higher than that of wild type (WT) in medium with 10 mM $H_2O_2$. We performed quantitative PCR (qRT-PCR) for examination of mRNA levels of three catalase encoding genes (catA, cat1, and cat2) in WT and the two mutants. According to the results, while levels of spore-specific catA mRNA were comparable among the three strains, cat1 and cat2 mRNA levels were significantly higher in the two mutants than in WT. In particular, the ${\Delta}flbA$ mutant showed significantly enhanced and prolonged expression of cat1 and precocious expression of cat2. In accordance with this result, activity of the Cat1 protein in the ${\Delta}flbA$ mutant was higher than that of $gpaA^{Q204L}$ and WT strains. For activity of the Cat2 protein, both mutants began to show enhanced activity at 48 and 72 hr of growth compared to WT. These results lead to the conclusion that GpaA activates expression and activity of cat1 and cat2, whereas FlbA plays an antagonistic role in control of catalases, leading to balanced responses to neutralizing the toxicity of reactive oxygen species.
The clpks18 gene was first cloned and identified in Curvularia lunata. It contains 6571 base pairs (bp) and an 6276 bp open reading frame encoding 2091 amino acids. The ClPKS18 deletion mutant displayed an albino phenotype, and almost lost the ability to product 5-(hydroxymethyl) furan-2-carboxylate (M5HF2C) toxin, implying that clpks18 gene in C. lunata is not only involved in 1,8-dihydroxynaphthalene melanin synthesis, but also relatively associated with M5HF2C toxin biosynthesis of the pathogen. The pathogenicity assays revealed that ${\Delta}ClPKS18$ was impaired in colonizing the maize leaves, which corresponds to the finding that ClPKS18 controls the production of melanin and M5HF2C in C. lunata. Results indicate that ClPKS18 plays a vital role in regulating pathogenicity of in C. lunata.
최근들어 화상 정보처리 분야가 점진적으로 중요시 됨에따라 본논문에서는 정부기관, 경찰서 등의 범죄관련 기관에서 신분 확인용 및 범인 검거용으로 지문을 인식하는데 사용되는 특징점 추출에 관해 기술하였다. 전개과정은 퍼지 이론을 이용하여 세선화를 수행한후 그 화상을 일정 크기의 정사각형 크기로 나누고 8 방향 코드로 부호화한 자료로부터 코아와 델타를 추출하였다. 그 수행결과 $80\%$정도는 정확히 특징점을 추출할 수 있다.
본 논문에서는 VVC(Versatile Video Coding) 부호화 시간 감소를 위해 ISP(Intra Sub-Partition) 모드의 복잡도를 감소시키는 방법을 제안한다. 이 방법은 ISP 모드 적용을 위한 RDO(Rate-Distortion Optimization) 탐색을 수행할 때 현재 블록의 모양에 따라 특정 ISP 모드 방향을 사전에 제한하여 RDO 과정을 생략함으로써 부호화 시간을 단축한다. 실험 결과, 기존 VVC 방법 대비 BDBR(Bjøntegaard Delta Bit Rate) 측면에서 AI(All Intra) 구성하에 Y 채널에서 0.01%, Cb, Cr 채널에서 각각 -0.04%, -0.08% 변화로 2%의 부호화 시간 감소의 결과를 얻을 수 있었다.
한국미생물학회 2005년도 International Meeting of the Microbiological Society of Korea
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pp.159-161
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2005
Hypovirus infection of the chestnut blight fungus Cryphonectria parasitica is a useful model system to study the hypoviral regulation of fungal gene expression. The hypovirus is known to downregulate the fungal laccase1 (lac 1), the modulation of which is tightly governed by the inositol triphosphate ($IP_3$) and calcium second messenger system in a virus-free strain. We cloned the gene cplc1 encoding a phosphatidyl inositol-specific phospholipase C (PLC), in order to better characterize the fungal gene regulation by hypovirus. Sequence analysis of the cplc1 gene indicated that the protein product contained both the X and Y domains, which are the two conserved regions found in all known PLCs, with a 133 amino acid extension between the 2nd ${\beta}$-strand and the ${\alpha}$-helix in the X domain. In addition, the gene organization appeared to be highly similar to that of a ${\delta}$ type PLC. Disruption of the cplc1 gene resulted in slow growth and produced colonies characterized by little aerial mycelia and deep orange in color. In addition, down regulation of lac1 expression was observed. However, temperature sensitivity, osmosensitivity, virulence, and other hypovirulence-associated characteristics did not differ from the wild-type strain. Functional complementation of the cplc1-null mutant with the PLC1 gene from Saccharomyces cerevisiae restored lac1 expression, which suggests that the cloned gene encodes PLC activity. The present study indicates that the cplc1 gene is required for appropriate mycelial growth, and that it regulates the lac1 expression, which is also modulated by the hypovirus. Although several PLC genes have been identified in various simple eukaryotic organisms, the deletion analysis of the cplc1 gene in this study appears to be the first report on the functional analysis of PLC in filamentous fungi.
차세대 비디오 부호화 표준으로 진행중인 VVC(Versatile Video Coding)는 HEVC(High Efficiency Video Coding)보다 두 배 이상의 압축 성능을 달성하기 위해 다양한 기술들을 채택하고 있다. 최근 배포된 VVC 참조 SW 코덱인 VTM(VVC Test Model)은 HEVC 대비 38% 이상의 BD-rate 부호화 성능 향상을 보이는 반면 부호화와 복호화 복잡도가 각각 9배, 2배 정도 증가를 보인다. 특히, 재귀적 MTT(Multi-Type Tree) 분할 구조와 HEVC 대비 2배로 증가한 화면내 예측모드 수로 인해 상당한 부호화기의 복잡도가 증가하였으며, 이를 감소시키기 위한 다양한 기법들이 연구되고 있다. 본 논문에서는 부호화기의 복잡도를 감소시키기 위하여 블록내 화소의 기울기를 이용한 고속 화면내 예측모드 결정 및 블록분할 기법을 제시한다. 실험결과 VTM6.0 대비 AI(All Intra) 부호화 구조에서 3.54%의 부호화 성능 감소와 65%의 부호화 시간 절감 효과를 얻었다.
The chromosomal sprD gene encoding Streptomyces griseus protease D (SGPD), a chymotrypsin-like protease, was disrupted in Streptomyces griseus by insertion of the neomysin-resistance gene. The production of chymotrypsin activity of sprD disruptant was not completely abolished, but delayed by 24 h, compared with that of wild-type strain. The aerial mycelial formation of sprD disruptant was retarded, and specifically the formation of spores was not observed in the central region of colonies. However, normal morphological development into spores was observed in the marginal region of colonies. In addition, the production of yellow pigment that might be dependent on A-factor was also decreased in the sprD disruptant, compared with that of the wild-type strain. Introduction of the sprD gene, which was placed on a high copy-numbered plasmid into S. griseus ${\Delta}sprD$, partially restored the ability of morphological development, and a significant level of sporulation was observed. When the overexpression vector for sprD, pWHM3-D, was introduced in S. griseus, there was no significant change in the chymotrypsin activity or colonial morphology, in contrast to Streptomyces lividans, indicating the presence of a tight regulation system for the overexpression of the sprD gene in S. griseus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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