Chromosome breakage occurred by DNA methylation inhibitor. Zebularine is known as DNA methylation inhibitor and suitable for water solubility among different DNA methylation inhibitors as 5-Azacytidine and 5-aza-2'-deoxycytidine. We used zebularine as mutagen according to different methods by roots absorption and seed imbibition. After zebularine treatment, DNA methylation inhibitor, we observed mitotic chromosome behavior what is different according to two different treatment methods. First, seed imbibition treatment in 1,000 μM of zebularine solution for 72 hours in dark conditions. The second treatment to seedlings of Keumkang was also treated in 1,000 μM of zebularine solution for 72 hours after germination. Root and shoot showed different elongations in each treatment. Root absorption treatment(3.01±0.48, 2.00±0.26) showed the shortest elongation in root and shoot than control(8.16±0.61, 4.03±0.48) and seed imbibition treatment(4.33±0.80, 2.48±0.36). It can be explained root tip meristematic cell activity was damaged by DNA methylation inhibitor. Primary root tips were collected in DW for 24 hours at low temperature(0℃) and fixed in fixation solution for 3 days to chromosome observation in mitosis. Mitotic index, chromosome structure and chromosome aberration were observed by phase-contrast microscope. Mitotic index of the control(0.29) showed twice mitotic cells as the treated groups(imbibition 0.15, absorption 0.14). Observation of chromosomes showed some short chromosomes and loosen chromosomes affected by zebularine. It is considered because of zebularine damage DNA in mitosis. We observed "gap by chromosome breakage" in chromosomes that have loose parts between centromere and telomere. It seems demethylation of zebularine occurs chromosome breakage.
1990년 8월 충북 보은의 참깨 밭에서 전형적인 엽화병(葉化病; phyllody disease)이 발생하였다. 병징은 꽃이 잎처럼 녹색으로 변하고, 이병엽은 정상엽보다 작고 잔가지가 마치 빗자루 모양으로 총생하였고 개화 및 결실이 되지 않았다. 투과 전자현미경으로 병든 잎의 사관요소에서 phytoplasma가 존재하는 것을 확인하였다. 병든 잔가지에서 추출한 DNA를 중합효소 연쇄반응으로 분석한 결과 대추나무 빗자루병에 걸린 나무에서 증폭되는 DNA와 같은 크기의 band가 관찰되었다. 따라서 위의 시료는 phytoplasma 벙으로 확인 되었으며 참깨 엽화병으로 명명하였다. 또한 참깨 엽화병을 일으키는 phytoplasma와 대추 나무 빗자루병 phytoplasma를 PCR 증폭 및 제한효소로 절단하여 분석한 결과 이들은 서로 다른 그룹이라는 것을 알 수 있었다.
Objectives : Persicaria tinctoria belongs to the Polygonaceae family and it has been used as the natural dye traditionally. Also, it is well known that the Persicaria tinctoria is used for treating the following symptoms such as fever, inflammation and edema. The purpose of this study is to investigate the effective source of antioxidants and anti-inflammatory agent from various parts of Persicaria tinctoria.Methods : We investigated the antioxidative and anti-inflammatory properties of the Persicaria tinctoria extracts. Antioxidant activities were measured by 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl (DPPH), 2, 2'-Azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS) radical scavenging activity, Fe2+ chelating activity and Reducing power of Persicaria tinctoria extracts. And its inhibitory effect against oxidative DNA damage was evaluated in non-cellular system using φX-174 RF I plasmin DNA. The anti-inflammatory effect of Persicaria tinctoria was measured by using the inhibitory efficacy for the amount of nitric-oxide (NO) produced in LPS induced RAW264.7 cells.Results : The extracts from stem part showed better DPPH scavenging activity compared to those of the leaf and root extracts. Their IC50s were measured as 7.17, 144.40 and 165.07 ug/ml, respectively. These results were similar to that of ABTS radical scavenging assay and reducing power. Also, Persicaria tinctoria showed the protective effects of DNA damage against oxidative stress and anti-inflammatory effect by suppression of NO production in LPS induced RAW264.7 cells.Conclusions : These results showed that various parts of Persicaria tinctoria can be used as an effective source of antioxidants and anti-inflammatory agents via antioxidative activities and anti-inflammatory effect.
Kim, Hyoun-Joung;Lee, Heung-Ryul;Han, Jung-Heon;Yeom, Seon-In;Harn, Chee-Hark;Kim, Byung-Dong
Molecules and Cells
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제25권2호
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pp.196-204
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2008
Despite increasing awareness of the importance of WRKY genes in plant defense signaling, the locations of these genes in the Capsicum genome have not been established. To develop WRKY-based markers, primer sequences were deduced from the conserved sequences of the DNA binding motif within the WRKY domains of tomato and pepper genes. These primers were derived from upstream and downstream parts of the conserved sequences of the three WRKY groups. Six primer combinations of each WRKY group were tested for polymorphisms between the mapping parents, C. annuum 'CM334' and C. annuum 'Chilsung-cho'. DNA fragments amplified by primer pairs deduced from WRKY Group II genes revealed high levels of polymorphism. Using 32 primer pairs to amplify upstream and downstream parts of the WRKY domain of WRKY group II genes, 60 polymorphic bands were detected. Polymorphisms were not detected with primer pairs from downstream parts of WRKY group II genes. Half of these primers were subjected to $F_2$ genotyping to construct a linkage map. Thirty of 41 markers were located evenly spaced on 20 of the 28 linkage groups, without clustering. This linkage map also consisted of 199 AFLP and 26 SSR markers. This WRKY-based marker system is a rapid and simple method for generating sequence-specific markers for plant gene families.
유전자 감식은 다양한 범죄현장에서 발견되는 생체시료의 분석을 통해 신원을 식별하는 중요한 법과학적 수사과정으로 자리 잡았다. 최근에는 범인이 사용했던 펜, 뺑소니 차량에서의 핸들, 기어, 각종 버튼스위치 등에 남겨져 있는 touch evidence-type sample로 알려져 있는 low copy number (LCN) DNA에서의 A-STR분석을 위해 의뢰되는 감정물들이 증가하는 추세에 있다. 본 연구에서는 총기의 뭉개진 지문 등에 남겨져 있는 touch evidence-type의 LCN DNA를 추출하고 유전자형의 분석 성공률을 확인하고 자 하였다. 4종류의 총기(M16, K1A, COLT 45 권총, M29 리볼버)를 각각 격발한 후 총기별로 4곳의 부위에서 시료를 채취한 다음 LCN DNA의 추출을 위해 Microkit과 $Prepfiler^{TM}$ 등 2종류의 시약을 이용하여 DNA 검출량과 유전자형 분석 성공률을 비교 분석하였다. 분석결과 $Prepfiler^{TM}$가 Microkit에 비해 평균 1.7배 DNA검출량이 많았으며, 유전자형 분석 성공률에 있어서도 Microkit은 0%인데 비해 $Prepfiler^{TM}$에서는 평균 24.9%의 성공률을 보였으며, K1A의 손잡이 부위에서 50.6%의 성공률을 나타냈다.
Several gene delivery therapies are being developed for treatment of serum protein deficiency. EPO is one of the most promising therapeutic agent for this treatment which is currently being investigated in depth. This study has the ultimate purpose of improving the gene delivery system for an increase of red blood cell production. A plasmid DNA was constructed smaller than other plasmids for an increase in penetration into animal cells, and two genes were cloned into each vector as a co-delivery system to express erythropoietin, and interluekin-3 or thrombopoietin, which can act on erythroid cell, thus activating hematopoiesis synergically. This co-delivery system has an advantage of decreasing the labour required for industrial production of DNA vaccine. A new plasmid vector, pVAC, in size 2.9 kb, was constructed with the essential parts from PUC 19 and pSectagB, which is much smaller than other plasmid vector and is the size of 2.9 kb. Co-delivery system was constituted by cloning human erythropoietin with each of human interluekin-3 gene or human thrombopoietin gene into both pVAC and pSectagB. As a result, the transfection efficiency of pVAC was higer than that of pSectagB in vitro, and hematocrit level of the mice injected with pVAC is higher than that of other mice. And co-delivery system, made of several plasmid DNAs, was expressed in vitro.
Many antibiotics contain partially deoxygenated sugar components that are usually essential for biological activity, affinity, structural stability, and solubility of antibiotics. Gene probes of the biosynthetic genes related with the deoxysugar were obtained from PCR. Primers were designed from the conserved peptide sequences of the known dTDP-D-glucose 4,6-dehydratases, which are the key step enzymes in the biosynthesis of deoxysugar. The primers were applied to amplify parts of dehydratase genes to 27 actinomycetes that produce the metabolites containing deoxysugar as structural constituents. About 180 and 340 bp DNA fragments from all of the actinomycetes were produced by PCR and analyzed by Southern blot and DNA sequencing. The PCR products were used as gene probes to clone the biosynthetic gene clusters for the antibiotic mithramycin, rubradirin, spectinomycin, and elaiophyrin. This method should allow for detecting of the biosynthetic gene clusters of a vast array of secondary metabolites isolated from actinomycetes because of the widespread existence of deoxysugar constituents in secondary metabolites.
Hybridization of DNA isolated from leaves of Russet Burbank potato with tomato cDNA as a probe revealed the presence of about ten inhibitor 1 genes in the genome. Screening of a genomic library of Russet Burbank potato resulted in isolation of seven different genomic clones carrying inhibitor I genes. One of the genomic clones, clone 2, contained two EcoRI fragments of 3.4 and 1.8 kb in size, respectively, which were hybridized with the probe. The nucleotide sequence of parts of the hybridizing EcoRI fragments revealed that they contain a complete gene which codes for an open reading frame of 107 amino acids. It is interrupted by two intervening sequences of 502 and 493 bp, situated at the positions of codons 17 and 43, respectively, of the open reading frame. Putative regulatory sequences, TATAAA and CCACT, were found at the 5' flanking region. In addition, a copy of a 100 bp repeat found at a tomato inhibitor I gene was identified.
Two crinoid specimens of genus Tropiometra were collected from Busan and Tongyeong by SCUBA diving on August 2010 and October 2011, respectively. The specimens were identified as Tropiometra macrodiscus (Hara, 1895), which belongs to the family Tropiometridae of superfamily Tropiometroidea. The genus Tropiometra AH Clark, 1907 comprises four species worldwide at present, and it has not been reported in Korea. Tropiometra macrodiscus was first described by Hara (1895) in Japan. It is difficult to distinguish T. macrodiscus from T. afra (Hartlaub, 1890), there has been confusion with examination of their phylogenetic positions in crinoid morphological classification. Despite this, T. macrodiscus can be distinguished from T. afra based on longer arms, stouter whole-body parts, magnificently larger numbers of cirrus, and numerous segments. The morphological characteristics of T. macrodiscus collected in Korea have been described, and DNA barcode region representing cytochrome c oxidase subunit I was obtained for its molecular phylogenetic analysis.
TFD is a transcription factor database which consists of short functional DNA sequences called as signals and their references. SIGNAL SCAN, developed by Dan S. Prestridge, is used to determine what signals of TFD may exist in a DNA sequence. This program searches TFD database by using a simple algorithm for character string comparison. We developed TFSCAN that aims at searching for signals in an input DNA sequence more efficently than SIGNAL SCAN. Our algorithms consist of two parts, one constructs an automata by scanning sequences of rFD, the other searches for signals through this automata. Searching for signal-related references is radically improved in time by using an indexing method. Usage of TFSCAN is very simple and its output is obvious. We developed and installed a TFSCAN input form and a CGI program in GINet Web server, to use TFSCAN. The algorithm applying automata showed drastical results in improvement of computing time. This approach may apply to recognizing several biological patterns. We have been developing our algorithm to optimize the automata and to search more sensitively for signals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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