생쥐 난소에서 glucosamine-6-phosphate deaminase (GNPDA)의 발현을 조사하였다. Western blot상에서 Mr. 31 kDa의 항원을 검출하였으며 출생 후2주에 급격한 발현의 증가가 확인되었다. 난소절편의 면역염색 결과 협막세포와 간충조직에서는 균질한 발현을 보인 반면 난포내 발현양상은 난포의 발달에 따라 다르게 나타났다. 일부 1차 난포의 난자에서 GNPDA의 발현이 관찰되었으나 강소형성 난포의 난자에서는 관찰되지 않았다. 황체화 과립세포에서의 발현은 황체발달에 따라 증가하였으며 황체퇴화 부위에서 강한 신호가 검출되었다. 난포발달에 따른 GNPDA발현의 차이는 GNPDA가 생쥐 난소 조직 재구성에 관여하고 있음을 암시한다.
A cDNA of 1.1 kb comprising the gene encoding the peroxiredoxin of Toxo-plasma gondii(TgPrx) has been cloned. The open reading frame of 591 Up was translated into a protein of 196 amino acids with a molecular mass of 25 kDa. Conserved 2 cysteine domains of Phe-Val-Cys-Pro and Glu-Val-Cys-Pro indicated TgPrx belonged to 2-Cys Prx families. TgPrx showed the highest homology with that of Arabidopsis thaliana by 53.9% followed by Entamoeba histolytica with 39.5% by the amino acid sequence alignment. Polyclonal antibody against recombinant TgPrx detected 25 kDa band in T. gondii without binding to host cell proteins TgPrx was located in the cytoplasm of T. gondii extracellularly or intracellularly by immunofluorescence assay. The expression of TgPrx was increased as early as 30 min after the treatment with artemisinin in the intracellular stage, while no changes in those of host Prx I and TgSOD. This result implies that TgPrx may function as an antioxidant protecting the cell from the attack of reactive oxygen intermediates. It is also suggested that TgPrx is a possible target of chemotherapy.
We studied the cardio-respiratory properties in the Japanese amberjack (Seriola quinqueradiata) during acute hypoxia exposure. Fish were exposed to three levels of hypoxia (80, 60 or 50 mmHg) for 60 min at $25^{\circ}C$. Cardiovascular parameters (cardiac output; Q, heart rate; HR, stroke volume; SV, blood pressure; $P_{DA}$) changed little from pre-exposure values during both 80 and 60 mmHg of hypoxia. During 50 mmHg of hypoxia, the fish showed a bradycardia which significantly affected Q, whereas no change in SV. $P_{DA}$ increased transiently. Arterial oxygen partial pressure ($PaO_2$) immediately reduced along with a decrease of the water oxygen partial pressure ($P_WO_2$). Arterial $O_2$ content ($CaO_2$) decreased significantly only after 60 min of 50 mmHg of hypoxia. Arterial pH (pHa) and hematocrit value (Hct) did not change significantly. Comparing the effects of different levels of hypoxia, oxygen delivery to the tissues ($Q\;{\times}\;CaO_2$) should be maintained a constant over a broad range of $P_WO_2$, however, severely depressed below 50 mmHg of hypoxia.
Tran, Sinh Thi;Le, Dung Tien;Kim, Young-Chang;Shin, Malshik;Choi, Jung-Do
BMB Reports
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제42권3호
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pp.172-177
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2009
Phosphoglucose isomerase (PGI) is involved in synthesizing extracellular polysaccharide (EPS). The gene encoding PGI in Sphingomonas chungbukensis DJ77 was cloned and expressed in E. coli, and the protein was characterized. The pgi gene from DJ77 is 1,503 nucleotides long with 62% GC content and the deduced amino acid sequence shows strong homology with PGIs from other sources. The molecular masses of PGI subunit and native form were estimated to be 50 kDa and 97 kDa, respectively. Four potentially important residues (H361, R245, E330 and K472) were identified by homology modeling. The mutations, H361A, R245A, E330A, R245K and E330D resulted in decrease in Vmax by hundreds fold, however no significant change in Km was observed. These data suggest that the three residues (H361, R245Aand E330) are likely located in the active site and the size as well as the spatial position of side chains of R245 and E330 are crucial for catalysis.
Inoculation with the compatible strain Ds 1 of Xanthomonas campestris pv. vesicatoria caused brownish ad water-soaked lesions, but incompatible strain Bv5-4a produced hypersensitive symptoms with local necrosis on tomato (cv. Kwangyang) leaves. Bacterial populations of the compatible strains Ds 1 propagated more greatly than the incompatible strain Bv5-4a at the frist onset, but no differences were observed 5 days after inoculation. The bacterial infection induced the synthesis and accumulation of soluble proteins in tomato leaves, especially in the incompatible interaction. Native-polyacrylamide gel electrophoresis distinguished the soluble proteins in the tomato leaves infected by the compatible or incompatible strains. A protein of low molecular weight occurred only in the incompatible interaction. Some pathogenesis-related (PR) proteins, especially the 15, 18, 23, 26 and 54 kDa proteins, were detected only in the infected tomato leaves. In the two-dimensional electrophoresis, some proteins with different molecular weights (Mr. 21∼29 kDa) and the pI 8∼9 appeared more distinctly only in the incompatible interaction. These data suggest that the de novo synthesis of some PR proteins in tomato may be significant in defense against X. c. pv. vesicatoria.
진해만에서 분리한 무독성 Alexandrium tamarense와 이미 보고된 독성을 가진 A. tamarense종 간의 접속공, 제1상판, 후속공의 형태를 상호 비교하였다. 형태적으로 독성종과 거의 일치되지만, HPLC나 생체실험에서 진해만에서 새롭게 분리한 종은 독성이 전혀 나타나지 않았다. lectin반응결과 무독종 A. tamarense은 PNA와 강한 반응을 보여, 세포표면에 lactose나 galactose와 같은 물질이 많이 분포하고 있음을 보였다. 또한, 단백질 전기영동시 무독종은 유독종과 달리 21 kDa 정도 부위에서 종 특이적 밴드를 보였다. 따라서 PNA lectin이나 면역학적 방법을 이용하면 무독종 A. famarense을 신속하게 동정하는데 이용될 수 있다.
Four Trichoderma strains (CH2, SH16, PQ34, and TN42) were isolated from soil samples collected from Quang Tri and Thua Thien Hue provinces in Vietnam. The strains exhibited high chitinolytic secretion. Strain PQ34 formed the largest zone of chitinase-mediated clearance (> 4 cm in diameter) in agar containing 1% (w/v) colloidal chitin. Analysis of the internal transcribed spacer regions of these strains indicated that they were Trichoderma asperellum. The molecular weights of the chitinases were approximately 42 kDa. Chitinase genes (chi42) of T. asperellum strains TN42, CH2, SH16, and PQ34 were 98~99% homologous to the ech42 gene of T. harzianum CB-Pin-01 (accession No. DQ166036). The deduced amino acid sequences of both T. asperellum strains SH16 and TN42 shared 100% similarity.
The purpose of this study was to evaluate the shear bond strength of compomers according to dentin surface treatment. Two materials of compomer were devided into six groups. The compomer used in this study were Dyract AP(D) and F2000(F), Group 1 (DN) and 4(FN) were treated according to manufacturers instructions as control groups. Group 2(DE) and 5(FE) were treated with 37% phosphoric acid and group 3(DA) and 6(FA) were treated with air abrasion unit (80 psi, 50 m aluminum oxide particles) respectively as experimental groups. After dentin surface treatment, compomers were bonded. Completed samples were stored in 100% humidity. 37C during 7 days, and then, the shear bond strength of specimens were evaluated. The results were as follows: 1. In the case of Dyract AP, the shear bond strength was showed the highest value of 9.10 MPa in dentin surface treatment with air abrasion unit. but there were no significant differences to the other groups. 2. In the case of F2000. the shear bond strength was showed the highest value of 13.51MPa and there were significant differences to the other groups(p<0.05). 3. The shear bond strength of F2000 was higher than Dyract AP in each dentin surface treatment. and in the case of etching and air abrasion. there were significant differences(p<0.05). 4. As a result of observation of SEM. the most of fracture pattern was adhesive failure in group 1(DN), 2(DE) and 4(FN), and cohesive failure in group 3(DA), S(FE) and 6(FA).
Lee , Hyean-Woo;Choi, Jong-Whan;Han, Dong-Pyou;Park, Myoung-Jin;Lee, No-Woon;Yi, Dong-Heui
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제6권1호
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pp.19-25
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1996
Chitosanase from Bacillus sp. HW-002 was purified with CM-cellulose column chromatography, and HPLC with DEAE- TSK gel and YMC-pack Diol 120. The purified enzyme appeared as a single band on SDS-polyacrylamide gel. The molecular weight of the enzyme was estimated to be about 46 kDa on SDS-polyacrylamide gel, and was estimated to be about 23 kDa by GFC. The optimal pH of chitosanolytic activity was about pH 5.5-6.0, and the purified enzyme was most stable at pH 5.0. The optimal temperature of chitosanolytic activity was $65^{\circ}C$ and the enzyme was stable at $45^{\circ}C$ for 1 h. Chitosan was the most favorable substrate among various $\beta$-glucan. UVmax of the purified enzyme was 195 nmand was not noted around 280 nm. The main product of enzyme reaction with chitosan was chitobiose.
We investigated the antagonism of indigenous bacteria isolated from stressed mussels and their extracellular metabolites on the adult zebra mussel, Dreissena polymorpha. Selective bacterial isolates including Aeromonas media, A. salmonicida, A. veronii, and Shewanella putrefaciens, showed strong lethality against adult mussels and 100% mortality was observed within 5 days of incubation. Bacterial metabolites, fractionated and concentrated from stationary-phase culture supernatants of these bacterial isolates, displayed varying degrees of antagonistic effects on zebra mussels. Among the three size fractions examined, <5, 5-10, and >10 kDa, the mast lethal fraction seems to be >10 kDa for three of the four isolates tested. Further chemical analyses of these size fractions revealed that the predominant constituents were polysaccharides and proteins. No 2-keto-3-deoxyoctanoic acid (2-KDO), deoxyribonucleic acids (DNA) or uranic acid were detectable. Extraction of supernatants of two antagonistic isolates with polar solvent suggested that polar molecules are present in the active fraction. Our data suggest that extracellular metabolites produced by antagonistic bacteria are also involved in disease development in zebra mussels and elucidation of the mechanisms involved may offer a novel strategy for control of biofouling invertebrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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