• 제목/요약/키워드: DPPH assay

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Evaluation of antioxidant property of heat shock protein 90 from duck muscle

  • Zhang, Muhan;Wang, Daoying;Xu, Xinglian;Xu, Weimin
    • Animal Bioscience
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    • 제34권4호
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    • pp.724-733
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    • 2021
  • Objective: The objectives of this study were to investigate the direct antioxidative effect of 90 Kda heat shock protein (Hsp90) obtained from duck muscle. Methods: The interaction of Hsp90 with phospholipids and oxidized phospholipids was studied with surface plasmon resonance (SPR), and their further oxidation in the presence of Hsp90 was evaluated with thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) assay. The scavenging effect on the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azinobis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) was measured, and the electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy in combination with 5-tert-Butoxycarbonyl-5-methyl-1-pyrroline-N-oxide and 2-phenyl-4,4,5,5,-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide (PTIO) was utilized to determine the abilities of Hsp90 in scavenging hydroxyl and PTIO radicals. Results: SPR showed Hsp90 could bind with both phospholipids and oxidized phospholipids, and prevent their further oxidation by the TBARS assay. The DPPH and ABTS scavenging activity increased with Hsp90 concentration, and could reach 27% and 20% respectively at the protein concentration of 50 μM. The EPR spectra demonstrated Hsp90 could directly scavenge ·OH and PTIO· radicals. Conclusion: This suggests that Hsp90, a natural antioxidant in meat, may play an important role in cellular defense against oxidative stress, and may have potential use in meat products.

Evaluation of Antioxidant Activity and Cytotoxicity in Mixture Extract of Artemisia asiatica Nakai and Moringa oleifera Lam

  • Lee, Yoon-Ji;Kim, Jang-Oh;Jeon, Chan-Hee;Lee, Ji-Eun;Shin, Ji-Hye;Min, Byung-In
    • 대한의생명과학회지
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    • 제26권4호
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    • pp.296-301
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    • 2020
  • The purpose of this study was performed to evaluate antioxidant activity of the Artemisia asiatica Nakai and Moringa oleifera Lam mixture extract. Mixture extracts were manufactured by concentration and compared with a single extract (only the Artemisia asiatica Nakai mixture and only the Moringa oleifera Lam mixture). The experiments conducted Total polyphenol measurements, Total flavonoid measurements, DPPH radical scavenging activty, ABTS radical scavenging activty and LDH assay. The LDH assay assessment shows that all extracts are cells compared to controls. The toxicity was weak. Finally, The antioxidant capacity was rated higher than mixture extract of a single extract. Also, the optimized mixture was determined AM5 (Artemisia asiatica Nakai mixture: Moringa oleifera Lam mixture = 3:1). For extracts of AM5, Total phenol and flavonoid contents were 271.769±18.087 mg/g and 45.384±5.026 mg/g. and DPPH and ABTS scavenging activity were 70.8±6.496% and 77.1±9.634%. Therefore, it is expected that the value of the extract will increase as it increases its antioxidant activity if it is manufactured according to the appropriate ratio.

Validation of Analytical Methods for Plasma Total Antioxidant Capacity by Comparing with Urinary 8-Isoprostane Level

  • Lee, Sang Gil;Wang, Taoran;Vance, Terrence M.;Hurbert, Patrice;Kim, Dae-Ok;Koo, Sung I.;Chun, Ock K.
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제27권2호
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    • pp.388-394
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    • 2017
  • Although several analytical methods for measuring total antioxidant capacity (TAC) have been applied to biological samples, there were often dissimilar results due to the different principles of methods applied. Thus, this study aimed to validate four conventional analytical methods for measuring plasma TAC, including the ABTS assay, DPPH assay, FRAP assay, and ORAC assay, by comparing with urinary 8-isoprostane concentration. In addition, TAC results were compared with antioxidant enzyme activities including superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase in erythrocyte, and catalase in plasma. Plasma TAC measure by ABTS assay was strongly correlated with the result by FRAP assay. Plasma TAC by FRAP and ORAC assays were negatively correlated with erythrocyte SOD activity. The agreement among the four TAC assay methods and 8-isoprostane was determined using 95% prediction limits of linear regression, expressed as the mean of 8-isoprostane ${\pm}95%$ prediction limits. The ABTS method better agreed with 8-isoprostane than the other methods, demonstrating narrow prediction of limits. Furthermore, only plasma TAC determined by the ABTS assay was inversely correlated with urinary 8-isoprostane (r = -0.35, p < 0.05). In summary, the ABTS assay would be an appropriate method to measure overall plasma antioxidant capacity and predict the body's antioxidant status.

접골목 추출물에 의한 항산화 활성이 정상 간세포의 t-BHP 유발 산화스트레스에 미치는 영향 (Antioxidant Activity and Protective Effects of Extracts from Sambucus williamsii var. coreana on t-BHP Induced Oxidative Stress in Chang cells)

  • 김기태
    • 대한한의진단학회지
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    • 제17권3호
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    • pp.275-286
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    • 2013
  • In the present study, antioxidant activity and protective effect of extracts from Sambucus williamsii var. coreana stems (SWC) were evaluated on tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) induced oxidative stress in human liver (Chang) cells. Antioxidant activities of the SWC extracts were determined by various radical scavenging activities, such as DPPH, ferric reducing antioxidant power (FRAP), 2,2'-azinobis-(3-ethybenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging activity and oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay. SWC extracts showed strong antioxidant effect on various assay. To determine the hepatoprotective effects of SWC on t-BHP induced oxidative damage, cell viability was measured using MTT assay. Pretreatment of SWC extracts showed increasing cell viability, decreasing ROS and restoring mitochondria membrane potential on t-BHP induced oxidative stress in Chang cells. Our findings suggest that SWC extracts may be considered a potential agent for therapeutic protective effect from oxidative stress through its antioxidant activity.

오가피순 추출물의 항산화 효과 및 아질산염 소거능 (Antioxidant Effects and Nitrite Scavenging Ability of Extract from Acanthopanax cortex Shoot)

  • 유석영;이영준;송호성;홍희도;임정호;최현선;이부용;강석남;이옥환
    • 한국식품영양학회지
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    • 제25권4호
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    • pp.793-799
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    • 2012
  • 본 연구에서는 오가피순 추출물의 항산화 효과를 평가하였다. 오가피순 추출물의 총 페놀 함량과 플라보노이드 함량은 각각 $116.33{\pm}6.09mg\;GAE/g$, $65.07{\pm}4.10mg\;RE/g$으로 나타났다. 오가피순 추출물의 항산화능은 다양한 항산화 모델(DPPH, FRAP, Reducing power, ABTS, ORAC assay)을 이용하여 평가하였다. ORAC assay를 제외한 위의 항산화 모델에서는 0.1, 0.5 및 $1.0mg/m{\ell}$의 농도로 측정한 결과, DPPH 라디칼 소거능은 오가피순 추출물의 농도가 증가함에 따라 $23.3{\pm}0.8$, $28.8{\pm}1.3$$33.7{\pm}3.7%$로 평가되었고, ABTS 경우에는 6.42, 12.47 및 16.69%로 측정되었다. 또한, FRAP 활성은 0.081, 0.160 및 0.259로, Reducing power는 0.034, 0.097 및 0.180으로 나타나 추출물의 농도가 증가함에 따라 항산화활성도 증가하였다. 한편 $0.1mg/m{\ell}$에서의 ORAC value는 $103.4{\pm}3.6{\mu}M\;TE/g$으로 나타났고, 아질산염 소거능은 0.1, 0.5 및 $1.0mg/m{\ell}$의 농도에서 각각 3.6, 9.0 및 13.2%로 나타났다. 최근 건강기능 식품의 관심도가 증가하는 것을 고려해 볼 때, 오가피순 추출물은 기능성식품 또는 천연 항산화제의 소재로써의 이용 가능성을 보였다.

칠면초 분획물의 항산화 활성 (Antioxidant Activities of the Extract Fractions from Suaeda japonica)

  • 최종일;김연주;김재훈;송범석;윤요한;변명우;권중호;전순실;이주운
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제38권2호
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    • pp.131-135
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    • 2009
  • 칠면초(Suaeda japonica)를 식품 및 공중보건 산업에서 활용하기 위한 기초자료를 마련하기 위하여 항산화성을 측정해 보았다. 칠면초 분획 추출물의 폴리페놀 함량을 측정한 결과 ethyl acetate 추출물의 폴리페놀 함량이 21.33 mg/g으로 나타났고, 다음으로 butanol(17.31 mg/g), methanol(2.33 mg/g) 순이었으며, water 추출물에서는 폴리페놀이 검출되지 않았다. $\beta$-carotene bleaching assay를 측정한 결과 칠면초 butanol 추출물의 흡광도 감소 정도가 가장 적었고 다음으로 ethyl acetate, methanol 및 water 추출물 순으로 나타났다. 칠면초 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 측정한 결과 butanol, ethyl acetate, methanol 및 water 추출물 순으로 각각 77.46, 74.43, 47.99 및 27.70%로 나타났다. FRAP 측정결과 butanol 추출물의 FRAP value가 2.42 mM로 가장 높게 나타났다. 칠면초 추출물은 모두 무처리군보다 낮은 지질산패도(TBARS)를 나타내었으며, 특히 methanol 및 ethyl acetate 추출물이 높은 지질산패 저하능을 나타내었다. Butanol 추출물은 전자공여능, $\beta$-carotene bleaching assay 및 FRAP 실험에서 가장 높은 항산화 활성을 보여주었고, ethyl acetate 추출물은 폴리페놀 및 TBARS 측정 실험에서 높은 항산화 활성을 나타내어 칠면초 각각의 추출물에 다양한 항산화를 갖는 항산화제가 존재하는 것을 확인할 수 있었다.

메뚜기류 추출물의 염증 조절작용 및 세포사멸보호 효과 (Anti-inflammatory and Cellular Protective Effects on Hydrogen Peroxide-induced Cytotoxicity of Grasshopper Extracts)

  • 박자영;허진철;우상욱;윤치영;강석우;황재삼;이상한
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제13권6호
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    • pp.796-802
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    • 2006
  • 항산화능이 있는 곤충 추출물을 검색하기 위하여 초고속 스크리닝 시스템을 이용하여 몇 가지의 hit를 검색하였다. 메뚜기를 각 용매별 (DW, DMSO, Ethanol, Methanol)로 추출하여 추출물을 제조하였으며, 이들 추출물의 항산화능 검색과 함께 과산화 수소의 세포 독성에 대한 보호 효과에 대하여 조사하였다. 그 결과, 항산화 관련 실험인 DPPH, FRAP assay의 경우 실험에 사용된 모든 메뚜기류의 모든 에탄올과 메탄을 추출물에서 $50{\sim}60%$ 정도의 항산화 활성을 보였고, SH-SY5Y cells를 이용한 과산화 수소로 유도된 세포독성에 대해서는 과산화 수소만 처리한 세포의 생존율이 14% 정도인데 추출물을 처리한 세포의 생존율은 증가하는 것으로 나타났으며 특히 벼메뚜기의 DW 추출물을 처리하였을 때 생존율이 50% 정도로 증가하여 높은 세포보호효과를 보였다. 또한 항산화 실험과 연관지어 염증관련 분자 표적 유전자인 Cox-2의 억제능을 살펴보기 위해 Cox-2 promoter assay를 실시하였는데 DMSO 추출물에서 좋은 활성을 보였을 뿐 다른 추출물에서는 억제능을 나타내지 않았다. 본 실험의 결과는 메뚜기류 추출물이 천연 항산화제를 이용하는 기능성 소재에 적합한 천연물질이라는 것을 보여준 것으로 앞으로 생물활성과 유용성분의 분리정제를 통해 순수 물질을 확보하여 보다 많은 연구 결과의 축적이 필요하다.

Antioxidant Activity of Porcine Skin Gelatin Hydrolyzed by Pepsin and Pancreatin

  • Chang, Oun Ki;Ha, Go Eun;Jeong, Seok-Geun;Seol, Kuk-Hwan;Oh, Mi-Hwa;Kim, Dong Wook;Jang, Aera;Kim, Sae Hun;Park, Beom-Young;Ham, Jun-Sang
    • 한국축산식품학회지
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    • 제33권4호
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    • pp.493-500
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    • 2013
  • Gelatin is a collagen-containing thermohydrolytic substance commonly incorporated in cosmetic and pharmaceutical products. This study investigated the antioxidant activity of gelatin by using different reagents, such as 2,2-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline- 6-sulfonic acid) (ABTS), 2,2-di (4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl (DPPH), and oxygen radical absorbance capacity-fluorescein (ORAC-FL) in a porcine gelatin hydrolysate obtained using gastrointestinal enzymes. Electrophoretic analysis of the gelatin hydrolysis products showed extensive degradation by pepsin and pancreatin, resulting in an increase in the peptide concentration (12.1 mg/mL). Antioxidant activity, as measured by ABTS, exhibited the highest values after 48-h incubation with pancreatin treatment after pepsin digestion. Similar effects were observed at 48 h incubation, that is, 61.5% for the DPPH assay and 69.3% for the ABTS assay. However, the gallic acid equivalent (GE) at 48 h was $87.8{\mu}M$, whereas $14.5{\mu}M$ GE was obtained using the ABTS and DPPH assays, indicating about sixfold increase. In the ORACFL assay, antioxidant activity corresponding to $45.7{\mu}M$ of trolox equivalent was found in the gelatin hydrolysate after 24 h hydrolysis with pancreatin treatment after pepsin digestion, whereas this activity decreased at 48 h. These antioxidant assay results showed that digestion of gelatin by gastrointestinal enzymes prevents oxidative damage.

석류 추출물의 항산화 작용 (Anti-oxidant Activities of Punica granatum Extracts)

  • 노보경;김지영;김주연
    • 대한화장품학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.207-212
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    • 2005
  • 강한 천연 생리활성물질인 폴리페놀과 탄닌을 다량 함유한 석류를 노화방지제 및 기능성화장품의 화장품 원료로 이용할 수 있는 가능성을 제시하고자, 과즙과 과피 및 종자유로 나누어 분리추출한 후, DPPH radical과 superoxide의 소거작용, 세포내 $H_2O_2$와 hydroperoxide 및 superoxide 생성 억제작용에 미치는 영향에 관하여 실험하여 항산화 작용을 비교 평가하였다. 석류과피 메탄올 추출액은 전반적으로 가장 유의성 있는 항산화 작용을 보였다. 자체적인 항산화 작용뿐만 아니라 세포내에서 free radical이 생성되는 것을 억제하는 작용도 있는 것으로 여겨지며, 석류과즙 농축액은 free radical을 소거하는 항산화 작용이 있으며, 또한 석류 종자유는 강한 hydroperoxide 생성 억제효과를 나타내어, 특히 hydroxy기를 가진 readical의 생성을 억제하는데 효과가 있는 것으로 사료된다. 이상과 같은 결과로 보아, 석류의 과즙보다는 과피의 추출물이 항산화 작용이 더 뛰어난 것을 알 수 있었으므로 피부미용에 관련된 건강보조식품 개발시 과피성분을 함유한 추출물을 원료로 사용하는 것이 효과적이라고 사료되며, 특히 피부 주름 방지제 등과 같은 기능성 화장품을 개발하고자 할 때는 석류 종자유를 화장품 원료로 하여 개발하는 것이 더 효과적이라고 사료된다.

Brachythecium populeum 추출물의 항산화 및 항염효과 (Antioxidant and Anti-Inflammatory Activity of Brachythecium populeum Extract)

  • 박상남;이옥희
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제55권3호
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    • pp.174-183
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    • 2023
  • Brachythecium populeum 의 상업적 사용 가능성을 확인하기 위하여 항산화능 실험과 세포 독성, 항염능 실험을 실시하였다. 폴리페놀과 플라보노이드 농도 측정에서는 70% 에탄올 추출이 증류수 추출에 비해 높은 농도를 나타내어, 70% 에탄올이 추출물의 유효성분 및 추출 수율의 측면에서 가장 적합한 추출용매란 것을 확인하였다. DPPH, ABTS에서는 증류수 추출물에 비해 70% 에탄올 추출물의 항산화능이 높은 것을 확인하였다. 이는 B. populeum 유효성분의 극성에 따른 것으로 생각된다. 항염능 실험에서는 세포 독성과 항염능을 알아보았다. 세포독성의 경우 양 추출물 모두낮은 세포독성을 보였으며, 염증 전달 물질인 NO 생성 억제능의 경우 70% 에탄올 추출물이 증류수 추출물에 비해 통계적으로 유의한 수준의 항염능 증가를 보였다. 염증성 사이토카인인 IL-1β, IL-6, TNF-α의 농도를 측정한 결과 100 ㎍/mL 농도에서 각각 9.39%, 11.87%, 14.49%의 억제효과를 나타내었다. 이를 통해 B. populeum의 70% 에탄올이 염증 억제를 위한 물질로서 사용 가능함을 보였다.